第五章 平面色譜法

第六章平面色譜法

定義：平面色譜法(planechromatography)是在平面上進(jìn)行分離的一種色譜方法；主要包括薄層色譜法、紙色譜法和薄層電泳法。

第一節(jié)平面色譜法的分類(lèi)和原理一、平面色譜法的分類(lèi)薄層色譜法紙色譜法薄層電泳法二、平面色譜法參數(shù)（一）定性參數(shù)1.比移值Rf(retardationfactor；Rf)溶質(zhì)移動(dòng)的距離與流動(dòng)相移動(dòng)距離之比

圖示

Rf范圍：

0<Rf<1Rf=0.2~0.8（常用）

Rf=0.3~0.5（最佳）nextL0backL1L2圖18－12.相對(duì)比移值Rs

討論參考物與被測(cè)組分在完全相同條件下展開(kāi)可以消除系統(tǒng)誤差，大大提高重現(xiàn)性和可靠性；參考物可以是后加入純物質(zhì)，也可是樣品中已知組分相對(duì)比移值Rs與組分、參考物性質(zhì)及色譜條件有關(guān)，范圍可以大于或小于1（二）相平衡參數(shù)相平衡參數(shù)：分配系數(shù)K和容量因子k前面推導(dǎo)出R’表示單位時(shí)間內(nèi)一個(gè)分子在流動(dòng)相中出現(xiàn)的幾率，也可以表示組分分子在平面上移動(dòng)的速度.Rf＝L/L0=ut/u0t，定時(shí)展開(kāi)時(shí)R’＝Rf討論

⑴

Rf與K有關(guān)，即與組分性質(zhì)（溶解度）以及薄層板和展開(kāi)劑的性質(zhì)有關(guān)，K↑大，Rf↓?、票影逡欢?，Rf只與組分性質(zhì)有關(guān)，對(duì)于極性組分，

展開(kāi)劑極性↑大，Rf↑大（容易洗脫）展開(kāi)劑極性↓小，Rf↓小（不容易洗脫）

⑶Rf＝1K或k=0組分在前沿

Rf＝0K或k=∞組分在原點(diǎn)（三）面效參數(shù)1、理論塔板數(shù)n=16(L/W)2L:原點(diǎn)到斑點(diǎn)中心的距離

W：組分斑點(diǎn)的縱向?qū)挾?、塔板高度H=L0/nL0：原點(diǎn)到展開(kāi)劑前沿的距離

n越大，H越小。（四）分離參數(shù)1、分離度(resolution;R)兩相鄰斑點(diǎn)中心的距離與兩斑點(diǎn)平均寬度的比值

R=2(L2-L1)/(W1+W2)=2d/(W1+W2)L1

、L2:分別為原點(diǎn)至兩半斑點(diǎn)中心的距離，W1、W2斑點(diǎn)的寬度。2.分離數(shù)(separationnumber;SN)定義：相鄰斑點(diǎn)分離度為1.177時(shí)，在Rf=0(原點(diǎn))到Rf=1(溶劑前沿)之間能容納的色譜斑點(diǎn)數(shù)。

SN=L0/(b0+b1)-1

一般薄層板的分離數(shù)為7~10，高效薄層板可達(dá)10~20。SN是衡量分離容量的重要參數(shù)第三節(jié)薄層色譜法一、主要類(lèi)型二、吸附劑與展開(kāi)劑三、操作方法四、定性與定量分析五、高效薄層色譜法六、薄層掃描法七、應(yīng)用實(shí)例概述1．定義：將固定相均勻涂布在表面光滑的平板上，形成薄層而進(jìn)行色譜分離和分析的方法2．操作過(guò)程：見(jiàn)圖示鋪板→活化

→點(diǎn)樣

→

展開(kāi)

→定位(定性)/洗脫(定量)3．分離機(jī)制：吸附*、分配*、離子交換、空間排阻4．特點(diǎn)；分離能力強(qiáng)、靈敏度高、展開(kāi)時(shí)間較短、顯色方便。5．應(yīng)用：藥物雜質(zhì)檢查、純度測(cè)定、定量next

一、主要類(lèi)型（一）吸附薄層色譜固定相為吸附劑的薄層色譜。利用吸附劑對(duì)不同組分的吸附能力差異而實(shí)現(xiàn)分離.經(jīng)過(guò)吸附、解吸、再吸附、再解吸……最后混合物得到分離.K大，Rf值小，移動(dòng)慢；K小，Rf大，移動(dòng)快。（二）分配薄層色譜

固定相為液體，吸留在載體上的薄層色譜。利用被分離組分在固定相與流動(dòng)相中的分配系數(shù)不同而被分離。常用的是反相薄層色譜法，固定相是烷基化學(xué)鍵合相，展開(kāi)劑是水及與水相溶的有機(jī)溶劑。二、吸附劑與展開(kāi)劑(一）吸附劑硅膠：硅膠H、硅膠G、硅膠F254氧化鋁：可分為中性（pH7.5)、堿性（pH9.0）和酸性（pH4.0）（二）展開(kāi)劑常用的有：

石油醚<環(huán)己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水吸附劑與展開(kāi)劑的選擇展開(kāi)劑的選擇：根據(jù)被測(cè)組分、吸附劑和展開(kāi)劑本身的極性吸附劑的選擇：根據(jù)被