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細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)及檢測(cè)1.概述2.細(xì)胞凋亡的過(guò)程與機(jī)制3.凋亡與壞死的區(qū)別4.細(xì)胞凋亡生物學(xué)意義5.細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)及檢測(cè)細(xì)胞凋亡
細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在一定的生理或病理?xiàng)l件下,受內(nèi)在遺傳機(jī)制的控制自動(dòng)結(jié)束生命的過(guò)程。
悉尼·布雷諾爾羅伯特·霍維茨約翰·蘇爾斯頓2002年諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者概述apoptosis
一、細(xì)胞死亡的模式■Necrosis=細(xì)胞病理性死亡■Apoptosis=細(xì)胞自發(fā)性死亡壞死凋亡凋亡的過(guò)程及機(jī)制凋亡誘導(dǎo)因素
死亡信號(hào)凋亡相關(guān)基因激活
Caspases激活、DNase激活凋亡的執(zhí)行
巨噬細(xì)胞吞噬分解凋亡細(xì)胞凋亡細(xì)胞清除
細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別
特征
細(xì)胞凋亡
細(xì)胞壞死誘導(dǎo)因素生理及弱刺激強(qiáng)烈刺激受累范圍單個(gè)細(xì)胞丟失成群細(xì)胞死亡膜完整性保持到晚期早期即喪失細(xì)胞體積減小、固縮增大腫脹染色質(zhì)凝聚成半月形稀疏成網(wǎng)狀細(xì)胞器無(wú)明顯變化腫張破壞溶酶體保持完整破壞外溢細(xì)胞形狀形成凋亡小體破裂成碎片基因組DNA有控降解隨機(jī)降解大分子合成一般需要不需要基因調(diào)控有無(wú)后果不引起炎癥反應(yīng)引起炎癥反應(yīng)意義生理死亡方式病理死亡方式
一、細(xì)胞死亡的模式■Necrosis=細(xì)胞病理性死亡■Apoptosis=細(xì)胞自發(fā)性死亡壞死凋亡凋亡的生理學(xué)意義:■胚胎發(fā)育期去除某些細(xì)胞■維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定
增殖細(xì)胞群中細(xì)胞去除、去除潛在有害的自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞■參與防御反應(yīng)細(xì)胞毒T細(xì)胞
凋亡過(guò)多或不足→→疾?。耗[瘤、艾滋病、神經(jīng)變性性疾病、缺血性損傷細(xì)胞凋亡1、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)
光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡
未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞V變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,晚期可見(jiàn)凋亡小體。染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色、蘇木精染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,呈新月?tīng)罡皆诤四ぶ車(chē)?。熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變來(lái)評(píng)判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。常用的DNA特異性染料有:HO,Hoechst33342;HO,Hoechst33258;DAPI
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