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文檔簡介
目的基因的獲得及分離方法2023/10/1311.1目的基因的獲得來源:動、植物體,微生物,化學(xué)合成等。
1.1.1概念目的基因那些已被或者準(zhǔn)備要分離、改造、擴(kuò)增或表達(dá)的特定基因或DNA片段,主要指結(jié)構(gòu)基因。
目的基因包括蛋白(酶)基因、抗逆性相關(guān)基因、生物藥和保健品相關(guān)基因、毒物講解相關(guān)的基因等。2023/10/1321.1.2結(jié)構(gòu)基因組成1.原核生物的基因組成(1)基因區(qū):操縱子形式存在,但各基因分別有ATG的起始密碼子和TAA(TAG、TGA)的終止密碼子。(2)啟動區(qū):RNApol識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段DNA核苷酸序列。(3)SD區(qū):在起始密碼子ATG上游約10bp處,有一個富含嘌呤的保守序列,其與16SrRNA3′端序列互補(bǔ)。
SD區(qū)的作用:SD序列與起始密碼子ATG之間的距離決定了mRNA在細(xì)菌中的轉(zhuǎn)錄效率。(4)轉(zhuǎn)錄終止子和終止因子轉(zhuǎn)錄終止子:一個基因或一個操縱子3′端,提供轉(zhuǎn)錄停止信號的DNA核苷酸序列。終止因子:協(xié)助RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子的蛋白。2023/10/1332.真核生物基因組成(1)基因區(qū)(2)轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)(3)轉(zhuǎn)錄終止子
不含SD序列,核糖體與mRNA5’端的帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合2023/10/1342023/10/1351.1.3基因的排列
基因組的每個基因一般一個一個直線排列在DNA分子上,并且兩個基因之間存在非編碼的間隔序列,但存在一些特殊排列。1.重疊基因(overlappinggenes)核苷酸序列彼此重疊的基因,即不同基因共用同一段DNA的核苷酸序列,他們的核苷酸序列彼此重疊。2023/10/1362.重復(fù)基因2006年3月15日報道:隨著多種生物基因組被破譯,科學(xué)家證明生物的新基因是通過基因重復(fù)獲得的。美中兩國科學(xué)家組成的研究小組在最近的研究中證明,進(jìn)化理論所推斷的“重復(fù)基因中的一部分可能產(chǎn)生新功能,有助于生物對環(huán)境適應(yīng)”的論斷是正確的。3.加倍基因多倍體生物中的基因,與重復(fù)基因相似4.基因重排有的基因組中,同一基因簇處在不同細(xì)胞中時,基因排列會發(fā)生變化。2023/10/137目的基因分離是基因工程研究和應(yīng)用的關(guān)鍵內(nèi)容不同基因組類型的基因組大小、基因組成和基因排列各不相同根據(jù)不同的實驗要求,采用不同的途徑和方法分離目的基因(開放閱讀框)2023/10/1381.2目的基因的分離方法
根據(jù)不同類型基因組的大小、基因組成和基因排列方式不同,采用以下的方法可以把目的基
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