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病原微生物室崗前學(xué)習(xí)利川市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科余清源什么是微生物微生物是存在于自然界的一大群形體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼不能直接看到,必須借助光學(xué)或電子顯微鏡放大數(shù)百倍至數(shù)萬倍才能看到的微小生物。包括:微生物的特點(diǎn)……1.結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單:以單細(xì)胞和細(xì)菌群體形式存在2.代謝旺盛(四個(gè)期)3.變異快,適應(yīng)能力強(qiáng)(鑒定困難、經(jīng)驗(yàn)用藥的挑戰(zhàn))4.種類多、分布廣、數(shù)量大5.個(gè)體微小病原微生物室職能?一.研究標(biāo)本的采集、運(yùn)送和保存的方法及標(biāo)本處理方法對(duì)檢出率的影響血培養(yǎng)時(shí)間:未使用抗生素之前、發(fā)熱初期或高峰期;采血量:成人10~20ml兒童3~5ml頻率:應(yīng)該24小時(shí)采3套,以提高陽(yáng)性率。急性膿毒病:10分鐘內(nèi)從不同的部位采集2-3套。急性心內(nèi)膜炎:1-2小時(shí)從3個(gè)分離部位采3套。亞急性心內(nèi)膜炎:從不同部位采3套,間隔15分鐘,如24小時(shí)內(nèi)為陰性,要再采3套。原因不明發(fā)熱:從不同部位采2-3套,間隔≥1小時(shí),如24小時(shí)內(nèi)為陰性,須再采3套。淋球菌培養(yǎng):培養(yǎng)用的標(biāo)本于采集后最好是馬上接種,若不能,則應(yīng)置于標(biāo)本運(yùn)送培養(yǎng)基中。置于運(yùn)送培養(yǎng)基中的標(biāo)本,室溫條件下,12小時(shí)內(nèi)的分離率為100%,24小時(shí)的分離率為90%。尿培養(yǎng):

所有標(biāo)本采集后都應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室,最好在2小時(shí)內(nèi)。如果不能及時(shí)送檢,放置于冰箱內(nèi),但不要超過24小時(shí)痰培養(yǎng):1.采集方法2.一般醫(yī)用棉簽抑菌作用3.消化液接種平皿的選擇:不同標(biāo)本的組合接種方法的選擇:分幾區(qū)發(fā)線

二.明確病原體檢測(cè)方法的選擇、鑒定程序的選擇等直接鏡檢:不需要藥敏結(jié)果,如TB、GN、五聯(lián)檢等血清學(xué)診斷試劑:沙門、志賀等顯色培養(yǎng)皿:科瑪嘉等免疫學(xué)方法:TP等質(zhì)譜分析PCR檢測(cè)方法1.根據(jù)病原體的特征,初步判斷病原菌1.1、細(xì)菌的生長(zhǎng)現(xiàn)象:液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基分離培養(yǎng)基鑒定程序大小、形狀、突起、邊緣、顏色、表面、透明度、粘度等溶血現(xiàn)象:α、β、γ、雙環(huán)(產(chǎn)氣夾膜桿菌)氣味:銅綠—生姜味變形桿菌—巧克力燒焦氣味白假絲酵母菌—酵母味放線菌---泥土味1.2、細(xì)菌的分布特征:①、干燥環(huán)境中大部分是G+C

潮濕環(huán)境中大部分是G-b

②、人體正常菌群的分布:

人體的體表皮膚和與外界相通的口腔、上呼吸道、腸道、泌尿生殖道等粘膜及其腔道寄居著不同種類和數(shù)量的微生物。

寄生物在正常情況下與宿主相安無事,互相適應(yīng),而且各種微生物之間也相互制約而保持一個(gè)彼此共存的狀態(tài)。噴嚏中的細(xì)菌人體正常菌群的數(shù)量部位數(shù)量(每克樣品)厭氧菌:好氧菌唾液108-109

3-10:1牙齒表面109-1010

1:1齒齦縫隙1011-1012

102-103:1胃102-105

1:1小腸近端102-104

1:1回腸遠(yuǎn)端104-107

1:1大腸109-1012

102-103:1陰道108-109

5-10:1子宮頸內(nèi)膜108-109

5-10:1皮膚、耳、眼部表皮葡萄球菌金黃色葡萄球菌較多見臉部與手部皮膚。大腸埃希菌較多見鼻翼、腋窩及腹股溝等處皮膚較潮濕。丙酸桿菌較多見皮脂多的部位常見。恥垢分枝桿菌在外陰部與肛門周圍皮膚可找到中耳和內(nèi)耳一般無菌。皮膚受損時(shí),這些正常菌群可趁機(jī)侵入引起化膿性感染。主要有金黃色葡萄球菌引起的癤、濃皰瘡、汗腺炎等;表皮葡萄球菌可以在痤瘡內(nèi)找到,同時(shí)還可以發(fā)現(xiàn)痤瘡丙酸桿菌。外耳道的正常菌群以肺炎鏈球菌和銅綠假單胞菌較多

眼結(jié)膜上菌群甚少,因淚液中有溶菌酶存在。有時(shí)可有葡萄球菌、甲型鏈球菌、流感嗜血桿菌等??谇慌c消化道

口腔中有弱堿性唾液、食物殘?jiān)?,為正常菌群的繁衍提供了合適條件。牙齒上的細(xì)菌

最常見的菌群是甲型鏈球菌和厭氧鏈球菌,其次是表皮葡萄球菌、奈瑟氏菌、乳桿菌、螺旋體、假絲酵母等。表皮葡萄球菌

當(dāng)拔牙時(shí),甲型鏈球菌可通過傷口進(jìn)入血流。一般情況下,少量菌很快被肝、脾、淋巴結(jié)和骨髓中的吞噬細(xì)胞清除。但若心臟瓣摸有病損,或者是安裝了人工瓣膜的人,細(xì)菌就會(huì)被阻留在那里并繁殖起來,導(dǎo)致內(nèi)心膜炎。

新生兒出生后數(shù)天內(nèi)的口腔菌群,與母親陰道內(nèi)的菌群相同,隨后逐漸接近成人的口腔菌群。

消化道中的正常菌群的種類和數(shù)量,在不同部位是不同的。胃酸的酸度很高(pH2-3),因而胃內(nèi)基本無活菌??漳c和回腸上部的菌群很少。結(jié)腸和直腸則有大量細(xì)菌,主要是類桿菌(Bacteroides)、雙歧桿菌(Bifidobacterium)、大腸埃希氏菌、乳桿菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌(Proteus)、梭菌(Clostridium)等。鼻腔與呼吸道

鼻腔粘膜常有表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌存在,有時(shí)有甲型鏈球菌、棒狀桿菌(Corynebacterium)、布蘭漢菌

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