第4章 抗體制藥 第4、5、6節(jié)

第四節(jié)基因工程抗體和

抗體工程抗體研究進(jìn)展3個(gè)階段：①1890年白喉抗毒素，多克隆抗體；②1975年雜交瘤技術(shù)單克隆抗體；③1994年基因工程抗體；一、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的

基本方法⒈獲取目的基因⒉抗體庫(kù)技術(shù)的載體⒊淘篩⒋表達(dá)與鑒定二、噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的

特點(diǎn)⒈模擬天然全套抗體庫(kù)⒉避開了人工免疫和雜交瘤技術(shù)⒊可獲得高親和力的人源化抗體三、基因工程抗體表達(dá)⒈原核細(xì)胞表達(dá)⒉真核細(xì)胞表達(dá)⒊轉(zhuǎn)基因植物表達(dá)⒋轉(zhuǎn)基因動(dòng)物表達(dá)第五節(jié)抗體診斷試劑一、血清學(xué)鑒定用的抗體類試劑⒈鑒定病原菌的抗體試劑⑴常用診斷血清的品種和用途①沙門氏菌屬診斷血清②志賀氏菌屬診斷血清③病原性大腸埃希氏菌診斷血清⑵診斷血清的制備步驟①制備細(xì)菌抗原②免疫動(dòng)物和制備抗體血清⑶診斷血清診斷方法⒉乙型肝炎病毒表面抗原的反向被動(dòng)血凝診斷試劑⒊妊娠診斷試劑⒋抗ABO血型系統(tǒng)血清二、免疫標(biāo)記技術(shù)用的抗體

類試劑⒈熒光抗體診斷試劑⑴熒光抗體的制備⑵免疫熒光測(cè)定方法⒉免疫酶抗體診斷試劑⑴免疫酶染色法用抗體診斷試劑⑵酶免疫測(cè)定用抗體診斷試劑①HBsAg酶標(biāo)診斷試劑②HBeAg酶標(biāo)診斷試劑③HAVAg（甲型肝炎病毒抗原）酶標(biāo)診斷試劑④測(cè)定HIV（人免疫缺陷病毒）抗原的酶標(biāo)抗體診斷試劑⑤甲胎蛋白（AFP）酶標(biāo)抗體診斷試劑⑥癌胚抗原（CEA）的酶標(biāo)抗體診斷試劑⒊放射免疫用抗體診斷試劑放射免疫技術(shù)是將放射性核素分析的高度靈敏性與抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái)建立的檢測(cè)技術(shù)。放射性核素標(biāo)記抗體的方法：①氯胺-T法②Iodogen氏法抗原的測(cè)定有：①夾心法②間接法③竟?fàn)幏ǔＳ脴?biāo)記抗體試劑有①HBsAg放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑②HBeAg放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑③HAV抗原放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑④AFP放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑⑤CEA放射性核素標(biāo)記抗體診斷試劑三、導(dǎo)向診斷藥物放射性核素標(biāo)記抗體腫瘤放射免疫顯像放射免疫顯像優(yōu)點(diǎn)：①在體內(nèi)確切腫瘤定位作用，準(zhǔn)確性達(dá)90%，靈敏度達(dá)100%。②在體內(nèi)可檢出0.5cm大小的病灶，并可檢出肺腦的轉(zhuǎn)移灶。③小分子抗體易到達(dá)腫瘤部位，可顯著提高N/NT值。④抗體在腫瘤部位可保留6～9日⑤能觀擦抗體在血中的半衰期和可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)。放射免疫顯像定位技術(shù)將抗腫瘤單克隆抗體（Ab）與二乙基三胺五乙酸（DTPA）在體外偶聯(lián)成Ab-DTPA，再注入體內(nèi)后，就能與體內(nèi)組織相結(jié)合。由于抗體分子量大，需3天完成。3天后注入放射性核素In-113M（半衰期100m），因DTPA是重金屬離子絡(luò)合劑，所以In-113M可以結(jié)合到DTPA分子上，使腫瘤組織顯像。這一過(guò)程在2小時(shí)內(nèi)可完成。建立預(yù)定位技術(shù)需解決3個(gè)問(wèn)題：①抗體在腫瘤組織滯留要7天以上。②Ab-DTPA偶聯(lián)物比較穩(wěn)定；③內(nèi)源性金屬離子對(duì)DTPA的封閉作用要小。第六節(jié)抗體治療藥物以抗體為載體的導(dǎo)向