臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)六 腸道桿菌的檢驗(yàn)（一）_第1頁
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實(shí)驗(yàn)六腸道桿菌的檢驗(yàn)（一）目的要求：1熟悉腸道桿菌的分離鑒定程序及臨床意義；2掌握腸道桿菌的生化反應(yīng)特點(diǎn)和數(shù)值鑒定方法；3掌握鑒定腸道桿菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)的操作方法和結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（第一次實(shí)驗(yàn)）：1.錄像：腸道桿菌。2.制備Mac瓊脂平板，SS瓊脂平板：

(每人1個(gè)平板，Mac板或者SS板）3.大腸埃希菌、變形桿菌接種Mac瓊脂平板；乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀菌接種SS瓊脂平板（每人接種一種菌，每組接種4種菌）腸道細(xì)菌（主要為桿菌）的分離鑒定程序介紹

糞便標(biāo)本

直接分離

SS瓊脂平板或EMB平板副溶血性弧菌選擇培養(yǎng)基挑選無色小菌落

雙糖鐵培養(yǎng)基進(jìn)一步生化反應(yīng)血清學(xué)試驗(yàn)菌落形態(tài)生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告腸道選擇培養(yǎng)基的制備Mac瓊脂平板/麥康凱瓊脂平板(MacConkeyAgar，MAC）

營(yíng)養(yǎng)成分(蛋白胨/Nacl)；成分：抑雜菌劑（膽鹽)

；

乳糖（初步區(qū)分致病菌非致病菌）；酸堿指示劑（中性紅，酸為紅色堿為無色）

制作：溶解培養(yǎng)基——消毒滅菌——制備平皿腸道選擇培養(yǎng)基的制備SS瓊脂平板(SalmonellaShigellaagar）

營(yíng)養(yǎng)成分(蛋白胨/Nacl)；成分：抑雜菌劑（膽鹽/煌綠/結(jié)晶紫)

；

乳糖（初步區(qū)分致病菌非致病菌）；枸櫞酸鐵胺和硫代硫酸鈉（檢測(cè)H2S）酸堿指示劑（如中性紅，酸為紅色堿為無色）

制作：溶解培養(yǎng)基——消毒滅菌——制備平皿Mac固體培養(yǎng)基SS固體培養(yǎng)基（已制備高壓消毒）（已制備高壓消毒）加熱熔化加熱熔化傾注平板20個(gè)傾注平板20個(gè)

保證每人一個(gè)Mac或SS平版（每實(shí)驗(yàn)桌保證兩種平板）細(xì)菌接種（下次看結(jié)果）：1.菌種：大腸埃希菌、變形桿菌——Mac；乙型副傷寒沙門菌、福氏志賀菌——SS

（注意：每4人一組；每組應(yīng)該接種四種細(xì)菌；每個(gè)平皿標(biāo)記好培養(yǎng)基/接種菌/操作者）2.方法：連續(xù)或分區(qū)劃線接種3.注意點(diǎn)：做好標(biāo)記！

嚴(yán)格無菌操作；

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