梅毒檢測技術(shù)規(guī)范

全國梅毒檢測技術(shù)規(guī)范（試行討論稿）中國疾病防止控制中心二○一○年八月

前言為了加強(qiáng)全國梅毒檢測工作的管理，提高檢測質(zhì)量，根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》、《中國防止與控制梅毒規(guī)劃（-）》的精神，在衛(wèi)生部及中國疾病防止控制中心的領(lǐng)導(dǎo)下，性病控制中心組織國內(nèi)有關(guān)領(lǐng)域的專家制訂了《全國梅毒檢測技術(shù)規(guī)范》（下稱"規(guī)范"）。本“規(guī)范”是基于我國現(xiàn)在梅毒檢測工作的需要以及梅毒檢測技術(shù)的發(fā)展，對梅毒檢測有關(guān)的樣品采集、檢測辦法、檢測方略、質(zhì)量管理等做出具體的規(guī)范規(guī)定，經(jīng)上報(bào)衛(wèi)生部并獲準(zhǔn)由中國疾病防止控制中心下發(fā)，合用于全國各級醫(yī)療、疾病防止控制、婦幼保健、采供血、出入境檢查檢疫等提供梅毒檢測服務(wù)的機(jī)構(gòu)。本“規(guī)范”起草單位：中國疾病防止控制中心性病控制中心本“規(guī)范”參加編寫單位：中國疾病防止控制中心艾滋病性病防止控制中心、中國疾病防止控制中心婦幼保健中心、廣東省皮膚性病控制中心、江蘇省疾病防止控制中心、天津疾病防止控制中心、上海市皮膚性病醫(yī)院本“規(guī)范”參加編寫及審核人員：尹躍平、王千秋、王寶璽、邢文革、王臨紅、鄭和平、傅更峰傅更鋒、顧偉鳴、鄭鐘潔、龔匡隆、陳祥生。本《規(guī)范》編寫工作聯(lián)系人：魏萬慧本《規(guī)范》合用于全國全部的梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室。本《規(guī)范》解釋權(quán)屬于中國疾病防止控制中心。

目錄梅毒及其病原體樣品的采集和解決梅毒血清學(xué)檢測梅毒體病原學(xué)檢測梅毒核酸檢測實(shí)驗(yàn)室生物安全梅毒血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理第一章梅毒及其病原體梅毒是由梅毒蒼白螺旋體（Treponemapallidum）引發(fā)的一種性傳輸疾病，可引發(fā)神經(jīng)、心血管等多系統(tǒng)損害，嚴(yán)重影響人群的身體健康。另外，梅毒亦可通過胎盤傳給胎兒，造成自發(fā)性流產(chǎn)、死產(chǎn)或先天梅毒等。20世紀(jì)80年代，梅毒在我國重新出現(xiàn)，90年代末以來，全國梅毒報(bào)告病例數(shù)明顯增加，呈快速流行的趨勢，已成為我國重要的公共衛(wèi)生問題。梅毒可分類為早期梅毒（一期、二期和早期隱性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隱性梅毒），許多梅毒患者的臨床體現(xiàn)并不明顯或者缺少臨床癥狀，病例的發(fā)現(xiàn)往往依賴于實(shí)驗(yàn)室的檢測。梅毒的早期發(fā)現(xiàn)和及時治療對有效防止和控制梅毒的流行含有重要的意義，梅毒的檢測是病例發(fā)現(xiàn)、臨床診療和療效觀察的重要手段。梅毒的檢測辦法不僅始終沿用許多傳統(tǒng)的辦法，并且，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，其新的檢測技術(shù)與辦法不停出現(xiàn)并廣泛應(yīng)用。因此，規(guī)范多種檢測辦法、制訂不同檢測方略、加強(qiáng)質(zhì)量控制和開展試劑評定等對確保梅毒臨床服務(wù)和現(xiàn)場防治的質(zhì)量含有重要的意義。

第二章樣品的采集和解決1范疇本章規(guī)定了用于梅毒檢測的各類樣品（涉及血清、血漿、全血、皮損部位組織液、淋巴穿刺液和腦脊液）的采集和解決辦法，合用于梅毒血清學(xué)、病原學(xué)檢測和核酸檢測。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《梅毒診療原則》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則WS273-，《性傳輸疾病實(shí)驗(yàn)室診療指南》中國疾病防止控制中心性病控制中心，《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理方法》衛(wèi)生部，衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔〕73號，《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理方法》國家環(huán)?？偩?《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》中國疾病防止控制中心，3樣品種類及對應(yīng)的用途3.1血清、血漿、全血及腦脊液可用于梅毒血清學(xué)檢測或核酸檢測。3.2皮損部位組織液、淋巴穿刺液可用于梅毒病原體檢測或核酸檢測。4操作環(huán)節(jié)4.1采樣前準(zhǔn)備4.1.1根據(jù)檢測項(xiàng)目的具體規(guī)定，擬定采集樣品的種類、解決、保存及運(yùn)輸?shù)臅r限和辦法，按照臨床采樣技術(shù)規(guī)范的規(guī)定操作，恪守生物安全規(guī)定。4.1.2準(zhǔn)備消毒用品、采樣用品，涉及采血管及試管架、鈍刀（刮勺）、載玻片、硬質(zhì)廢棄物容器等。4.1.3選擇適宜的采樣空間，受檢者坐（臥）于適宜的位置。4.1.4根據(jù)樣品編碼的原則和辦法，制訂唯一性編碼（編號），4.1.5使用樣品統(tǒng)計(jì)本或記錄表統(tǒng)計(jì)樣品4.2采集和解決樣品4.2.1血液4.2.1.1 血清：根據(jù)需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取靜脈血，室溫下自然放置1～2h，待血液凝固、血塊收縮后再用1500～3000r/min離心15min，吸出上層血清，置于適宜的容器中，備用。4.2.1.2 血漿：根據(jù)需要，用抗凝真空采血管抽取靜脈血，1500～3000r/min離心15min，吸出上層血漿，置于適宜的容器中，備用。4.2.1.3 末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上小朋友可選擇耳垂、中指、無名指或食指。1歲下列小朋友采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，收集滴出的血液，備用。4.2.2皮損部位組織液4.2.2.1用于病原學(xué)檢查：用無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液與預(yù)先滴加在載玻片上的生理鹽水混合后加蓋玻片。4.2.2.1用于核酸檢測：用無菌生理鹽水浸濕的棉拭子檫去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表面，取滲出液洗入細(xì)胞裂解緩沖液(1mL/管）的標(biāo)本管中。4.2.3淋巴穿刺4.2.4 腦脊液：采用腰椎穿刺術(shù)獲得，應(yīng)由有關(guān)專業(yè)人員操作。4.3樣品的保存4.3.1如標(biāo)本需要保存，采樣前應(yīng)對樣品管或玻片進(jìn)行核對并編碼。要將標(biāo)簽貼在試管的側(cè)面或玻片的一側(cè)，最佳使用預(yù)先印制好的、專門用于冷凍儲存的耐低溫標(biāo)簽。4.3.2血清或血漿樣品，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的可寄存于2～8℃，一周以上應(yīng)寄存于低于-20℃的條件下。4.3.3病原學(xué)檢查用組織液、淋病淋巴穿刺液標(biāo)本需要首先將標(biāo)本涂于干凈載玻片，然后使用固定液進(jìn)行固定、自然干燥干燥后可置于2～8℃4.3.4核酸檢測用組織液、淋病淋巴穿刺液等標(biāo)本均應(yīng)置細(xì)胞裂解緩沖液后，放于—70℃4.4樣品的運(yùn)輸4.4.1應(yīng)符合生物安全規(guī)定；獲得對應(yīng)部門同意并由含有資質(zhì)的人員專程護(hù)送。4.4.2應(yīng)采用三層容器對樣品進(jìn)行包裝，隨樣品應(yīng)附有與樣品唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣品種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。4.4.2.1第一層容器：直接裝樣品，應(yīng)防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周邊應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。4.4.2.2第二層容器：容納并保護(hù)第一層容器，能夠裝若干個第一層容器。規(guī)定不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒解決。4.4.2.3第三層容器：容納并保護(hù)第二層容器的運(yùn)輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標(biāo)簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時要注明“小心輕放、避免日曬、小心水浸、避免重壓”等字樣，還應(yīng)易于消毒。4.4.2.4運(yùn)輸樣品必須有統(tǒng)計(jì)。4.4.2.5特殊狀況下經(jīng)有關(guān)部門同意能夠用特快專遞郵寄樣品，但必須按三層包裝，將樣品管包扎好，嚴(yán)禁使用玻璃容器。4.5樣品的接受4.5.1樣品包裹必須在含有解決感染性材料能力的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)、由通過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣、戴口罩、防護(hù)眼鏡的工作人員在生物安全柜中打開，用后的包裹應(yīng)及時進(jìn)行消毒。4.5.2核對樣品與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立刻將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和上一級實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員。4.5.3檢查樣品的狀況，統(tǒng)計(jì)有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等狀況。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，應(yīng)將樣品安全廢棄。并將樣品狀況立刻告知送樣人。4.5.4接受樣品時應(yīng)填寫樣品接受單。

第三章梅毒血清學(xué)檢測1范疇本章規(guī)定了梅毒血清學(xué)的檢測辦法、程序、成果報(bào)告、檢測方略及質(zhì)量控制。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《梅毒診療原則》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則WS273-，《性傳輸疾病實(shí)驗(yàn)室診療指南》中國疾病防止控制中心性病控制中心，《SexuallyTransmittedDiseasesTreatmentGuidelines》美國疾病防止控制中心，《Theuseofrapidsyphilistests》WHO/TDR,3實(shí)驗(yàn)室基本規(guī)定實(shí)驗(yàn)室建筑與設(shè)施應(yīng)符合《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》（中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則，WS233-）中Ⅱ二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)定時接受專業(yè)培訓(xùn)，配備對應(yīng)的設(shè)備（如水平旋轉(zhuǎn)儀等），以滿足梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測工作的需要。4檢測目的與要點(diǎn)4.1檢測的目的4.1.1梅毒血清學(xué)檢測可用于臨床診療、血液篩查、流行病學(xué)監(jiān)測等。4.1.2以臨床診療為目的的檢測是為了擬定梅毒感染的狀況。4.1.3以血液篩查為目的的檢測是為了避免梅毒的經(jīng)血傳輸。4.1.4以流行病學(xué)監(jiān)測為目的的檢測是為了調(diào)查梅毒血清學(xué)感染率和發(fā)病率4.2檢測要點(diǎn)4.2.2根據(jù)目的選擇檢測辦法及檢測方略。4.2.4可采用任何一類梅毒血清學(xué)檢測辦法作為篩查實(shí)驗(yàn)5．檢測辦法分類梅毒血清學(xué)檢測涉及非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（非特異性梅毒抗體檢測實(shí)驗(yàn)）和梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（特異性梅毒抗體檢測實(shí)驗(yàn)）兩類辦法。5.1非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)，涉及快速血漿反映素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)(RPR)、甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)（TRUST）、性病研究實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)(VDRL)等。5.2梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)，涉及梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)(TPPA)、梅毒螺旋體血球凝集實(shí)驗(yàn)(TPHA)、梅毒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（TP-ELISA）、化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)、梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(TP-RT)、FTA-ABS、梅毒IgM抗體檢測（TP-IgM）和梅毒螺旋體蛋白印跡實(shí)驗(yàn)（TP-WB）等。6．不同血清學(xué)檢測辦法及其所需的檢測樣品檢測方法樣品種類血清血漿末梢全血腦脊液非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)快速血漿反映素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)(RPR)甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)（TRUST）性病研究實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)(VDRL)梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)(TPPA)梅毒螺旋體血球凝集實(shí)驗(yàn)(TPHA)梅毒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（TP-ELISA）梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(TP-RT)熒光梅毒螺旋體抗體吸取實(shí)驗(yàn)（FTA-ABS）化學(xué)發(fā)光免疫測定實(shí)驗(yàn)（CLIA）梅毒IgM抗體檢測（TP-IgM）梅毒螺旋體蛋白印跡實(shí)驗(yàn)（TP-WB）7．檢測試劑全部應(yīng)用于臨床的檢測試劑均必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊同意、在使用期內(nèi)的試劑，其中RPR、TRUST、TP-ELISA應(yīng)有批批檢合格證。推薦使用臨床質(zhì)量評定敏感性和特異性高的試劑。8．檢測辦法8.1非特異性梅毒抗體檢測非特異性梅毒抗體檢測是以一定比例的心磷脂、卵磷脂及膽固醇混合物作為抗原，根據(jù)檢測目定性或定量檢測梅毒患者血中的抗類脂抗原的抗體。8.1.1快速血漿反映素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)（RPR）-定性實(shí)驗(yàn)采用血清或血漿標(biāo)本，置實(shí)驗(yàn)卡片的圓圈中，并均勻涂滿整個圈內(nèi)，在每個標(biāo)本中精確地加1滴（17L）抗原，將卡片置于水平旋轉(zhuǎn)儀上旋轉(zhuǎn)8min，100±2r/min，立刻在亮光下用肉眼觀察成果。8.1.2快速血漿反映素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)（RPR）-定量實(shí)驗(yàn)定量實(shí)驗(yàn)是將原血清或血漿標(biāo)本先在卡片的圓圈中中進(jìn)行對倍倍比稀釋后，再按照定性實(shí)驗(yàn)的辦法對每一種稀釋度的標(biāo)本進(jìn)行檢測和觀察成果。8.1.3甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)（TRUST）-定性和定量實(shí)驗(yàn) 具體辦法同RPR定性實(shí)驗(yàn)和RPR定量實(shí)驗(yàn)。8.1.4性病研究實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)（VDRL）-定性實(shí)驗(yàn)采用0.05mL血清或腦脊液標(biāo)本置入反映板圈中，將血清涂布到整個圈內(nèi)，用原則針頭加入1滴（17L）抗原，并將反映板置水平旋轉(zhuǎn)儀上旋轉(zhuǎn)4min，180±5r/min，立刻置低倍顯微鏡下觀察。8.1.4性病研究實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)（VDRL）-定量實(shí)驗(yàn)定量實(shí)驗(yàn)是將原血清或腦脊液標(biāo)本先在反映圈中進(jìn)行對倍稀釋后，再按照定性實(shí)驗(yàn)的辦法對每一種稀釋度的標(biāo)本進(jìn)行檢測和觀察成果。8.2特異性梅毒抗體檢測8.2.1梅毒螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)（TPPA實(shí)驗(yàn)是用超聲裂解梅毒螺旋體抗原，致敏明膠粒子，其致敏粒子與待檢血清或血漿中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可見的凝集，有效實(shí)驗(yàn)的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定。8.2.2梅毒螺旋體血球凝集實(shí)驗(yàn)（TPHA）TPHA實(shí)驗(yàn)用超聲裂解的梅毒螺旋體菌體為抗原致敏經(jīng)醛化、鞣化的羊或禽類紅細(xì)胞，與待檢血清或血漿中抗梅毒螺旋體抗體反映，產(chǎn)生肉眼可見的抗原抗體凝集，有效實(shí)驗(yàn)的陰性和陽性對照必須符合試劑盒規(guī)定。8.2.3梅毒酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（TP-ELISA）ELISA實(shí)驗(yàn)是用包被在固相板條上重組的梅毒螺旋體抗原，與待檢血清或血漿標(biāo)本中的梅毒特異性抗體結(jié)合，再與酶標(biāo)記的抗人免疫球蛋白單克隆抗體反映，形成抗原抗體復(fù)合物而使底物顯色，用酶標(biāo)儀測定成果。在實(shí)驗(yàn)中需要設(shè)立陽性和陰性對照，陽性和陰性對照成果必須符合試劑盒規(guī)定。8.2.4梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測（TP-RT）TP-RT為免疫層析實(shí)驗(yàn)，簡便快速，普通可在10～30分鐘內(nèi)得出成果。以硝酸纖維膜為載體，重組的梅毒螺旋體抗原抗原線狀固定在膜上，待檢樣品（全血、血清或血漿）沿著固相載體遷移，陽性成果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。質(zhì)控帶顯色為有效實(shí)驗(yàn)。8.2.5熒光梅毒螺旋體抗體吸取實(shí)驗(yàn)（FTA-ABS）將待檢血清用吸取劑1:5稀釋，陽性及陰性對照血清分別用PBS緩沖液和吸取劑1:5稀釋，置37℃濕盒內(nèi)，30min；每次實(shí)驗(yàn)必須設(shè)PBS緩沖液、吸取劑、PBS液1:5稀釋的陽性和陰性對照血清、吸取劑1:5稀釋的陽性和陰性對照血清共6個對照涂片，每個涂片分別加入10L稀釋后的血清或緩沖液，置37℃濕盒內(nèi)，30分鐘；用PBS-Tween-80液洗玻片2次，每次5min，最后用蒸餾水洗一次，冷風(fēng)干燥；每個涂片加10L按規(guī)定稀釋的熒光抗體，置37℃濕盒內(nèi)30min8.2.6化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)（CLA）是用包被在固相板條上重組的梅毒螺旋體抗原，與待檢血清或血漿標(biāo)本中的梅毒特異性抗體結(jié)合采用發(fā)光底物，用發(fā)光儀測定成果。在實(shí)驗(yàn)中需要設(shè)立陽性和陰性對照，陽性和陰性對照成果必須符合試劑盒規(guī)定。8.2.7梅毒螺旋體蛋白印跡實(shí)驗(yàn)（TP-WB） 在每個反映槽中加2.0mL工作緩沖液，浸濕膜條5分鐘，加入0.02mL待檢樣本，置水平搖床上(50r/min)，18～25℃反映45min；棄去反映槽中液體，加入2.0mL工作緩沖液，置水平搖床洗滌三次，每次5min；加入酶標(biāo)抗體，置水平搖床反映30min；棄去反映槽中液體，加入2.0mL工作緩沖液，置水平搖床洗滌三次，每次5min；每槽加2.0mL底物，置水平搖床上反映8～10min；待陽性對照帶顯色清晰，加入1.0mL終止劑2min8.2.8梅毒IgM抗體的檢測（TP-IgM）測定IgM抗體辦法的基本原理是采用分離柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分離過程中的沉降速度不同，將IgM和IgG分別收集，再進(jìn)行FTA-ABS等實(shí)驗(yàn)。亦可采用抗IgM單克隆抗體的酶標(biāo)法、蛋白質(zhì)印跡法等進(jìn)行檢測。9檢測方略與流程9.1 以臨床診療為目的的檢測方略9.1.1檢測方略：可采用兩種方略：9.1.1.1方略一：采用非梅毒螺旋體定性實(shí)驗(yàn)對樣品進(jìn)行初篩，對呈陰性反映的樣品，可出具非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（-）報(bào)告；對呈陽性反映的樣品，用梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)復(fù)檢，對呈陰性反映的樣品，可出梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（-）報(bào)告；呈陽性反映的樣品再進(jìn)一步做非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)，出具梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)和非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)均為陽性的報(bào)告，同時報(bào)告非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)滴度。出具報(bào)告時均需標(biāo)明采用的具體辦法。9.1.1.2方略二：采用梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)初篩檢測，對呈陰性反映的樣品，可出具梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（-）報(bào)告；對呈陽性反映的樣品，需要進(jìn)一步做非梅毒螺旋體定性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢，對呈陰性反映的樣品，可出具非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（-）報(bào)告；呈陽性反映的樣品再進(jìn)一步做非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)，出具梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)和非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)均為陽性的報(bào)告，同時報(bào)告非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)滴度。出具報(bào)告時均需標(biāo)明采用的具體辦法。9.1.2 檢測流程非非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)報(bào)告檢測辦法及定量成果圖1：以臨床診療為目的的檢測方略一梅毒梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)報(bào)告檢測辦法及定量成果圖2：以臨床診療為目的的檢測方略二

9.2以血液篩查為目的的檢測方略9.2.1 檢測方略：采用高敏感的梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA辦法）對樣品進(jìn)行篩檢，出具梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性（+）或陰性（）成果，普通狀況下，對陽性者不需要再采用非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢。9.2.2 檢測流程梅毒梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果圖3：以血液篩查為目的的檢測方略9.3以流行病學(xué)監(jiān)測為目的的檢測方略9.3.1 檢測方略：根據(jù)流行病學(xué)監(jiān)測的目的選擇不同的檢測方略，涉及評定梅毒血清學(xué)累計(jì)感染率（梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性率）、現(xiàn)患感染率（梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)和非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)雙陽性率）和梅毒高滴度（梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性及非梅毒螺旋體定量實(shí)驗(yàn)滴度>1:8）感染率。9.3.1.1用于預(yù)計(jì)累計(jì)感染率的方略：采用梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA）辦法對樣品進(jìn)行檢測，報(bào)告梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性（+）或陰性（）成果，陽性成果（+）者作為計(jì)算梅毒血清累計(jì)感染率的分子。9.3.1.2用于預(yù)計(jì)現(xiàn)癥感染率的方略：采用梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA）辦法對樣品進(jìn)行初篩，對呈陰性反映的樣品，報(bào)告梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（）成果；對呈陽性反映的樣品再用非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如RPR或TRUST）辦法進(jìn)行定性檢測，報(bào)告非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性（+）或陰性（）成果。梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)和非梅毒螺旋體定性實(shí)驗(yàn)成果均為陽性者作為計(jì)算梅毒血清現(xiàn)患感染率的分子。9.3.1.3用于預(yù)計(jì)高滴度感染率的方略：采用梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA）辦法對樣品進(jìn)行初篩檢測，對呈陰性反映的樣品，報(bào)告梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（）成果；對呈陽性反映的樣品再用一種非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如RPR或TRUST）辦法進(jìn)行定性檢測。對非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)呈陰性反映的樣品，報(bào)告非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陰性（）成果；對呈陽性反映的樣本再做定量（滴度）檢測，報(bào)告非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)滴度。梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)陽性和非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)定量檢測成果為不不大于1:8滴度者作為計(jì)算高滴度感染率的分子。9.3.2 檢測流程梅毒梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（如TP-ELISA）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果圖4：以預(yù)計(jì)梅毒累計(jì)感染率為目的的檢測方略梅毒梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果圖5：以預(yù)計(jì)梅毒現(xiàn)癥感染率為目的的檢測方略

梅毒梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)（具體辦法）陰性報(bào)告檢測辦法及陰性成果陽性報(bào)告檢測辦法及陽性成果非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)定量檢測報(bào)告檢測辦法及高滴度(>1:8)成果圖6：以預(yù)計(jì)梅毒高滴度感染率為目的的檢測方略10．質(zhì)量控制10.1血清學(xué)檢測的非統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)的RPR和TRUST、以及梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)的TPPA、TPHA、TP-RT、TP-WB等均采用肉眼直接閱讀成果，其實(shí)內(nèi)質(zhì)量控制采用非統(tǒng)計(jì)學(xué)辦法進(jìn)行。10.1試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實(shí)驗(yàn)的有效性，但不能作為室內(nèi)質(zhì)控品使用。每個檢測日，在檢測樣品前應(yīng)先檢測試劑盒內(nèi)部對照，并且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照成果無效，則表明此試劑盒失效。10.10.1.2.1外部對照質(zhì)控品，可采用商用質(zhì)控品或自制質(zhì)控品。質(zhì)控品應(yīng)包含陽性和陰性樣品。非梅毒10.1.2.2下列狀況需做質(zhì)量控制：更換試劑批號、更換檢測人員、10.1.2.3出現(xiàn)下列問題，提示存在質(zhì)量隱患，應(yīng)引發(fā)重視：運(yùn)輸包裝、內(nèi)盒或試劑盒的物理損傷；在包裝內(nèi)存在混雜物質(zhì)；標(biāo)簽出現(xiàn)錯誤、缺失或筆跡含糊（特別是產(chǎn)品名稱或出產(chǎn)廠家名稱，批號和貨號，失效期或/和生產(chǎn)日期）；泄漏或污染；置于過10.110.2血清學(xué)檢測的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)的ELISA、CLA法等是通過臨界值（Cut-off），判讀成果，應(yīng)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制10.2.1試劑盒內(nèi)部對照：10.2.2室內(nèi)質(zhì)控品：10.2.2.1室內(nèi)質(zhì)控品的使用和質(zhì)量規(guī)定：每一次實(shí)驗(yàn)必須使用室內(nèi)質(zhì)控品，方便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。同時能夠理解各批試劑盒的批間或孔間差別。室內(nèi)質(zhì)控品的管間或瓶間變異必須不大于監(jiān)測系統(tǒng)預(yù)期的變異（cv＜20%)10.2.2最慣用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖，10.2.2.外部質(zhì)控品的均值和原則差應(yīng)建立在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用辦法對外部質(zhì)控品重復(fù)測定的基礎(chǔ)上。普通采用在不同批次檢測獲得最少20個數(shù)據(jù)；如果僅做少量批次的檢測，也最少做5個批次的檢測，每個批次中不少于4個質(zhì)控血清測定成果，以建立一種臨時性的均值和原則差，當(dāng)達(dá)成20批次數(shù)據(jù)后，替代臨時性的均值和原則差。（1）算術(shù)平均值（）：代表一組質(zhì)控血清測定的S/CO值的均值。為了統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯性意義，應(yīng)當(dāng)采用最少20次（天）所測得的外部對照質(zhì)控血清S/CO值成果計(jì)算出平均值。（2）原則差（s）：是描述樣品與均數(shù)之間離散程度的一種指標(biāo)，是與質(zhì)控血清S/CO值均值有關(guān)的預(yù)期范疇。一組S/CO值的原則差以s表達(dá)。（3）變異系數(shù)（cv）：是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的一種指標(biāo)，能夠用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。（4）控制限：由實(shí)驗(yàn)室根據(jù)對外部質(zhì)控品檢測成果的均值和原則差來擬定。例如12S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減2個原則差；13S質(zhì)控規(guī)則的控制限為外部質(zhì)控品S/CO均值加減3個原則差。10.2.2.4質(zhì)控圖是把檢測數(shù)據(jù)與已擬定的（計(jì)算出的）“控制限”進(jìn)行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并準(zhǔn)時間次序點(diǎn)入本實(shí)驗(yàn)室每批次實(shí)驗(yàn)質(zhì)控血清的測定值。質(zhì)控圖繪制環(huán)節(jié)涉及：（1）在常規(guī)條件下，對同一批血清持續(xù)測定20次（天）或以上，獲得一組S/CO值，求均數(shù)（）和原則差（s）,超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。（2）將均值（）和原則差（s）分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來。以S/CO值作縱座標(biāo)（Y軸），每一批次實(shí)驗(yàn)作橫座標(biāo)（x軸），繪制質(zhì)控圖。（3）從第21次起，將每次質(zhì)控血清的檢測成果依次點(diǎn)入該質(zhì)控框架圖中，檢查進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)。8.1.3實(shí)驗(yàn)室在報(bào)告實(shí)驗(yàn)成果之前必須評價質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，可通過圖形統(tǒng)計(jì)的檢查或由計(jì)算機(jī)審核成果來決定?，F(xiàn)在有許多質(zhì)控規(guī)則，慣用的是12S和13S規(guī)則。（1）告警（12S）：當(dāng)外部質(zhì)控品的S/CO值超出+2s范疇時，系統(tǒng)處在告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，與否能夠繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。若將12S做失控原則，有較高的假失控概率，因此普通不采用。（2）失控（13S）：當(dāng)外部質(zhì)控品的S/CO值超出+3s范疇時，系統(tǒng)處在失控狀態(tài)，本次實(shí)驗(yàn)成果不能被接受，可能是系統(tǒng)誤差、隨機(jī)誤差或外部質(zhì)控品穩(wěn)定性下降所致。（3）漂移：持續(xù)幾次（3～5次）外部質(zhì)控品的S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱為漂移，提示實(shí)驗(yàn)條件發(fā)生了較大的變化。（4）趨勢：持續(xù)幾次（5～7次）外部質(zhì)控品的S/CO值幾乎按一種方向分布時稱為趨勢，普通由參數(shù)的緩慢變化引發(fā)。質(zhì)控規(guī)則的使用應(yīng)檢出隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差，即含有高的檢出分析誤差的能力，同時應(yīng)含有較低的假失控概率?？疾鞂?shí)驗(yàn)系統(tǒng)的可靠性應(yīng)采用多規(guī)則質(zhì)控方案，多規(guī)則質(zhì)控辦法能提高誤差檢出，并含有低的假失控概率。其要點(diǎn)為：出現(xiàn)一次2s范疇的變化時，系統(tǒng)處在告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，與否能夠繼續(xù)檢測需要進(jìn)一步觀察。出現(xiàn)下列狀況時，應(yīng)暫停檢測查找因素：（1）出現(xiàn)一次超出3s范疇的變化；（2）持續(xù)兩次出現(xiàn)同一方向超出2s范疇的變化；（3）持續(xù)四次出現(xiàn)同一方向的超出1s范疇的變化；（4）持續(xù)10次成果都在1s范疇內(nèi)，但落在均值線的同一側(cè)。10.2.2.5實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)控圖分析及失控狀況解決程序。當(dāng)質(zhì)控已有計(jì)劃并恰本地執(zhí)行時，規(guī)定可靠的均值和原則差用于計(jì)算質(zhì)控限，將假失控概率降到最低。當(dāng)出現(xiàn)失控時，對原有外部質(zhì)控品重復(fù)測定或更換新的外部質(zhì)控品進(jìn)行測定不是最有效的辦法，必須找出問題發(fā)生的因素，找出解除問題的辦法，并消除因素，避免將來出現(xiàn)同樣的問題。繪制和分析質(zhì)控圖的要點(diǎn):（1）分析數(shù)據(jù)時，超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。（2）由專人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖，每月定時召開質(zhì)控分析會，討論本月的質(zhì)量控制狀況。（3）建議長久和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑，更換不同廠家的試劑后，須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號試劑如外部質(zhì)控品測定出現(xiàn)較大變化也應(yīng)重新制作質(zhì)控圖。使用新批號或不同廠家的試劑,必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。（4）發(fā)現(xiàn)質(zhì)控成果失控，應(yīng)填寫報(bào)告單，上交質(zhì)量負(fù)責(zé)人，分析因素并決定與否發(fā)出檢測報(bào)告。（5）使用新批次的外部質(zhì)控品時，如測定值出現(xiàn)較大變化，須重新繪制質(zhì)控圖。變異系數(shù)（cv）不大于20％，表達(dá)外部質(zhì)控品處在穩(wěn)定狀態(tài)。10.“即刻法”質(zhì)控辦法是在對同一批外部質(zhì)控血清持續(xù)測定3次后，即可對第3次檢查成果進(jìn)行質(zhì)控。具體計(jì)算辦法以下：10.10.210.2.3.3計(jì)算SISI上限=X最大值-sSI下限=-X最小值s10.2.3.4將SI表1SI值表Nn3sn2sNn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56（1）當(dāng)SI上限和SI下限<n2s時表達(dá)處在控制范疇內(nèi)，能夠繼續(xù)測定。繼續(xù)重復(fù)以上各項(xiàng)計(jì)算。（2）當(dāng)SI上限和SI下限有一值處在n2s～n3s值之間時闡明該值在2s～3s范疇，處在“告警”狀態(tài)。（3）當(dāng)SI上限和SI下限有一值>n3s值時闡明該值已在3s范疇之外，屬“失控”。“即刻法”只能在前20次內(nèi)使用，超出即可采用L-J質(zhì)控圖辦法。10.3血清學(xué)檢測室間質(zhì)控開展梅毒血清學(xué)檢測的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加各級性病防治機(jī)構(gòu)或CDC組織的實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證，能力驗(yàn)證明驗(yàn)應(yīng)涉及梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)以及非梅毒螺旋體實(shí)驗(yàn)的定性和定量兩種檢測辦法。

第四章梅毒病原學(xué)檢測1范疇本章規(guī)定了病原學(xué)檢測的辦法和用途。合用于對人皮損部位組織液、淋巴穿刺液的梅毒螺旋體檢測。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《梅毒診療原則》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則WS273-，《性傳輸疾病實(shí)驗(yàn)室診療指南》中國疾病防止控制中心性病控制中心，《SexuallyTransmittedDiseasesTreatmentGuidelines》美國疾病防止控制中心，《Theuseofrapidsyphilistests》WHO/TDR,3實(shí)驗(yàn)室基本規(guī)定實(shí)驗(yàn)室建筑與設(shè)施應(yīng)符合《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》（中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則，WS233-）中Ⅱ二級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)定時接受專業(yè)培訓(xùn)，配備對應(yīng)的設(shè)備（如暗視野顯微鏡等），以滿足梅毒病原學(xué)檢測的需要。實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量確保和實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)按本規(guī)范有關(guān)章節(jié)規(guī)定執(zhí)行。4檢測目的對早期梅毒的硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液涂片、淋巴穿刺液涂片等，可在顯微鏡下觀察梅毒螺旋體的特殊形態(tài)和運(yùn)動方式，判斷與否存在梅毒螺旋體，用于梅毒感染的診療。5檢測辦法5.1暗視野顯微鏡檢查5.1.1皮損部位組織液：無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液與預(yù)先滴加在載玻片上的生理鹽水混合后加蓋玻片鏡檢，在暗視野顯微鏡下觀察，尋找含有特性形態(tài)和運(yùn)動方式的梅毒螺旋體。5.1.2淋巴穿刺液：無菌操作下穿刺淋巴結(jié)，注入生理鹽水并重復(fù)抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于載玻片上，加蓋玻片鏡檢，在暗視野顯微鏡下觀察，尋找含有特性形態(tài)和運(yùn)動方式的梅毒螺旋體。5.2鍍銀染色檢查基于梅毒螺旋體含有親銀性，可被銀溶液染色，從而能夠在鏡下觀察到銀染的梅毒螺旋體。將標(biāo)本涂于干凈載玻片作一薄片，于空氣中自然干燥。用固定液將涂片固定2～3min。用無水酒精洗滌玻片上的油污。加媒染劑于涂片上，微加熱產(chǎn)生蒸汽，染30sec。水洗，加銀染液于涂片上，微加熱產(chǎn)生蒸汽，染30sec。水洗、待干，用油鏡檢查。5.3成果報(bào)告5.35.3.1.1暗視野顯微鏡檢查：梅毒螺旋體為纖細(xì)、白色、有折光的螺旋狀微生物，長5～20m，直徑不大于0.25.3.1.2鍍銀染色檢查:顯微鏡下觀察到染成棕褐色的梅毒螺旋體則報(bào)告5.3.2陰性未見到梅毒螺旋體，報(bào)告陰性成果。6質(zhì)量控制檢查人員應(yīng)接受過梅毒螺旋體病原學(xué)檢測的技術(shù)培訓(xùn)，方便對的地使用顯微鏡和識別梅毒螺旋體。

第五章梅毒核酸檢測1范疇本章規(guī)定了梅毒螺旋體核酸定性檢測的意義、實(shí)驗(yàn)室規(guī)定、檢測辦法、質(zhì)量控制及成果鑒定等，合用于梅毒螺旋體核酸的測定。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《生殖道感染檢測的實(shí)驗(yàn)室辦法》WHO，1999年《臨床基因擴(kuò)增診療實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》衛(wèi)生部,《臨床基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗(yàn)室管理暫行方法》衛(wèi)醫(yī)發(fā)[]10號，《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》中國疾病防止控制中心，核酸檢測的意義對血漿、血清、皮損部位組織液、淋巴穿刺液及腦脊液等標(biāo)本的梅毒螺旋體核酸檢測,在早期梅毒、神經(jīng)梅毒和先天梅毒等診療，以及螺旋體現(xiàn)癥感染和既往感染鑒別診療中含有一定的價值。另外，核酸擴(kuò)增技術(shù)也可應(yīng)用于梅毒螺旋體的耐藥性監(jiān)測、菌株流行病學(xué)分型。實(shí)驗(yàn)室規(guī)定4.1參考衛(wèi)生部頒發(fā)的《臨床基因擴(kuò)增診療實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》開展核酸檢測工作4.2實(shí)驗(yàn)室設(shè)立應(yīng)參考衛(wèi)生部頒發(fā)的《臨床基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗(yàn)室管理暫行方法》中制訂的臨床基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)立原則。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)立兩個獨(dú)立的工作區(qū)域：核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)，前區(qū)涉及試劑準(zhǔn)備區(qū)和樣品解決區(qū)，后區(qū)涉及擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，均應(yīng)設(shè)在不同的房間或區(qū)域。4.3建立與實(shí)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室管理有關(guān)的原則操作指導(dǎo)書和制訂嚴(yán)格的管理制度，工作人員必須充足理解各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵照執(zhí)行。4.4進(jìn)行核酸檢測的人員須含有核酸檢測實(shí)驗(yàn)室的上崗資格。5檢測辦法及程序5.1常規(guī)PCR核酸檢測5.1.1辦法檢測辦法為商品化試劑盒和實(shí)驗(yàn)室自建辦法，商品化試劑應(yīng)嚴(yán)格按闡明書操作。下面介紹的辦法是實(shí)驗(yàn)室自建辦法,用于梅毒螺旋體常規(guī)檢測、耐藥基因檢測或基因分型研究。5.1.2試劑（1）PCR引物：梅毒螺旋體常規(guī)檢測：普通使用擴(kuò)增bmp、tpp47、polA等基因序列的引物。梅毒螺旋體耐藥基因檢測：現(xiàn)在已知阿奇霉素耐藥基因采用23SribosomalRNA(rRNA)gene等基因序列的引物。梅毒螺旋體基因分型研究：慣用arp、tpr等基因序列的引物。（2）重要試劑：涉及核酸提取純化、PCR所需的試劑。5.1.35.1.3.1核酸提?。嚎墒褂霉枘z柱離心、磁性硅膠顆粒分離辦法以及自動化儀器等商品化試劑或設(shè)備并按闡明書操作。DNA應(yīng)置于-20℃保存，需長久保存的DNA應(yīng)置于-805.1.3.2PCR擴(kuò)增反映：PCR擴(kuò)增反映體系涉及四種脫氧核苷酸（dNTPs）、PCR緩沖液、TaqDNA聚合酶、目的檢測擴(kuò)增引物（套式PCR涉及內(nèi)引物和外引物），根據(jù)不同檢測目的使用對應(yīng)的程序進(jìn)行擴(kuò)增5.1.3.3擴(kuò)增產(chǎn)物分析：擴(kuò)增產(chǎn)物慣用分析辦法是瓊脂糖凝膠電泳法，與分子量原則比較，判斷擴(kuò)增片段與否在預(yù)期的分子量范疇內(nèi)。根據(jù)檢測目的還可采用限制性內(nèi)切酶酶切分析、特異性探針雜交分析以及DNA序列分析等進(jìn)行擴(kuò)增產(chǎn)物分析。5.1.3.2成果鑒定和報(bào)告每一次檢測需同時做陽性對照、陰性對照，只有陽性對照擴(kuò)增出預(yù)期的片段、陰性對照沒有擴(kuò)增出任何片段、雙份平行樣品成果一致的狀況下視為實(shí)驗(yàn)成立，可作出核酸檢測陽性或陰性成果的鑒定。（1）核酸檢測陽性：核酸擴(kuò)增出現(xiàn)目的條帶。（2）核酸檢測陰性：核酸擴(kuò)增未出現(xiàn)目的條帶。6質(zhì)量控制核酸擴(kuò)增檢測的質(zhì)量控制應(yīng)按照衛(wèi)生部《臨床基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗(yàn)室管理暫行方法》進(jìn)行，質(zhì)量控制要考慮從樣品接受到發(fā)出報(bào)告整個過程每個環(huán)節(jié)的管理過程，涉及：（1）人員；（2）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和環(huán)境；（3）儀器；（4）試劑；（5）操作過程；（6）外部質(zhì)控品使用等。6.1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格規(guī)定不同工作區(qū)的空氣流向：從試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品解決區(qū)，然后到擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不能逆向流動。6.2儀器設(shè)備加樣器、溫濕度計(jì)須經(jīng)計(jì)量部門校準(zhǔn)，每年一次；PCR儀、離心機(jī)能夠委托公司校準(zhǔn)，每年一次。冰箱、水浴箱用校準(zhǔn)合格的溫度計(jì)測量溫度，并做好統(tǒng)計(jì)。6.3檢測過程嚴(yán)格執(zhí)行儀器和試劑的原則操作程序（SOP），不得私自修改。每次實(shí)驗(yàn)需同時使用試劑盒內(nèi)的外部質(zhì)控品；每次實(shí)驗(yàn)按照試劑盒闡明書的規(guī)定使用試劑盒提供的外部質(zhì)控品，并滿足外部質(zhì)控品的規(guī)定。

第六章實(shí)驗(yàn)室生物安全1范疇本章規(guī)定了梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)。合用于全國各級各類梅毒實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用規(guī)定》GB19489-，《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS233-）》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)原則，《消毒技術(shù)規(guī)范（）》中華人民共和國衛(wèi)生部，《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范）》中國疾病防止控制中心，3梅毒的生物危害梅毒螺旋體屬第三類病原微生物，普通狀況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳輸風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后極少引發(fā)嚴(yán)重疾病，為含有有效治療和防止方法的微生物。4梅毒有關(guān)檢測的生物安全級別為了確保安全，對臨床和現(xiàn)場的未知樣本的檢測梅毒血清學(xué)檢測應(yīng)在符合Ⅱ級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。如有艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室，能夠在艾滋病抗體檢測實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。5生物安全確保方法5.1建立安全制度實(shí)驗(yàn)室主任是實(shí)驗(yàn)室安全的第一負(fù)責(zé)人，對實(shí)驗(yàn)室工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，負(fù)責(zé)制訂全方面的實(shí)驗(yàn)室安全管理制度并監(jiān)督貫徹。全部工作人員都應(yīng)無條件恪守實(shí)驗(yàn)室安全管理制度，保護(hù)自己和別人的安全。梅毒血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全原則操作程序（S-SOP），每年都應(yīng)對安全制度或安全原則操作程序及其貫徹狀況進(jìn)行檢查和修訂，并有統(tǒng)計(jì)。5.2培訓(xùn)和管理5.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全員安全培訓(xùn)，全部的血液、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在的傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。全部管理和檢測人員都應(yīng)接受省級以上梅毒、艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室主持的安全培訓(xùn)，涉及上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受管理人員的監(jiān)督。5.2.2必須對新上崗人員進(jìn)行安全教育和培訓(xùn)，使他們清晰實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，通過考核等方式確認(rèn)他們含有安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。5.2.3必須對新調(diào)入人員、外來合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。5.2.4生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的統(tǒng)計(jì)。5.3個人保健和防護(hù)5.3.1遇有手部皮膚有開放性傷口及其它不適于工作的狀況，應(yīng)暫停工作。5.3.2應(yīng)為每一名在梅毒5.3.35.3.4工作人員上崗前必須進(jìn)行梅毒、HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測，應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對工作人員采血檢測梅毒、5.3.55.3.65.3.7操作過程中，如發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立刻更換，如手套破損，應(yīng)立刻丟棄、洗手并換上新手套。5.3.85.4安全操作5.4.1試劑及樣品的管理應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定妥善保存血清及其它體液樣品，應(yīng)按有關(guān)規(guī)定設(shè)立專門儲存陽性血清、質(zhì)控品的血清庫，應(yīng)上鎖并指定專人管理。5.4.2實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作完畢應(yīng)對工作臺面消毒，推薦用0.1～0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作過程中如有樣品、檢測試劑外濺，應(yīng)及時消毒。5.4.3樣品的采集和解決抽取靜脈血液（或以其它方式收集血液樣品）時要注意安全，應(yīng)使用一次性注射器，戴手套，謹(jǐn)慎操作，避免血液污染雙手。應(yīng)小心避免被針頭和其它利器刺傷。離心樣品時要使用密閉的罐和密封頭，避免離心時液體溢出或在超/高速離心時形成氣溶膠。5.4.4樣品的帶入、帶出和操作5.4.4.1不得將非實(shí)驗(yàn)室物品帶入實(shí)驗(yàn)室。5.4.4.2打開樣品容器時要小心，避免內(nèi)容物潑濺。要核對樣品與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立刻將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器進(jìn)行消毒，同時要按照程序報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人。5.4.4.3要檢查樣品的狀況，統(tǒng)計(jì)有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等狀況。如污染過重或者認(rèn)為不能接受，則應(yīng)將樣品用安全方式廢棄，同時將狀況告知送樣人。5.4.4.4將樣品轉(zhuǎn)送到其它實(shí)驗(yàn)室時，應(yīng)避免對工作人員、患者或環(huán)境造成污染。護(hù)送樣品的人應(yīng)清晰接受地點(diǎn)和接受人，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定的人員應(yīng)及時確認(rèn)樣品已送達(dá)指定的實(shí)驗(yàn)室，被轉(zhuǎn)入安全位置并得到妥善解決。5.4.4.5被污染或可能污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。5.5使用利器注意事項(xiàng)5.5.1應(yīng)盡量避免在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在解決或清洗時應(yīng)采用方法避免刺傷或劃傷，并應(yīng)對用過的物品進(jìn)行消毒。5.5.2應(yīng)使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以減少直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性。5.5.3應(yīng)將用過的銳器直接放入耐穿、防滲漏的利器盒，用過的針頭應(yīng)直接放入結(jié)實(shí)的容器內(nèi)，消毒后廢棄5.5.4嚴(yán)禁將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。嚴(yán)禁用手直接接觸使用過的針頭、刀片等利器。6污染物解決6.1應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用規(guī)定》（GB19489-）和《消毒技術(shù)規(guī)范（）》處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。6.2梅毒血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的全部廢棄物，涉及不再需要的樣品和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行解決或廢棄。6.3梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室慣用的消毒辦法6.3.1物理消毒辦法6.3.1.1高壓蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;6.3.2化學(xué)消毒辦法6.3.2.1含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯～5000mg/L）6.3.2.275%乙醇6.3.3梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室物品慣用的消毒辦法6.3.3.1廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。6.3.3.2生物安全柜工作臺面和儀器表面：75%乙醇。6.3.3.3溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。6.3.3.4污染的臺面和器具：mg/L次氯酸鈉,也能夠用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。

第七章梅毒血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理1范疇本章規(guī)定了梅毒血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理有關(guān)內(nèi)容，涉及質(zhì)量確保、質(zhì)量控制和質(zhì)量評價，合用于各級實(shí)驗(yàn)室梅毒檢測的質(zhì)量管理。2規(guī)范性引用文獻(xiàn)《性傳輸疾病實(shí)驗(yàn)室診療指南》中國疾病防止控制中心性病控制中心，《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理方法》衛(wèi)生部，衛(wèi)醫(yī)發(fā)〔〕73號，《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理方法》國家環(huán)?？偩郑度珖滩z測技術(shù)規(guī)范》中國疾病防止控制中心，3質(zhì)量確保3.1行政支持應(yīng)將梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、完善和質(zhì)量管理納入地方衛(wèi)生行政規(guī)劃，確保明驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和重要技術(shù)人員隊(duì)伍的穩(wěn)定，確保明驗(yàn)室空間和設(shè)備需要，并進(jìn)行經(jīng)常性監(jiān)督檢查。梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室能夠與HIV抗體檢測實(shí)驗(yàn)室有效地結(jié)合。人員培訓(xùn)檢測技術(shù)人員需通過上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。上崗培訓(xùn)內(nèi)容最少應(yīng)涉及：梅毒檢測有關(guān)基礎(chǔ)知識、梅毒有關(guān)檢測技術(shù)及管理規(guī)定、實(shí)驗(yàn)操作、臨床意義、質(zhì)量確保與質(zhì)量控制和生物安全等。規(guī)定掌握有關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨(dú)立純熟地操作并經(jīng)考核合格，持證上崗。在崗持續(xù)培訓(xùn)指在工作中要根據(jù)需要接受復(fù)培訓(xùn)，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員最少每3年1次。實(shí)驗(yàn)室在使用新辦法前，須對技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)并進(jìn)行考核，獲得資格后方可開展對應(yīng)工作。環(huán)境條件血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室梅毒血清學(xué)檢測需要滿足實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)定和確保生物安全的條件。在含有HIV血清學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室的狀況下，可與HIV檢測共享空間和設(shè)備，其規(guī)定參考《全國艾滋病檢測工作管理方法》的規(guī)定。3.3.2病原學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室參見《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理方法》，可與其它開展性病顯微鏡檢測的實(shí)驗(yàn)室共享空間，但需要有相對避光的區(qū)域。3.3.3核酸檢測的實(shí)驗(yàn)室參見《臨床基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗(yàn)室管理暫行方法》，可與開展其它微生物核酸檢測的實(shí)驗(yàn)室共享空間和設(shè)備。樣品采集、運(yùn)輸和解決嚴(yán)格按照本規(guī)范第一章規(guī)定執(zhí)行。3.5檢測辦法和試劑的選擇用于臨床診療的檢測辦法應(yīng)使用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊同意的試劑，應(yīng)選擇敏感性高、特異性好的試劑。性病參比實(shí)驗(yàn)室和省級性病中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定時組織開展梅毒診療試劑的臨床質(zhì)量評價和新辦法與技術(shù)的評定。試劑質(zhì)量評價辦法參見本章5.2.6。各實(shí)驗(yàn)室更換試劑批號時，應(yīng)進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)，即新批號試劑在測定質(zhì)控品（已知成果）時能夠獲得與原試劑相似成果的狀況。全部試劑盒須嚴(yán)格按規(guī)定妥善保存。試劑盒拆封時，要統(tǒng)計(jì)拆封時間，全部試劑嚴(yán)格控制在使用期內(nèi)使用。用內(nèi)部質(zhì)控品來控制不同批號之間的試劑差別。3.6設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)3.6.1設(shè)備校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)立慣用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以確保檢測工作正常運(yùn)轉(zhuǎn)。必須經(jīng)國家法定部門定時（每年最少1次）校準(zhǔn)的儀器最少涉及：酶標(biāo)儀/洗板機(jī)，加樣器，溫度計(jì)，高壓滅菌器。加樣器、溫濕度計(jì)須經(jīng)計(jì)量部門校準(zhǔn)。其它精密儀器及出具實(shí)驗(yàn)成果的儀器，如生物安全柜，旋轉(zhuǎn)儀、離心機(jī)等也須定時校準(zhǔn)。3.6.2設(shè)備維護(hù)及使用紀(jì)錄3.6.2.1酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)每個工作日核對濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道與否暢通，與否有漏液現(xiàn)象。定時清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。定時（每月最少1次）檢查洗板機(jī)洗滌時各孔與否與對應(yīng)的沖洗頭對位良好；負(fù)壓與否符合規(guī)定規(guī)定。定時（每年最少1次）檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)須更換；根據(jù)儀器內(nèi)含有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保存統(tǒng)計(jì)。實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)異常狀況，應(yīng)隨時進(jìn)行解決，可根據(jù)使用狀況更換必要的部件。3.6.2.2RPR/TRUST用水平旋轉(zhuǎn)儀每次使用前應(yīng)對水平旋轉(zhuǎn)儀的旋轉(zhuǎn)速度和幅度進(jìn)行校準(zhǔn)，旋轉(zhuǎn)速度范疇：100±2r/min，旋轉(zhuǎn)幅度采用畫圈法，旋轉(zhuǎn)時圈直徑應(yīng)在2±0.2cm.3.6.2.3移液器定時（每年最少1次）校準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)異常狀況應(yīng)隨時進(jìn)行校準(zhǔn)。標(biāo)定辦法涉及有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。校準(zhǔn)多道移液器時，必須確保每一種加樣頭都能持續(xù)、精確加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家闡明書規(guī)定的范疇內(nèi)。范例用蒸餾水稱量法標(biāo)定移液器：在室溫22℃無風(fēng)的工作室中，在萬分之一級別天平上放置一種小三角燒瓶，用待校準(zhǔn)的移液器吸取寄存過夜的蒸餾水加入燒瓶底部，稱重并計(jì)算蒸餾水重量，持續(xù)稱重10次。加蒸餾水的量根據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同（表5），10次校準(zhǔn)稱量均在規(guī)定的重量范疇內(nèi)為合格，貼上合格標(biāo)簽，注明校準(zhǔn)日期，不合格移液器要請生產(chǎn)廠家進(jìn)行校準(zhǔn)。填寫和保存校準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)。表5稱重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量規(guī)定重量范疇0.5～521.75～2.25mg1～10109.8～10.2mg40～2007069.4～70.6mg200～1000300298.0～302.0mg1～5mL20001990.0～.0mg2～10mL35003485.0～3515.0mg3.6.2.4冰箱每天檢查和統(tǒng)計(jì)冰箱溫度，并做好統(tǒng)計(jì)。使用通過計(jì)量部門校準(zhǔn)合格的溫度計(jì)測量冰箱的實(shí)際溫度。3.6.2.5離心機(jī)，生物安全柜，高壓滅菌器等，每次使用前檢查儀器與否處在正常運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)，并做好統(tǒng)計(jì)。3.7實(shí)驗(yàn)耗材 實(shí)驗(yàn)室需選購質(zhì)量優(yōu)良的耗材，以確保檢測工作安全和成果的可靠性，并定時（每批次）或在更換產(chǎn)品時對耗材進(jìn)行質(zhì)量評價。3.8文獻(xiàn)和文獻(xiàn)管理3.8.1原則操作程序（SOP）3.8.1.1建立SOP文獻(xiàn)各級梅毒實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立覆蓋全部有關(guān)的SOP文獻(xiàn)。梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室的SOP文獻(xiàn)最少應(yīng)涉及：（1）樣品的接受、登記、解決、保存和運(yùn)輸；（2）檢測辦法和環(huán)節(jié)；（3）試劑使用和保存；（4）儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)；（5）質(zhì)量控制規(guī)定及程序；（6）成果報(bào)告；（7）實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、有關(guān)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)與保存；（8）實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)及實(shí)驗(yàn)室的清理和消毒。省級中心實(shí)驗(yàn)室的SOP文獻(xiàn)最少應(yīng)涉及：滿足上述梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室的SOP文獻(xiàn)外，還應(yīng)并涉及：陽性樣品庫管理；省級實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)質(zhì)量確保及質(zhì)量控制實(shí)施程序；省級試劑質(zhì)量評價方案；實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場督導(dǎo)、檢查和考核辦法。3.8.1.2SOP最少應(yīng)涉及下列內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號；（2）編寫和修訂日期；（3）編寫和修訂人員姓名；（4）辦法、目的和應(yīng)用范疇；（5）檢測設(shè)備；（6）試劑及使用期；（7）安全防護(hù)有關(guān)環(huán)節(jié)；（8）成果的解釋和報(bào)告；（9）附錄，涉及有關(guān)的附加文獻(xiàn)如原則表格、設(shè)備和試劑盒闡明書等。3.8.1.3SOP編寫及修訂SOP文獻(xiàn)由崗位工作人員起草，實(shí)驗(yàn)室主任審定。SOP應(yīng)做到定時修訂，修訂應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)室主管人員（技術(shù)負(fù)責(zé)人）的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)行。全部工作人員要在所從事工作的SOP文獻(xiàn)上簽名表達(dá)已經(jīng)閱讀并掌握了有關(guān)內(nèi)容。3.8.1.4實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行原則操作程序（SOP），不得私自修改。3.8.2實(shí)驗(yàn)原始統(tǒng)計(jì)表應(yīng)按實(shí)驗(yàn)規(guī)定，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)操作原始統(tǒng)計(jì)表，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒廠家、測定辦法、批號、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測日期。3.8.3成果報(bào)告檢測成果的報(bào)告應(yīng)在滿足試劑盒及外部質(zhì)控品成果規(guī)定的前提下進(jìn)行。試劑盒及外部質(zhì)控品不合格，樣品需要重新檢測；復(fù)核人對檢測成果進(jìn)行認(rèn)真復(fù)核并對成果提出結(jié)論、簽發(fā)人對實(shí)驗(yàn)結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字。3.8.4樣品登記和保存收到樣品后，建立唯一編碼，及時登記有關(guān)信息，涉及受檢者姓名或代號、試管編號、送檢單位、人群類別、檢查成果、送檢日期、報(bào)告日期、備注（必要時統(tǒng)計(jì)通信地址）等。樣品的保存統(tǒng)計(jì)應(yīng)涉及樣品的類型、貯存量、貯存起始時間、貯存地點(diǎn)（或/和位置）以及樣品保管人姓名。3.8.5文獻(xiàn)存檔實(shí)驗(yàn)原始統(tǒng)計(jì)表、打印數(shù)據(jù)、免疫印跡實(shí)驗(yàn)的膜反映條帶或其照片、檢測統(tǒng)計(jì)表、樣品登記、樣品保存統(tǒng)計(jì)以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)、人員培訓(xùn)統(tǒng)計(jì)等都應(yīng)當(dāng)妥善存檔保存5年以上。最佳同時使用計(jì)算機(jī)保存多種文獻(xiàn)和統(tǒng)計(jì)。4質(zhì)量控制 見各有關(guān)章節(jié)。5質(zhì)量評價涉及內(nèi)部質(zhì)量評價和外部質(zhì)量評價。5.1內(nèi)部質(zhì)量評價內(nèi)部質(zhì)量評價指由本實(shí)驗(yàn)室組織的質(zhì)量評價，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定時組織內(nèi)部質(zhì)量評價，應(yīng)涉及樣品接受、檢測、保存至發(fā)出檢測報(bào)告的各個環(huán)節(jié)。省級中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過資格認(rèn)證，建議通過實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證承認(rèn)，并按照認(rèn)證承認(rèn)的有關(guān)規(guī)定建立質(zhì)量評價機(jī)制。5.2外部質(zhì)量評價外部質(zhì)量評價由本實(shí)驗(yàn)室之外的機(jī)構(gòu)或單位組織，涉及對質(zhì)量確保和質(zhì)量控制工作的評價，職能工作考核重要是評價實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量確保工作，能力驗(yàn)證（PT）或室間質(zhì)量評價重要是評價實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制工作，是檢查實(shí)驗(yàn)室對未知樣品獲得對的成果的能力。全部梅毒檢測實(shí)驗(yàn)室必須參加外部質(zhì)量評價，省級中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加國家級職能工作考核和PT，其它實(shí)驗(yàn)室應(yīng)參加省級職能工作考核和PT。5.2.1職能工作考核5.2.1.1組織者：中國疾病防止控制中心性病控制中心參比實(shí)驗(yàn)室和性病艾滋病防止疾控中心參比實(shí)驗(yàn)室共同負(fù)責(zé)省級中心實(shí)驗(yàn)室職能工作考核的組織，省級中心實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)轄區(qū)內(nèi)梅毒實(shí)驗(yàn)室的職能工作考核的組織工作。5.2.2.2頻度：每年對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行一次職能工作考核。5.2.2.3方式：職能工作考核采用問卷調(diào)查和現(xiàn)場評價相結(jié)合的方式進(jìn)行。全部實(shí)驗(yàn)室必須接受問卷調(diào)查，可對部分實(shí)驗(yàn)室（5～10%）進(jìn)行現(xiàn)場抽查。（1）問卷調(diào)查1）省級考核最少應(yīng)涉及下列內(nèi)容：人員培訓(xùn)及能力，環(huán)境條件，儀器設(shè)備使用及校準(zhǔn)，管理性文獻(xiàn)及實(shí)驗(yàn)紀(jì)錄，檢測報(bào)告，試劑使用狀況，樣品接受及保存狀況，質(zhì)量確保和質(zhì)量控制。國家級考核除上述內(nèi)容外，應(yīng)涉及：全省實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)、檢測、培訓(xùn)、試劑考核、省級職能工作考核、PT、現(xiàn)場督導(dǎo)等狀況。根據(jù)需要問卷內(nèi)容可進(jìn)行合理調(diào)節(jié)。2）考核程序：由組織者發(fā)放問卷，各參評實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定，根據(jù)當(dāng)年實(shí)際狀況逐項(xiàng)如實(shí)填寫實(shí)驗(yàn)室問卷調(diào)查表，并在規(guī)定時間內(nèi)反饋。3）考核成果鑒定：組織者接到調(diào)查問卷后，根據(jù)評分原則對各實(shí)驗(yàn)室的問卷進(jìn)行匯總、統(tǒng)計(jì)、分析和評定。必要時可調(diào)用有關(guān)實(shí)驗(yàn)的原始統(tǒng)計(jì)進(jìn)行分析核查。分析各實(shí)驗(yàn)室考核成果，并進(jìn)行評分和評定：90分以上為優(yōu)秀，80－90分為良好，60－80分為合格，60分下列為不合格。（2）現(xiàn)場評價1）評價內(nèi)容現(xiàn)場評價最少應(yīng)涉及：實(shí)驗(yàn)室人員構(gòu)成及其職責(zé)分工；實(shí)驗(yàn)室分區(qū)、布局、恒溫設(shè)施；儀器設(shè)備及其使用、校準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)；質(zhì)量確保文獻(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室SOP文獻(xiàn)及原始統(tǒng)計(jì)；實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)方法，安全用品及安全規(guī)程；消毒與污物解決辦法及設(shè)施；檢測資料數(shù)據(jù)庫的建設(shè)、存檔、備份、安全和保密；樣品保存和安全；開展的梅毒檢測項(xiàng)目和檢測試劑。省級中心實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場評價最少應(yīng)涉及：除上述內(nèi)容外，涉及陽性樣品庫的管理，全省實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)、培訓(xùn)、實(shí)驗(yàn)室管理、質(zhì)量確保等狀況。2）工作程序有關(guān)梅毒檢測的實(shí)驗(yàn)室人員全部到場，報(bào)告人員構(gòu)成及其職責(zé)分工、正常狀況下實(shí)驗(yàn)室收樣、檢測、直至發(fā)出報(bào)告的全過程。全方面聽取上級主管部門和實(shí)驗(yàn)室人員介紹歷年檢測工作狀況報(bào)告、存在問題、對專家組的工作建議和此后工作的構(gòu)想。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)提供對應(yīng)的文字資料和數(shù)據(jù)。對實(shí)驗(yàn)室人員業(yè)務(wù)素質(zhì)、儀器設(shè)備、場地布