動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室

動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室

及其實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的

技術(shù)原理、設(shè)置要求和安全管理

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的簡(jiǎn)介二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生生物危害的來(lái)源

三、動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與防護(hù)要求

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的一般生物安全管理要求

（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程（活動(dòng)）的行為規(guī)范

四、各級(jí)動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)原理、設(shè)置要求和安全管理

五、無(wú)脊椎動(dòng)物使用安全原則

六、相關(guān)的法律、法規(guī)和部門(mén)規(guī)范一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的簡(jiǎn)介：以科學(xué)研究為目的而進(jìn)行科學(xué)飼養(yǎng)、繁殖的動(dòng)物稱(chēng)之為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。有人稱(chēng)之為“活的試劑”。它包括嚴(yán)格意義上的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物即在一定的環(huán)境條件控制下，經(jīng)過(guò)科學(xué)的育種、繁殖生產(chǎn)，遺傳背景清楚，攜帶的微生物狀況明確，并對(duì)其生態(tài)學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)、形態(tài)結(jié)構(gòu)了解的特殊動(dòng)物如大鼠、小鼠、金黃地鼠、豚鼠、家兔、犬和小型豬等。也包括一部分家畜、家禽和一些未經(jīng)過(guò)人工馴化的野生動(dòng)物，如貓、羊、非人靈長(zhǎng)類(lèi)、雞、鴨、鴿、蛇、蛙類(lèi)等等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)、保種維持、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)研究、實(shí)驗(yàn)等設(shè)施的總稱(chēng)。醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施一般包括更衣室、淋浴室、洗滌消毒室、監(jiān)控室、潔凈區(qū)外庫(kù)房、樣品室、樣品配置、手術(shù)室、行為實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物尸體及廢物存放室、潔凈區(qū)內(nèi)庫(kù)房、動(dòng)物檢疫室、大、小鼠飼養(yǎng)室、家兔飼養(yǎng)室、豚鼠飼養(yǎng)室等等。（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施1、屏障系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施的基本要求2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類(lèi)

1、屏障系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施的基本要求最適宜溫度：20-25℃，溫差：3℃或4℃適宜的相對(duì)濕度：40-70%換氣次數(shù)：10-20次/小時(shí)，潔凈程度越高，要求換氣次數(shù)越多。氣流速度：0.1-0.2m/s。壓強(qiáng)梯度：潔凈區(qū)高于污染區(qū)，每級(jí)壓差20-50Pa。合理組織氣流和風(fēng)速可調(diào)節(jié)室內(nèi)溫度和濕度，又可降低室內(nèi)粉塵和有害氣體污染，控制傳染病的流行。光照：工作照度150-300lx,動(dòng)物照度18-30lx，明暗交替時(shí)間12/12或10/14。噪聲：60lb以下，避免高頻率噪聲和超聲波的干擾。氨濃度：不大于14㎎/m3。動(dòng)物環(huán)境設(shè)施指標(biāo)應(yīng)符合GB14925-2001要求：見(jiàn)下表1、2表1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育、生產(chǎn)設(shè)施環(huán)境指標(biāo)（靜態(tài)）項(xiàng)目指標(biāo)小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、貓、小型豬雞普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境屏障環(huán)境溫度，℃18～2920～2616～2820～2616～28日溫差，℃≤-4-44相對(duì)濕度，%40～70換氣次數(shù)，次/h8～1010～20120～5028～1010～20120～50210～202氣流速度，m/s0.1～0.2壓強(qiáng)梯度，Pa-20～502100～150-20～502100～15020～502空氣潔凈度，級(jí)-10000100-1000010010000落下菌數(shù)，個(gè)/皿≤303無(wú)檢出303無(wú)檢出3氨濃度，mg/m3≤14噪聲，dB≤60工作照度150～300動(dòng)物照度15～20100～2005～10晝夜明暗交替時(shí)間，h12/12或10/14注：表中氨濃度指標(biāo)為動(dòng)態(tài)指標(biāo)。一般采用全新風(fēng)，保證動(dòng)物室有足夠的新鮮空氣。如果先期去除了粉塵顆粒物和有毒有害氣體，不排除使用循環(huán)空氣的可能，但再循環(huán)空氣僅限于同一單元，新鮮空氣不得少于50%。并保證供風(fēng)的溫、濕度參數(shù)。單走廊設(shè)施必須保證飼育室、實(shí)驗(yàn)室壓強(qiáng)最高。表2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（設(shè)備3）環(huán)境指標(biāo)（靜態(tài)）

項(xiàng)目指標(biāo)小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、貓、小型豬雞普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境屏障環(huán)境溫度，℃19～2620～2516～2618～2216～26日溫差，℃≤43433相對(duì)濕度，%40～70換氣次數(shù)，次/h8～1010～20120～5028～1010～20120～50210～202氣流速度，m/s0.1～0.2壓強(qiáng)梯度，Pa-20～502100～150-20～502100～150100～1502空氣潔凈度，級(jí)-10000100-10000100100落下菌數(shù)，個(gè)/皿≤303無(wú)檢出303無(wú)檢出無(wú)檢出氨濃度，mg/m3≤14噪聲，dB≤60工作照度150～300動(dòng)物照度15～20100～2005～10晝夜明暗交替時(shí)間，h12/12或10/14注：表中氨濃度指標(biāo)為動(dòng)態(tài)指標(biāo)。一般采用全新風(fēng)，保證動(dòng)物房有足夠的新鮮空氣。如果先期去除了粉塵顆粒物和有毒有害氣體，不排除使用循環(huán)空氣的可能，但再循環(huán)空氣應(yīng)取自于無(wú)污染區(qū)域或同一單元，新鮮空氣不得少于50%。并保證供風(fēng)的溫、濕度參數(shù)。單走廊設(shè)施必須保證飼育室、實(shí)驗(yàn)室壓強(qiáng)最高。此處動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備系指動(dòng)物飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)時(shí)，保障動(dòng)物所處的局部環(huán)境應(yīng)達(dá)到本環(huán)境指標(biāo)的設(shè)備。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施分類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施根據(jù)對(duì)飼養(yǎng)動(dòng)物的空氣凈化程度分為三類(lèi)。開(kāi)放系統(tǒng)（opensystem）；屏障系統(tǒng)（barriersystem）；隔離系統(tǒng)（isolationsystem）。不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施環(huán)境級(jí)別對(duì)應(yīng)于不同的動(dòng)物級(jí)別，二者的對(duì)應(yīng)關(guān)系見(jiàn)下表

動(dòng)物級(jí)別和潔凈度的對(duì)應(yīng)關(guān)系

動(dòng)物級(jí)別環(huán)境級(jí)別（潔凈度，落下菌）普通動(dòng)物開(kāi)放系統(tǒng)（－，30個(gè)/皿）SPF動(dòng)物屏障系統(tǒng)（萬(wàn)級(jí)，3個(gè)/皿）無(wú)菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物隔離系統(tǒng)（百級(jí)，0個(gè)/皿）（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物級(jí)別一級(jí)動(dòng)物（普通動(dòng)物）不攜帶主要人畜共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原。二級(jí)動(dòng)物（清潔動(dòng)物，國(guó)際上無(wú)此等級(jí)）除不能攜帶主要人畜共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原外，不能攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科研干擾大的病原。三級(jí)動(dòng)物（SPF級(jí)，無(wú)特定病原體動(dòng)物）除一、二級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科研干擾大的病原。四級(jí)動(dòng)物（無(wú)菌動(dòng)物）不攜帶可檢出的一切病原體。悉生動(dòng)物則是在無(wú)菌動(dòng)物物體內(nèi)移入一種或幾種已知微生物后的動(dòng)物。二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生生物危害的來(lái)源：動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室是一種特殊的通過(guò)人工或自然感染進(jìn)行動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室。第一、動(dòng)物性氣溶膠（AnimalAerosol）的產(chǎn)生：感染動(dòng)物在觀察飼養(yǎng)期間，它們?cè)诤粑?、排泄、抓咬、掙扎、逃逸、跳躍時(shí)，在更換墊料、飼料，進(jìn)行感染接種（特別是鼻腔內(nèi)接種）時(shí)，在尸體剖檢、病理組織、排泄物的處理等過(guò)程中會(huì)大量產(chǎn)生傳播危害性極大的動(dòng)物性氣溶膠。因此對(duì)氣溶膠的生物安全防護(hù)，應(yīng)當(dāng)是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中的核心。第二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，特別是實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物(Experjmentalanimals)本身可能患有能感染人的人畜共患?。▃oonoticDisease）。病例如下：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)的這兩大危害有力說(shuō)明：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室無(wú)論在操作技術(shù)規(guī)范的制訂，個(gè)人安全防護(hù)設(shè)備的設(shè)置，以及實(shí)驗(yàn)室設(shè)施的設(shè)計(jì)和建設(shè)上，都有很大的特點(diǎn)和特殊的要求。第一種危害要用實(shí)驗(yàn)室設(shè)施（二級(jí)隔離）來(lái)防范，通過(guò)靜態(tài)隔離（負(fù)壓梯度）動(dòng)態(tài)隔離和排風(fēng)處理（HEPA過(guò)濾）等措施，把產(chǎn)生的動(dòng)物性氣溶膠牢牢地控制在污染區(qū)內(nèi)，確保不向外環(huán)境擴(kuò)散。第二種危害，則要用安全防護(hù)設(shè)備（一級(jí)隔離）和其他個(gè)人防護(hù)設(shè)備（personnelprotectiveEquipmentPPES）來(lái)防止病原微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的感染。三、動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與防護(hù)要求：生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)原則就是要做到三保護(hù)：保護(hù)人、保護(hù)環(huán)境和保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

保護(hù)人員免受相關(guān)危害。如感染、過(guò)敏、中毒或被動(dòng)物抓撓撕咬等；

保護(hù)動(dòng)物即保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量和保證人道主義使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；

保護(hù)環(huán)境即保證室內(nèi)空氣、污水及廢棄物（墊料、糞便、動(dòng)物組織、動(dòng)物尸體）等不污染室外環(huán)境。為達(dá)到三保護(hù)的原則，生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室主要通過(guò)設(shè)施（Facilities）、設(shè)備（Equipment）、人員及素質(zhì)（Practices）的有效結(jié)合加以實(shí)現(xiàn)。（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的一般生物安全管理要求：防護(hù)設(shè)施（secondarybarrier,二級(jí)屏障）：實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)設(shè)計(jì)構(gòu)成二級(jí)物理防護(hù)。二級(jí)防護(hù)的能力取決于實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和室內(nèi)氣壓，要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的安全要求進(jìn)行設(shè)計(jì)。一般把實(shí)驗(yàn)室分為潔凈、半污染和污染三個(gè)區(qū)。實(shí)驗(yàn)室的墻壁保持密閉，空調(diào)通風(fēng)的氣流方向永遠(yuǎn)保持：外界－HEPA－潔凈區(qū)－半污染區(qū)－污染區(qū)－HEPA－外界。防護(hù)設(shè)備（primarybarrier,一級(jí)屏障）：包括各級(jí)生物安全柜和個(gè)人防護(hù)器材。人員及素質(zhì):良好的專(zhuān)業(yè)訓(xùn)練和技術(shù)能力對(duì)保證實(shí)驗(yàn)室生物安全具有重要的作用。動(dòng)物房和生物安全實(shí)驗(yàn)室一樣，主要根據(jù)所研究病源微生物的危害評(píng)估結(jié)果和危害程度分類(lèi)劃分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)動(dòng)物安全水平。在生物因子方面，包括常規(guī)傳播途徑、所用的體積和濃度、接種途徑和是否能以何種方式排毒及生物因子的總體危險(xiǎn)程度。在動(dòng)物方面，包括動(dòng)物的性質(zhì)，比如它們的侵犯性和咬、抓傾向，它們天然的體外寄生蟲(chóng)，易感的動(dòng)物病及可能釋放的過(guò)敏原和動(dòng)物接種病原微生物后可能產(chǎn)生的結(jié)果等等。

由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常采取群體飼養(yǎng)，極易造成動(dòng)物疾病的暴發(fā)和流行。造成動(dòng)物傳染病流行的病原多種多樣，有的病原宿主廣泛，屬人畜共患病，可同時(shí)引起人和動(dòng)物的疾病，就更具危險(xiǎn)性。嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房的管理制度，預(yù)防在先，是杜絕人和動(dòng)物間疾病傳播的根本保證。包括：1、保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房生物安全的基本措施2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫和疾病的控制及處理3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房的消毒措施1、保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房生物安全的基本措施(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施為單獨(dú)區(qū)域，與辦公和其他實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所分開(kāi)。(2)工作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)培訓(xùn)。（3）具有一定規(guī)模的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室建筑，周?chē)辽賾?yīng)有20m衛(wèi)生間隔區(qū)。不同種屬、不同品系、不同來(lái)源的動(dòng)物必須分室飼養(yǎng)，不同對(duì)象、不同內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)分室進(jìn)行。各室之間定向氣流不能交叉循環(huán)。（4）定期檢測(cè)，更換高、中、低效濾膜，保持系統(tǒng)處于良好狀態(tài)。（5）選用具備有效動(dòng)物繁育合格證書(shū)的動(dòng)物，（6）動(dòng)物、工作人員、物品分別進(jìn)入屏障及隔離系統(tǒng)，并只能由潔凈度高的區(qū)域向潔凈度低的區(qū)域定向移動(dòng)。房間隨時(shí)關(guān)門(mén)。

工作人員更換工作服，戴帽、手套、口罩、鞋套，風(fēng)淋后方可進(jìn)入。

動(dòng)物由動(dòng)物傳遞窗，外包裝經(jīng)紫外線照射或噴灑消毒液后傳入，入室后檢疫3-7天。所有樣品、飼料（r輻射滅菌）由物品傳遞窗經(jīng)紫外線照射或噴灑消毒液后傳入。

非實(shí)驗(yàn)用品（如食物、飲水、香煙等）一律不得帶入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。（7）器具、飲水瓶、墊料等須經(jīng)高壓滅菌后方可使用。動(dòng)物飲用、屏障系統(tǒng)內(nèi)使用滅菌水。（8）每周更換籠具、飲用水兩次。用過(guò)的器具及時(shí)清洗并高壓消毒。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)清洗并消毒。（9）按操作規(guī)程抓持、固定動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)操作。（10）設(shè)置安全出口、出口指示、滅火器械。配置應(yīng)急洗眼器。（11）廢棄物由污物走廊傳出。專(zhuān)門(mén)放在指定位置統(tǒng)一處理2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫和疾病的控制及處理

（1）凡外來(lái)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物至少經(jīng)過(guò)3天以上的隔離檢疫。（2）試驗(yàn)和研究開(kāi)始前，要保證動(dòng)物無(wú)任何疾病，并保證動(dòng)物避免可影響研究目的及實(shí)施的因素。（3）動(dòng)物發(fā)生疾病死亡應(yīng)及時(shí)進(jìn)行病理尸檢或其他實(shí)驗(yàn)室檢查，作出診斷，提出處理意見(jiàn)。當(dāng)動(dòng)物發(fā)生傳染病時(shí)，原則上全部銷(xiāo)毀。房屋、用具、籠架、墊料、衣帽等必須進(jìn)行徹底消毒。動(dòng)物室封鎖一段時(shí)間才能使用。必要時(shí)報(bào)告試驗(yàn)負(fù)責(zé)人及主管部門(mén)。（4）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生烈性傳染病流行時(shí)，應(yīng)立即上報(bào)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢定機(jī)構(gòu)，同時(shí)采取嚴(yán)格的隔離消毒措施，以免傳染病的蔓延。（5）尸體處理：尸體處理一般要求焚燒，深埋，大型動(dòng)物可消毒加工后利用。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房的消毒措施SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的一般日常清潔消毒制度可結(jié)合各實(shí)驗(yàn)室的不同硬件，但都應(yīng)滿(mǎn)足動(dòng)物級(jí)別和潔凈度基本要求。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程（活動(dòng)）的行為規(guī)范：

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)和使用應(yīng)遵守國(guó)家有關(guān)的法律和法規(guī)。2、應(yīng)明確使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的理由和目的。使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的最終目的實(shí)應(yīng)提高人類(lèi)和動(dòng)物的健康、加速科學(xué)發(fā)展、促進(jìn)社會(huì)進(jìn)步。3、明確實(shí)驗(yàn)所使用動(dòng)物的種類(lèi)和數(shù)量，動(dòng)物的數(shù)量應(yīng)滿(mǎn)足統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程（活動(dòng)）的行為規(guī)范：

4、完善標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，避免或減輕因?qū)嶒?yàn)對(duì)動(dòng)物造成的不適和痛苦。包括使用適當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜、鎮(zhèn)痛或麻醉方法；禁止在非麻醉狀態(tài)下進(jìn)行手術(shù)。5、嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嵤?shí)驗(yàn)后動(dòng)物的處理，包括麻醉、實(shí)驗(yàn)后的護(hù)理或用麻醉方法處死。6、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要求保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的良好生活條件，包括飼養(yǎng)環(huán)境、符合需求的飼料及細(xì)心的護(hù)理等。保證其生活習(xí)性，保證其健康和舒適。7、研究人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作人員應(yīng)接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本知識(shí)和操作技能等方面的培訓(xùn)。8、使用過(guò)程中要求保證周?chē)h(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員的安全。1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本使用程序和要求（1）實(shí)驗(yàn)室如需要使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，應(yīng)首先向生物安全和倫理委員會(huì)提出申請(qǐng)，填寫(xiě)申請(qǐng)表（見(jiàn)附件，《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用申請(qǐng)表》）。（2）使用實(shí)驗(yàn)室得到認(rèn)可后，根據(jù)申請(qǐng)中申請(qǐng)的動(dòng)物種屬和數(shù)量，安排實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)和使用。（3）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須在指定的區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)和使用，禁止在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)操作結(jié)束時(shí)，動(dòng)物須返回指定的飼養(yǎng)區(qū)域內(nèi)，不能在實(shí)驗(yàn)內(nèi)過(guò)夜。（4）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)指定的區(qū)域進(jìn)行。2、含有感染性材料的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求

（1）涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中進(jìn)行，并防止泄露在安全柜底面。操作包括感染動(dòng)物的剖檢、組織的取材、采血及動(dòng)物的病原接種。（2）動(dòng)物籠具在清洗前先做清除污染處理。（3）污物、一次性物品需放入醫(yī)療廢物專(zhuān)用垃圾袋中，經(jīng)高壓滅菌后方可拿出實(shí)驗(yàn)室。（4）動(dòng)物尸體用雙層醫(yī)療廢物專(zhuān)用垃圾袋包裹后，放入標(biāo)有動(dòng)物尸體專(zhuān)用的容器中，用消毒液噴霧容器表面后，運(yùn)至解剖區(qū)域剖檢。（5）生物安全柜使用后應(yīng)用消毒液擦拭、揩干。（6）廢液需按比例倒入有消毒液的桶中，倒入時(shí)需沿容器壁輕倒共戴眼罩，防止濺入眼中。2、含有感染性材料的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求

（7）如果有感染性物質(zhì)濺到生物安全柜上、地上以及其他地方，應(yīng)按“菌（毒）外溢在臺(tái)面、地面和其他表面”處理，具體方法參見(jiàn)第十四章。（8）每天工作結(jié)束時(shí)，應(yīng)用消毒液擦拭門(mén)把手和地面等表面區(qū)域。（9）廢物放入高壓滅菌器內(nèi)時(shí)需同時(shí)粘貼指示條，物品移出前觀察指示條是否達(dá)到滅菌要求。顏色不符時(shí)需重復(fù)高壓滅菌。（10）高壓滅菌器需每月做滅菌測(cè)試一次，并作記錄。

3、小動(dòng)物的飼養(yǎng)小動(dòng)物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等嚙齒類(lèi)動(dòng)物，其飼養(yǎng)應(yīng)遵循下列原則：（1）使用動(dòng)物必須按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)特殊要求檢驗(yàn)合格，充分準(zhǔn)備后進(jìn)入系統(tǒng)，飼養(yǎng)人員應(yīng)按實(shí)驗(yàn)設(shè)施規(guī)定程序要求進(jìn)入系統(tǒng)。（2）及時(shí)觀察動(dòng)物飲食、精神狀況，有無(wú)異常表現(xiàn)，患病或死亡。（3）動(dòng)物應(yīng)可自由進(jìn)食、飲水。定期檢查水、料是否充足并及時(shí)補(bǔ)給。同時(shí)保證其他飼養(yǎng)條件完備。4、大動(dòng)物的飼養(yǎng)大動(dòng)物主要指狗、豬及非人類(lèi)靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物等，其飼養(yǎng)應(yīng)遵循下列原則：（1）使用動(dòng)物必須按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)特殊要求，檢驗(yàn)合格，按檢疫要求充分準(zhǔn)備后方可進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。（2）應(yīng)將每只動(dòng)物日攝取總量分批次喂給，以保證動(dòng)物的進(jìn)食量和減少浪費(fèi)。（3）應(yīng)經(jīng)常檢查飲水裝置，及時(shí)補(bǔ)充不足。（4）動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)域應(yīng)每天打掃，保持清潔，每周將地面消毒3次。（5）喂給瓜果、蔬菜等須洗凈消毒。禁止喂給腐爛發(fā)霉不潔的食物，飲水要清潔。（6）對(duì)飼喂動(dòng)物所用的小推車(chē)、食物容器、水容器等用品每周進(jìn)行兩次消毒。(7)室內(nèi)光照，要求明暗各12h自動(dòng)交替（開(kāi)燈12h，關(guān)燈12h）。5、動(dòng)物的檢疫（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入檢疫室：在檢疫室的緩沖間內(nèi)，用75%酒精噴灑動(dòng)物的外包裝進(jìn)行消毒，打開(kāi)紫外燈照射10～15min。（2）將經(jīng)上述處理的動(dòng)物移入檢疫室，根據(jù)要求進(jìn)行檢疫。（3）各動(dòng)物的檢疫期不同，大動(dòng)物為2周，小動(dòng)物為1周。（4）在檢疫期內(nèi)觀察動(dòng)物的精神狀態(tài)、食欲、營(yíng)養(yǎng)狀況、排泄物等，如有任何異常，動(dòng)物不得用于實(shí)驗(yàn)，應(yīng)退出動(dòng)物檢疫室。（5）檢疫合格的動(dòng)物經(jīng)適當(dāng)處理后由緩沖間或物流通道進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。6、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的有關(guān)操作（1）投藥：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，按不同的動(dòng)物，不同途徑給藥。主要包括灌胃和靜脈注射。對(duì)接種了高致病性病原微生物的動(dòng)物，尤其是大動(dòng)物，將動(dòng)物麻醉后方可進(jìn)行灌胃或靜脈注射。小動(dòng)物灌胃或靜脈可根據(jù)情況選擇是否麻醉，靜脈注射時(shí)需使用保定器。（2）采樣：原則上活檢時(shí)應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉。對(duì)接種了病原體的大動(dòng)物進(jìn)行采血或體檢時(shí)，要求將動(dòng)物麻醉。對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行采血時(shí)，可不麻醉動(dòng)物，但要防止動(dòng)物咬抓。（3）標(biāo)本的運(yùn)輸：要求用防滲漏的容器裝標(biāo)本。放入標(biāo)本的容器應(yīng)確保密封。將大、小動(dòng)物標(biāo)本從實(shí)驗(yàn)室傳出應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定程序執(zhí)行。（4）送檢單的填寫(xiě)：送檢單應(yīng)包括送檢目的，送檢物品，送檢單位，送檢人，送檢日期，聯(lián)系方式等內(nèi)容。7、其他的行為規(guī)范要求

（1）物理限制物理限制是指在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中（包括檢查、收集標(biāo)本、給藥、治療或?qū)嶒?yàn)操作等），用手或工具限制動(dòng)物活動(dòng)的過(guò)程。主要原則和要求包括：①限制的工具不能作為常規(guī)的飼養(yǎng)工具。②工具的設(shè)計(jì)應(yīng)合理，不要僅考慮實(shí)驗(yàn)的便利，主要考慮盡量減少動(dòng)物的不適，避免傷害。③盡量減少限制的時(shí)間，以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑榛鶞?zhǔn)。④在限制過(guò)程中，如果發(fā)生損傷或嚴(yán)重的行為改變，應(yīng)暫停或禁止限制，并給與處理或治療。⑤保證實(shí)驗(yàn)人員和周?chē)藛T的安全。（2）手術(shù)操作

①操作一定要使用適當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜、鎮(zhèn)痛或麻醉方法。②禁止不必要的重復(fù)操作。③不提倡利用一個(gè)動(dòng)物進(jìn)行多個(gè)手術(shù)實(shí)驗(yàn)，但是，為充分利用動(dòng)物資源，經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)許可，在可能的條件下可以實(shí)施。④?chē)?yán)格實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，防止發(fā)生血液/體液外濺和刺傷，避免生物污染。⑤手術(shù)后的動(dòng)物、標(biāo)本以及所用器具材料等必須規(guī)定程序妥善處置。（3）飲食的限制

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物原則上要求隨時(shí)飲食，如果一些實(shí)驗(yàn)需要?jiǎng)游锵拗剖澄锘蛩臄z入量，應(yīng)保證動(dòng)物存活所需要的最低需求量。根據(jù)研究的目的，食物的限量應(yīng)經(jīng)過(guò)科學(xué)的論證，其限量的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)容易操作，如正常攝入量的百分比。對(duì)于水分的限量攝入，一定要防止動(dòng)物發(fā)生脫水現(xiàn)象，并保持動(dòng)物的膳食平衡。（4）廢棄物和尸體處理①）血液和體液標(biāo)本的處理：用于抗體、抗原、病原微生物、生化指標(biāo)等檢查的血液和體液，按照要求進(jìn)行處理并檢測(cè)，檢測(cè)后的標(biāo)本經(jīng)121℃，30min高壓滅菌處理。②動(dòng)物組織臟器的處理：動(dòng)物器官組織，尤其是用于病原微生物分離的組織按照標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行處理；用于病理切片的組織，均需經(jīng)過(guò)甲醛固定后再進(jìn)行切片。剩余的組織經(jīng)121℃，30min高壓滅菌處理。③動(dòng)物尸體的處理：安樂(lè)死后的動(dòng)物尸體，取材完畢，經(jīng)121℃，30min高壓滅菌處理后，集中送環(huán)保部門(mén)處理。朊病毒感染動(dòng)物的處理原則參見(jiàn)第八章。動(dòng)物生物安全三級(jí)（animalbiosafetylevel3，ABSL-3）實(shí)驗(yàn)室及以上級(jí)的實(shí)驗(yàn)室的感染動(dòng)物尸體需經(jīng)室內(nèi)和雙扉兩道高壓滅菌，才能移出實(shí)驗(yàn)室。④動(dòng)物咽拭子的處理：用于病原分離和PCR檢測(cè)的咽拭子，按照各自的要求處理后，進(jìn)行病毒分離和PCR檢測(cè)，剩余的標(biāo)本經(jīng)121℃，30min高壓消毒處理。⑤病原分離培養(yǎng)物的處理：病原分離的培養(yǎng)物，不論是陽(yáng)性還是陰性結(jié)果，均需經(jīng)121℃，30min高壓消毒處理。四、各級(jí)動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)原理、設(shè)置要求和安全管理：

（一）一級(jí)動(dòng)物生物安全防護(hù)（ABSL—1）實(shí)驗(yàn)室：（二）二級(jí)動(dòng)物生物安全（ABSL-2）實(shí)驗(yàn)室

（三）三級(jí)動(dòng)物生物安全（ABSL-3）實(shí)驗(yàn)室（四）四級(jí)動(dòng)物生物安全（ABSL-4）實(shí)驗(yàn)室

（一）一級(jí)動(dòng)物生物安全防護(hù)（ABSL—1）實(shí)驗(yàn)室：

適用于檢疫后的大多數(shù)種屬動(dòng)物（靈長(zhǎng)類(lèi)除外），以及專(zhuān)門(mén)接種了危害程度第四類(lèi)的微生物如大、小鼠及金黃地鼠白血病病毒、小鼠乳腺瘤病毒等的動(dòng)物的飼養(yǎng)和操作。設(shè)置要求：實(shí)驗(yàn)室與建筑物中的一般通道不須隔開(kāi),一般在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上操作。防護(hù)設(shè)備：一般不要求專(zhuān)用防護(hù)設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施要求：

1、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建筑應(yīng)便于清潔。2、實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面不透水，耐酸、堿、有機(jī)溶劑、并耐熱。3、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備堅(jiān)固。實(shí)驗(yàn)臺(tái)、柜及設(shè)備之間的空間應(yīng)有適當(dāng)距離便于清潔。4、實(shí)驗(yàn)室區(qū)及動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)應(yīng)設(shè)洗手池。5、如實(shí)驗(yàn)室有可開(kāi)關(guān)的窗子應(yīng)裝上紗窗。6、實(shí)驗(yàn)室空氣直接外排，不得再循環(huán)或回流至其它動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)。一般微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求：

1、實(shí)驗(yàn)人員從事實(shí)驗(yàn)工作，需由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)，并決定限制或禁止其他人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。2、工作面每天消毒一次，并及時(shí)對(duì)濺落活微生物的材料進(jìn)行消毒。3、采用機(jī)械吸液裝置，禁止用嘴吸液。4、在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)禁止飲食、吸煙、處理隱性眼鏡及化妝，食物應(yīng)存放在專(zhuān)用的儲(chǔ)藏柜或冰箱內(nèi)，保存食物的柜子或冰箱應(yīng)放置在實(shí)驗(yàn)區(qū)以外。一般微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的要求：

5、實(shí)驗(yàn)人員在操作活微生物材料及動(dòng)物后，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室之前均應(yīng)洗手。6、所有污染的液體或固體廢棄物在處理前應(yīng)去除污染。感染動(dòng)物尸體需用防漏、有蓋容器運(yùn)出并焚化。7、所有操作均應(yīng)按規(guī)程仔細(xì)小心進(jìn)行，使氣溶膠的產(chǎn)生減至最底限度。8、動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)的門(mén)需能自動(dòng)關(guān)閉，向內(nèi)開(kāi)啟，平時(shí)保持關(guān)閉狀態(tài)。9、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有防昆蟲(chóng)及鼠類(lèi)的措施。

特殊的要求：

1、需告知進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室人員潛在危害，符合特定要求人員方能由負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)進(jìn)入。2、實(shí)驗(yàn)室要制定生物安全手冊(cè)，供需要進(jìn)入的工作人員閱讀并按程序執(zhí)行。3、建議穿長(zhǎng)工作服，以防止污染。動(dòng)物房工作服不能穿到其它實(shí)驗(yàn)區(qū)域。4、需運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室外進(jìn)行消毒處理的污染材料，應(yīng)裝入堅(jiān)固、密閉的容器。5、動(dòng)物用籠架具可用手洗及機(jī)洗。（二）