《茶青中30種農(nóng)藥殘留量測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》征求意見稿

1T/FQIA012—2023茶青中30種農(nóng)藥殘留的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本文件規(guī)定了茶青中30種農(nóng)藥殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本文件適用于茶青中30種農(nóng)藥殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法NY/T2102-2011茶葉抽樣技術(shù)規(guī)范3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理試樣采用乙腈-乙酸溶液提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標法定量。5試劑和材料5.1試劑5.1.1乙腈（CH3CN，CAS號：75-05-8）。5.1.2乙腈（CH3CN，CAS號：75-05-8）：色譜純。5.1.3乙酸（CH3COOH，CSA號：64-19-7）。5.1.4乙酸鈉（CH3COONa，CSA號：127-09-3）。5.1.5無水硫酸鎂（MgSO4，CAS號：7487-88-9）。5.1.6甲酸（HCOOH，CSA號：64-18-6）：色譜純。5.1.7甲酸銨（HCOONH4，CSA號：540-69-2）。5.1.8氯化鈉：(NaCl，CAS號：7647-14-5)。5.1.9除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T6682中規(guī)定的一級水。5.2溶液配制5.2.1乙腈-乙酸溶液(99+1)：量取10mL乙酸和990mL乙腈中，混勻。5.2.2甲酸銨-甲酸水溶液（5mmol/L）：稱取0.3153g甲酸銨，用0.2%甲酸水溶液溶解并稀釋至1000mL，搖勻。5.3標準品30種農(nóng)藥及其代謝物標準品，純度≥95%，參見附錄A。5.4標準溶液配制2T/FQIA012—20235.4.1標準儲備溶液（1000mg/L）：準確稱取約10mg（精確至0.1mg）各農(nóng)藥標準品，用乙腈溶解并定容至10mL，避光-18℃及以下保存，有效期1年。5.4.2混合標準溶液：吸取一定量的農(nóng)藥標準儲備溶液于250mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度?；旌蠘藴嗜芤罕芄?℃~4℃保存，有效期3個月。5.5材料5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：40μm～60μm。5.5.2十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）：40μm～60μm。5.5.3石墨化炭黑（GCB）：40μm～120μm。5.5.4陶瓷均質(zhì)子：2cm（長）×1cm（外徑），或相當者。5.5.5微孔濾膜（有機相）：13mm×0.22μm，或相當者。6儀器和設(shè)備6.1液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。6.2分析天平：感量0.1mg和感量0.01g。6.3離心機：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。6.4氮吹儀。6.5渦旋混合器。7試樣的制備與保存按NY/T2102-2011抽取茶青樣品，將樣品粉碎，混勻，密封，作為試樣；在抽樣和制樣的操作過程中，應防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化；將試樣于-18℃及以下冷凍保存。8分析步驟8.1前處理稱取5.0g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加入20mL乙腈-乙酸溶液（5.2.1加入4g無水硫酸鎂、1g氯化鈉、1.5g乙酸鈉及1顆陶瓷均質(zhì)子（5.5.4），劇烈震蕩5min后，4000r/min離心5min，定量吸取上清液至內(nèi)含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（每毫升提取液使用150mg無水硫酸鎂、55mgPSA、50mgC18和5mgGCB），渦旋混勻1min。4000r/min離心5min，取上清液1mL經(jīng)0.22μm微孔濾膜（5.5.5）過濾后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。8.2測定8.2.1液相色譜參考條件a)色譜柱：C18柱（5μm，150mm×2mm），或相當者；b)流動相：A相為甲酸銨-甲酸水溶液（5.2.2），B相為乙腈（5.1.2），流動相梯度條件見c)流速：0.30mL/min；d)柱溫：40℃;e)進樣量：5μL。8.2.2質(zhì)譜參考條件a)離子源類型：電噴霧離子源；b)掃描方式：正離子和負離子同時掃描；c)電噴霧電壓：正離子3500V，負離子-3500V；d)離子源溫度：325℃;e)霧化氣：45psi；3T/FQIA012—2023f)檢測方式：多反應監(jiān)測：每種農(nóng)藥分別選擇一對定量離子、一對定性離子。每組所有需要檢測離子對按照出峰順序，分時段分別檢測。每種農(nóng)藥的保留時間、定量離子對、定性離子對和離子對質(zhì)譜參數(shù)，參見附錄B.1。表1流動相及其梯度條件流動相A/%流動相B/%031323425263738.2.3基質(zhì)匹配標準工作曲線選擇與被測樣品性質(zhì)相同或相似的空白樣品8.1部分進行前處理，得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取一定量混合標準溶液，用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.002mg/L、0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和0.5mg/L的基質(zhì)匹配標準工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測需要選擇不少于5個濃度點，供液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。以農(nóng)藥定量離子的質(zhì)量色譜圖峰面積為縱坐標，相對應的基質(zhì)匹配工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標，繪制基質(zhì)匹配標準工作標準曲線?；|(zhì)匹配標準工作溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配。8.2.4定性及定量保留時間被測試樣中目標農(nóng)藥色譜峰的保留時間與相應標準色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應在±2.5%之內(nèi)。離子豐度比在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標化合物的質(zhì)譜定量和定性離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標化合物的定性離子和定量離子的相對豐度比與質(zhì)量濃度相當?shù)幕|(zhì)標準溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在目標農(nóng)藥。表2定性時離子豐度比的最大允許偏差>50%>20%～50%>10%～20%±20%±25%±30%±50%本方法的標準物質(zhì)多反應監(jiān)測LC-MS/MS圖參見附錄C。定量外標法定量。8.3試樣溶液的測定將基質(zhì)混合標準工作溶液和試樣溶液依次注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，保留時間和定性離子定性，測得定量離子峰面積，待測樣液中農(nóng)藥的響應值應在儀器檢測的定量測定線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍時應根據(jù)測定濃度進行適當倍數(shù)稀釋后再進行分析。8.4平行試驗按8.1～8.3的規(guī)定對同一試樣進行平行試驗測定。8.5空白試驗4T/FQIA012—2023除不加試樣外，按8.1～8.3的規(guī)定進行平行操作。9結(jié)果計算和表述試樣中各農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分數(shù)X計，單位為毫克每千克（mg/kg），按式（1）計算。X=cV×………………(1)式中：X——樣品中待測組分殘留量，單位為毫克每千克(mg/kg)；c——樣液中待測組分的濃度，單位為微克每毫升(mg/L)；V——定容體積，單位為毫升(mL)；m——稱取試樣量，單位為克（g）。計算結(jié)果應扣除空白值，計算結(jié)果以重復性條件下獲得的2次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字。含量超過1mg/kg時，保留3位有效數(shù)字。10靈敏度、準確度和精密度10.1靈敏度本方法各項目定量限為0.01mg/kg。10.2準確度本方法各項目回收率為60%~120%。10.3精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。5T/FQIA012—2023（資料性）30種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對照索引30種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對照索引見表A.1。表A.130種農(nóng)藥及其代謝物英文中文名稱對照索引表1C9H10ClN5O22C12H15N2O3PS3C6H8ClN5O2S4C7H14N4O35C17H21ClN2O2S6C8H14ClN57C5H10N2O2S8C18H17F3NO49C7H14NO3PS2C5H10NO3PS2C7H8ClN5O2SC16H38O6P2S4C12H15NO3C12H15NO4C12H17NO2C9H17ClN3O3PSC49H77NO13C8H10ClN5O3SC19H18ClN3O4C5H12NO4PSC12H11NO2C10H9ClN4SC14H9ClF2N2O2C9H9N3O2C10H11ClN4C22H17ClF3N3O7C4H8Cl3O4PC21H11ClF6N2O3C9H12ClO4PNitenpyramC11H15ClN4O2C35H44O166T/FQIA012—2023（資料性）30種農(nóng)藥及其代謝物的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)30種農(nóng)藥及其代謝物的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)見表B.1表B.130種農(nóng)藥及其代謝物的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)表式Vm/zm/z1正92正3正54正555正6正7正258正59正4正5正正3正5正正2正8正正5正5正正4正負12正正正8正正正正