萬(wàn)孚rdt瘧疾檢測(cè)課件

瘧疾(malairaPF/PAN)快速檢測(cè)試劑介紹

江蘇省寄生蟲病防治研究所顧亞萍一、瘧疾檢測(cè)方法學(xué)二、萬(wàn)孚瘧疾快速試劑介紹三、本卷須知及異常情況瘧疾相關(guān)檢測(cè)方法顯微鏡鏡檢PCR檢測(cè)儀膠體金檢測(cè)試劑各檢測(cè)方法優(yōu)缺點(diǎn)比較檢測(cè)方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)顯微鏡鏡檢技術(shù)·特異高；·分期，計(jì)數(shù)，區(qū)分蟲種；·1小時(shí)內(nèi)能完成診斷程序·密度低時(shí)易漏檢（惡性瘧）；·費(fèi)時(shí)、費(fèi)力PCR技術(shù)·敏感性和特異性（最高）·能鑒定4種瘧原蟲·產(chǎn)物的污染易致假陽(yáng)性；或操作不當(dāng)易致假陰性;·需特殊設(shè)備，不能用于現(xiàn)場(chǎng)；·費(fèi)時(shí)，成本高RDT·簡(jiǎn)便快速，適用性廣·對(duì)于原蟲密度小于100個(gè)瘧原蟲/μl血樣本，出現(xiàn)漏檢情況。萬(wàn)浮瘧疾〔PF/PAN〕

抗原檢測(cè)試劑介紹原理利用膠體金免疫層析技術(shù)，采用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原。檢測(cè)抗原為瘧原蟲乳酸脫氫酶〔PLDH〕。產(chǎn)品為三線聯(lián)檢卡，可檢測(cè)出瘧原蟲感染和區(qū)分惡性瘧感染。PAN，為泛瘧原蟲，包括了瘧疾4個(gè)型PF，為惡性瘧性能指標(biāo)最低檢出量：100個(gè)瘧原蟲/μl血對(duì)不同原蟲密度的檢測(cè)結(jié)果研究如下：原蟲密度（parasites/μl）數(shù)量陽(yáng)性陰性靈敏度（%）0～1002632311.5100～2002018290.0200～5003735294.6>50030300100操作方法樣本收集用全血來進(jìn)行檢測(cè)。全血收集：采用抗凝管采血，或在采血管里先參加抗凝劑〔抗凝劑種類可為肝素、EDTA、檸檬酸鈉或草酸鉀〕，將采集血樣參加并搖勻備用。指尖、耳垂末梢或靜脈樣本采集后立即使用；檢驗(yàn)步驟

1測(cè)試前仔細(xì)閱讀使用說明書，測(cè)試應(yīng)在室溫下進(jìn)行.

2沿鋁箔袋切口部位撕開，取出試紙卡平放于臺(tái)面上，并做好標(biāo)記。

3將5μl全血參加樣本加樣孔(A孔)中,再往稀釋液加樣孔(B孔)中滴加稀釋液4滴(100～120μl)。4.

15分鐘內(nèi)觀察顯示結(jié)果；30分鐘后顯示的結(jié)果無(wú)臨床意義。結(jié)果判讀本卷須知及異常情況一本卷須知試劑1.本品為一次性體外診斷試劑，過期產(chǎn)品請(qǐng)勿使用；2.如試劑包裝鋁袋破損，枯燥劑變紅，建議不要使用；實(shí)驗(yàn)和保存環(huán)境：1.應(yīng)防止實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過低或過高；2.低溫保存的測(cè)試卡需要恢復(fù)至室溫后再翻開，以免吸潮；3.試劑應(yīng)保存在陰涼枯燥的環(huán)境中；4.不要混合使用來自不同批次的試條/試卡和裂解液。5.當(dāng)瘧原蟲密度很高時(shí)檢測(cè)線很明顯，質(zhì)控線可能變得很弱，為正常結(jié)果。二、異常情況--假陽(yáng)性對(duì)于個(gè)別情況導(dǎo)致的假陽(yáng)性，可能為以下原因引起。1血液樣本為高血脂、高血紅蛋白、高度乳糜血等異常血樣，可能會(huì)引起非特異性吸附，以致出現(xiàn)細(xì)線或假陽(yáng)。2操作時(shí)，加樣后應(yīng)能自然流過膜局部，如樣本在膜部位凝固，易導(dǎo)致誤判假陽(yáng)。3觀察時(shí)間的延長(zhǎng)，導(dǎo)致金標(biāo)物質(zhì)的持續(xù)釋放，過量的抗原抗體造成假陽(yáng)情況。三、異常情況--假陰性1.檢查試劑包裝內(nèi)枯燥劑有無(wú)吸潮，試劑條質(zhì)控線顯色是否正常。2.試劑應(yīng)該保存于4-30℃,如放于冰箱保存，檢測(cè)標(biāo)本和試劑盒應(yīng)復(fù)溫再檢測(cè)。3.如果樣本中抗原含量少，因其反響時(shí)間較長(zhǎng)，判讀時(shí)間最好不要提前，應(yīng)在15min后。4.注意，全血加樣量和滴加稀釋液的量，假設(shè)全血量少，稀釋液多，易導(dǎo)致低濃度陽(yáng)性漏檢。四、異常情況--無(wú)效情況1.運(yùn)輸過程導(dǎo)致包裝破