再生的梵丹超微粉對(duì)2型糖尿病大鼠降糖作用的研究

再生的梵丹超微粉對(duì)2型糖尿病大鼠降糖作用的研究

在2型糖尿病患者（t2lm）中，糖脂代謝紊亂和胰島素抵抗影響，直接或間接影響血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致糖尿病大血管并發(fā)癥。本研究采用給Wistar大鼠ig脂肪乳,輔以尾靜脈快速注射小劑量的鏈脲佐菌素,在短時(shí)間內(nèi)成功的制備了以胰島素抵抗為特征的T2DM合并大血管病變的動(dòng)物模型,系統(tǒng)觀察了菩人丹超微粉干預(yù)4周對(duì)T2DM大鼠血糖(BG)、糖耐量(GT)、糖化血清蛋白(GSP)、血清胰島素(Ins)的影響。1材料表面1.1動(dòng)物SPF級(jí)雄性Wistar大鼠,由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。許可證號(hào)SCXK津2005-0001。1.2免疫試劑:格列酮、市菩人丹超微粉(PRD)河北以嶺藥業(yè)集團(tuán)有限公司;馬來(lái)酸羅格列酮,4mg/片,葛蘭素史克(天津)有限公司,批號(hào)03110001;鏈脲佐菌素(STZ),Sigma公司;胰島素放射免疫試劑盒,九鼎公司;GSP試劑盒,德國(guó)羅氏公司。1.3amma-2c放射免疫流量計(jì)P-MODULAR全自動(dòng)生化分析儀,德國(guó)羅氏公司;DPCR-GAMMA-C2放射免疫計(jì)數(shù)器,九鼎公司;德國(guó)CR411低溫低速大容量離心機(jī),JOUAN公司;ONETouchUItra血糖儀,美國(guó)強(qiáng)生公司;穩(wěn)豪型血糖試紙,強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司。2方法2.1脂肪乳的配制豬油20g,甲基硫氧嘧啶1g,膽固醇8g,谷氨酸鈉1g,蔗糖5g,果糖5g,吐溫-8020mL,丙二醇30mL,加水至100mL,配成脂肪乳。2.2兩組大鼠的血脂指標(biāo)Wistar大鼠,雄性,體重(240±20)g,每日ig自制脂肪乳10mL·kg-1,連續(xù)3周后,眶靜脈取血,離心,放免法檢測(cè)Ins,全自動(dòng)生化儀檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL),尾靜脈取血測(cè)血糖。挑選TC,TG,LDL增高,胰島素敏感指數(shù)下降的大鼠,空腹6h后,尾靜脈ivSTZ30mg·kg-1,1周后取尾靜脈血檢測(cè)血糖高于16.7mmol·L-1的大鼠作為T(mén)2DM模型大鼠。成模大鼠用藥前觀察胸主動(dòng)脈弓病理改變:動(dòng)脈血管電鏡下見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞局部損傷嚴(yán)重;內(nèi)皮細(xì)胞與內(nèi)彈力板連接處空隙增加等,證實(shí)T2DM大血管損傷模型復(fù)制成功。2.3動(dòng)物ig、gsp和血清inT2DM大鼠按血糖結(jié)合體重分層隨機(jī)分為5組:模型組,馬來(lái)酸羅格列酮治療組,PRD高、中、低劑量(3.54,1.77,0.885g·kg-1)治療組,另取10只大鼠為正常對(duì)照組。各組動(dòng)物ig給藥,1次/d,正常對(duì)照組和模型組ig等量自來(lái)水,連續(xù)4周。實(shí)驗(yàn)期間造模各組均連續(xù)給予高脂高熱量飼料。用藥前、用藥后2周、4周分別取尾靜脈血檢測(cè)血糖,4周末股動(dòng)脈取血,離心得血清,檢測(cè)各組大鼠GSP;放射免疫分析法檢測(cè)血清Ins;計(jì)算胰島素敏感指數(shù)(ISI)。2.4統(tǒng)計(jì)方法計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用單因素方差分析,應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。3結(jié)果3.1羅格列酮對(duì)大鼠bg與正常組比較,T2DM模型組大鼠隨機(jī)BG明顯升高(P<0.01)。PRD中劑量及馬來(lái)酸羅格列酮在治療2周末即能極顯著降低T2DM模型大鼠BG(與模型組比較P<0.01)。治療4周末PRD高、中劑量及馬來(lái)酸羅格列酮均能極顯著降低模型大鼠BG(與模型組比較P<0.01),PRD低劑量組的降糖作用亦有顯著性差異(與模型組比較P<0.05)。見(jiàn)表1。3.2prd對(duì)脂肪異常2mm血管損傷大鼠gt的影響3.3prd對(duì)2dm模型大鼠gsp的影響模型組大鼠GSP明顯升高,PRD高、中劑量及馬來(lái)酸羅格列酮均能顯著降低T2DM模型大鼠GSP(P<0.01),PRD低劑量亦能降低T2DM模型大鼠GSP(P<0.05);模型組大鼠INS,ISI明顯降低,PRD高、中劑量及馬來(lái)酸羅格列酮均能顯著升高T2DM模型大鼠INS,增加ISI。見(jiàn)表3。4糖代謝的糖化及糖化糖尿病是由遺傳和環(huán)境多種因素共同作用所引起的一種慢性高血糖狀態(tài),由于胰島β細(xì)胞破壞,胰島素分泌減少,血糖持續(xù)在較高水平,而蛋白質(zhì)在高糖環(huán)境中極易發(fā)生非酶促糖基化,繼而引起一系列病理改變,這是糖尿病慢性并發(fā)癥發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。在人體內(nèi),除了血紅蛋白外,一些半衰期長(zhǎng)的組織蛋白如基底膜、膠原、晶體蛋白質(zhì)也會(huì)發(fā)生糖化作用。血漿白蛋白被糖化后,其分解代謝減弱,但半衰期不變。血漿低密度脂蛋白被糖化后,在體內(nèi)降解速度減慢,在血中堆積,而高密度脂蛋白被糖化后降解加快,使高、低密度脂蛋白的比例下降,即血管內(nèi)脂質(zhì)清除能力減弱,脂質(zhì)沉積因此增加,這是形成糖尿病血管病變的重要原因。GSP是血液中葡萄糖與白蛋白及其他蛋白質(zhì)分子(不含血紅蛋白)N末端的氨基酸上發(fā)生緩慢連續(xù)的非酶促糖化反應(yīng),形成具有酮胺鍵的糖化蛋白,亦稱(chēng)果糖胺,血清白蛋白的半衰期大約為17d左右,故GSP能反映測(cè)定前2周~3周血糖的平均水平[1~2]。GSP不受血紅蛋白變異或其他可促進(jìn)紅細(xì)胞更新因素的影響,評(píng)價(jià)、監(jiān)控糖尿病的療效迅速、靈敏、特異,同時(shí)標(biāo)本不需前處理,血清可直接測(cè)定。近來(lái)許多研究[4~5]表明:餐后高血糖與大血管并發(fā)癥關(guān)系更加密切,并且與心血管事件及其伴隨的病死率之間有獨(dú)立的相互關(guān)系,甚至糖尿病患者在糖耐量減低階段,其大血管病變就已發(fā)生。餐后血糖增高導(dǎo)致蛋白質(zhì)糖基化增加、D-二聚體以及凝血酶原片段向血液循環(huán)中釋放增多,同時(shí)通過(guò)葡萄糖自動(dòng)氧化途徑和多元醇途徑引起自由基的產(chǎn)生增加,進(jìn)而促進(jìn)了動(dòng)脈粥樣硬化的形成。菩人丹超微粉藥物組成:苦瓜(《廣東新語(yǔ)》又稱(chēng)菩達(dá))、人參、丹參、葛根等。針對(duì)T2DM大血管損傷的病機(jī)關(guān)鍵——“虛、瘀、絡(luò)阻”而設(shè),臨床研究證實(shí)其對(duì)糖尿病及其胰島素抵抗并發(fā)的冠心病患者具有確切的治療作用[6~7]。本研究結(jié)果顯示:PRD能降低T2DM模型動(dòng)物的空腹血糖,且降糖作用緩慢而持久;PRD可有效降低餐后血糖,增強(qiáng)糖耐量;降低糖化血清蛋白含量;增高血清胰島素含量,