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百合產(chǎn)地加工技術(shù)研究

中藥百合來(lái)自百合科植物卷丹的rifolium。葉子是麗葉酒。海拔l。g8if。e.布朗非正式爾。細(xì)膩的葉子。性味甘寒,具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺、清心安神之功效。用于陰虛久咳,痰中帶血,虛煩驚悸,失眠多夢(mèng),精神恍惚等癥。中藥材都要經(jīng)過(guò)產(chǎn)地加工和炮制才能入藥,長(zhǎng)期以來(lái),百合的產(chǎn)地加工沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),都是百合產(chǎn)地的藥農(nóng)憑經(jīng)驗(yàn)加工,不同的加工操作者之間差異較大。許多地區(qū)的藥農(nóng)為了使加工的百合藥材外形顏色美觀,加工時(shí)經(jīng)常對(duì)百合進(jìn)行熏硫處理。然而,產(chǎn)地加工又對(duì)百合有效成分影響較大。只有科學(xué)的規(guī)范化的產(chǎn)地加工方法,才能保障藥材的外觀質(zhì)量?jī)?yōu)良和內(nèi)在質(zhì)量穩(wěn)定,達(dá)到《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(試行)》中要求的“保持藥材質(zhì)量穩(wěn)定”,實(shí)現(xiàn)百合生產(chǎn)的“安全、有效、穩(wěn)定、可控”。筆者在湖南省湘西自治州龍山縣開(kāi)展百合規(guī)范種植研究課題時(shí),設(shè)計(jì)了百合不同取材部位、不同燙片時(shí)間、不同干燥方法等產(chǎn)地加工試驗(yàn)研究?jī)?nèi)容,對(duì)商品中藥材百合的主流藥材品種卷丹LiliumlancifoliumThunb.進(jìn)行研究,探討百合產(chǎn)地加工方法對(duì)百合主要成分多糖、總磷脂成分的影響,以期確定百合的最佳產(chǎn)地加工方法,制定百合產(chǎn)地加工的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,從而確保百合產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定和可控。1材料、藥品和機(jī)器1.1村百合種植基地的種植成就藥材來(lái)源于湖南省湘西苗族自治州龍山縣洗洛村百合規(guī)范化種植基地的種源相同、栽培時(shí)間、施肥管理和其他田間管理一致的同一塊試驗(yàn)田。2003年8月1日采收,去除莖葉和須根。1.2中片、混片、百合混片制備取同一塊試驗(yàn)田的新鮮鱗莖,分別剝?nèi)⊥馄?上年種莖的鱗葉)、心片(鱗莖中央抱合緊密的5~6枚鱗葉)、中片(去除外片,心片部分后的鱗葉)、混片(鱗莖上所有的鱗葉),洗凈,沸水中燙煮11min,澇出冷水漂凈,曬干。另取百合混片分別燙煮7、9、11、13、15min,撈出冷水漂凈,曬干。熏硫干燥法取鮮百合混片在燙煮11min后,撈出冷水漂凈,熏硫24h,然后曬干。烘干干燥法取鮮百合混片在60℃直接烘干。1.3fa/ja電儀器:UV-1600紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京瑞利公司);TP3000超聲波提取器(天鵬電子新科技有限公司);FA/JA電子天平(上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司);TD4臺(tái)式自動(dòng)平衡離心機(jī)(長(zhǎng)沙平凡儀表有限公司);DK-600型電熱恒溫水浴槽(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。藥品:葡萄糖對(duì)照品由美國(guó)Sigma公司提供,硫酸、苯酚、鉬酸銨、抗壞血酸等均為分析純。2實(shí)驗(yàn)方法2.1百合多糖的提取(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密稱取葡萄糖對(duì)照品(105℃烘干至恒重)60mg,溶解并定容至100ml,為葡萄糖對(duì)照儲(chǔ)備液、含有葡萄糖0.6mg/ml。再精密吸取葡萄糖對(duì)照儲(chǔ)備液0、0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、3.5ml,分別置于25ml容量瓶中定容搖勻,精密吸取2ml各濃度溶液,加入1ml4%苯酚混勻,迅速加入7ml濃硫酸,混勻,40℃水浴30min,冰水浴5min,以第1份為空白,490nm處測(cè)其吸光度,以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得出回歸方程為Y=0.0128+0.5001x,r=0.9996。線性范圍為0.012~0.084mg/ml。(2)多糖的提取:精密稱取60℃烘干4h的百合粉(過(guò)40目)1.000g,精密加水100ml,稱重,超聲波提取40min,稱重,水補(bǔ)足減失重量,棉花過(guò)濾,取濾液2ml,小心加入95%乙醇10ml攪拌,3000r/min,離心10min,水溶解沉淀并轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中,定容搖勻,為樣品制備液。(3)樣品的含量測(cè)定:從樣品液中精密吸取2ml,加入1ml4%苯酚混勻,同標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作,測(cè)定百合樣品的吸光度值,計(jì)算百合樣品液濃度。多糖含量(%,以葡萄糖計(jì))=(百合樣品液濃度×50×25×10-3/樣品重)×100%2.2磷酸鹽磷酸檢測(cè)(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:將磷酸二氫鉀105℃烘干至恒重,干燥器內(nèi)冷卻至室溫,精密稱取,配置成含磷0.01mg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液,備用。精密吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml于不同試管中,加入0.25ml消化液,電爐上消化至顏色由棕黑變?yōu)闊o(wú)色透明,冷卻,轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中,磷顯色劑(3mol/L硫酸-水-2.5%鉬酸銨-10%抗壞血酸=1:5:1:1,按序配置當(dāng)天使用)定容,搖勻,65℃水浴10min,冷卻至室溫,以標(biāo)0為空白,700nm處測(cè)定磷脂磷酸的吸光度。以磷濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),自由度為6,p<0.05,有相關(guān)性,用最小二乘法求出回歸方程,即Y=-2.24×10-3x+0.3276r=0.9986,x為含磷濃度,Y為吸光度,線性范圍為0.04~0.32×10-3mg/ml。(2)樣品的提取:精密稱取百合粉5.000g,精密加入Folch試劑(氯仿:甲醇=2:1)50ml,蓋塞稱重,超聲波提取40min,補(bǔ)足減少溶劑,迅速過(guò)濾,密閉,冰箱保存,為樣品制備液。(3)樣品的含量測(cè)定(采用鉬藍(lán)比色法):精密吸取百合樣品液2.5ml,水浴揮干,加入0.5ml消化液,同標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作測(cè)定百合樣品的磷脂磷酸濃度。百合樣品的總磷脂含量(mg/100g)=(mg/ml×25ml×40×25×10)/5.000,其中25為磷脂轉(zhuǎn)化系數(shù)。3結(jié)果與分析3.1結(jié)果經(jīng)過(guò)計(jì)算,百合各藥材樣品中有效成分百合多糖和總磷脂含量見(jiàn)表1。3.2百合干燥和燙片時(shí)間的確定(1)從表1中的樣品編號(hào)1、2、3、8可以看出,在百合剝片處理時(shí),不同取材部位的百合鱗葉,其有效成分百合多糖和總磷脂含量存在差異,其中百合多糖含量為中片>外片>混片>心片,以中片含量最高,心片含量最低;百合總磷脂含量為心片>混片>中片>外片,以心片含量最高,外片含量最低。因此百合產(chǎn)地加工時(shí),應(yīng)將外片、中片、心片分開(kāi)盛放,便于燙片加工時(shí)能準(zhǔn)確地把握燙片的時(shí)間,也便于臨床處方用藥時(shí)的準(zhǔn)確定量和制藥企業(yè)的準(zhǔn)確投料。(2)熏硫干燥法在中藥材百合傳統(tǒng)加工時(shí)經(jīng)常使用,熏硫后的百合容易干燥,折干率高,藥材的外觀顏色潔白如玉,晶瑩透明,同時(shí)熏硫可以殺菌、防霉,便于百合藥材的貯藏。從表1中的樣品編號(hào)4和8反映出產(chǎn)地加工時(shí)熏硫與否雖然對(duì)百合多糖的含量沒(méi)有太大影響,但是對(duì)百合總磷脂的含量影響較大,熏硫后百合總磷脂含量明顯降低。另外,熏硫后的百合藥材中殘留有大量的硫化物,使藥材的毒性增大,且熏硫加工過(guò)程中對(duì)環(huán)境造成一定程度的污染。因此為了確保百合藥材的內(nèi)在品質(zhì)和臨床用藥的安全,百合產(chǎn)地加工時(shí)應(yīng)徹底改變傳統(tǒng)的熏硫干燥法,生產(chǎn)“綠色”百合藥材產(chǎn)品。(3)藥材樣品5采用烘箱烘烤百合新鮮鱗片,此法對(duì)百合多糖和總磷脂含量沒(méi)有多大影響,百合多糖和總磷脂含量和曬干法相當(dāng),同時(shí)該方法具有干燥時(shí)間短,省時(shí)省力和不受采收季節(jié)天氣陰雨的影響等優(yōu)點(diǎn),但由于烘烤過(guò)程發(fā)生梅拉德反應(yīng),百合干燥后顏色變成深褐色,外觀性狀較差,而且烘干干燥法設(shè)備投資大,加工成本高。故百合藥材干燥時(shí)不宜采用此方法進(jìn)行干燥。(4)百合產(chǎn)地加工過(guò)程中,如何把握好燙片時(shí)間的長(zhǎng)短,是百合產(chǎn)地加工過(guò)程中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)。燙片時(shí)間過(guò)短,百合顏色呈現(xiàn)褐色,外觀顏色較差;燙片時(shí)間過(guò)長(zhǎng),百合的鱗片易破碎,不成片形,外觀性狀較差。同時(shí),表1中的樣品編號(hào)6、7、8、9和10反映出燙片時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)百合多

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