藥物分析第七版期末考試重點

藥物分析概況藥典基本結(jié)構(gòu)凡例正文附錄索引（中英文）凡例解釋和正確使用CHP進行質(zhì)量檢定的基本原則，并對有關(guān)共性問題進行規(guī)定名稱及編排項目與要求檢驗方法和限度標(biāo)準(zhǔn)品、對照品用于鑒別、檢查和含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。不包括色譜用的內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品：是指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按效價單位或ug計。對照品：除另有規(guī)定外，均按干燥品或無水物計算后使用。計量法定計量單位精確度取樣量的準(zhǔn)確度和實驗精密度精密稱定：準(zhǔn)確至所取重量的千分之一稱定：準(zhǔn)確至所取重量的百分之一取用量約若干：指該量不得超過規(guī)定量的正負(fù)10%。精密量取：量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合該體積移液管的精密度要求稱?。焊鶕?jù)數(shù)據(jù)的有效數(shù)位確定分別稱?。?g2.0g2.00g則可稱：1.5-2.0g1.95-2.05g1.995g-2.005g量取：用兩桶或按照量取體積的有效數(shù)位選用量具恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下的重量。按干燥品計算：除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥的供試品進行試驗，測得干燥失重后，再在計算式從取用量中扣除空白試驗：不加供試品或以等量溶劑替代供試液，同法操作所得結(jié)果。藥物的鑒別試驗?zāi)康模喉椖浚?.性狀外觀溶解度物理常數(shù)（熔點m.p，比旋度：在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度吸收系數(shù)：在給定的波長，溶劑溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度，單位液層厚度時的吸收度）2.一般鑒別試驗（generalidentificationtestGIT）根據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或物化性質(zhì)，通過化學(xué)反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)?。只能證實藥物的類別，不能證實是哪一種藥物，區(qū)別不同類別的藥物。僅適用于確認(rèn)單一的化學(xué)藥物。3.專屬鑒別試驗(SPECIFICIDENTIFICATIONTEST,SIT)在git的基礎(chǔ)上進行，根絕每一種藥物在化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上的特殊性差異，采用更靈敏、選擇性更強的反應(yīng)，進一步鑒別藥物的真?zhèn)巍^(qū)別同類藥物。方法驗證：化學(xué)法，光譜法，色譜法，生物學(xué)法最低檢出量：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定反應(yīng)條件下，能觀測除反應(yīng)結(jié)果所需的供試品的最小量?？瞻自囼灒合噭┖推髅罂赡軒淼挠绊憣`敏度很高的鑒別試驗，很重要提高反應(yīng)靈敏度的方法：消除干擾改進觀測方法加入少量與水互不相容的有機溶劑，顏色加深，易觀察藥物的雜質(zhì)檢查第一節(jié)、雜質(zhì)來源：①生產(chǎn)過程中引入（合成藥，藥物制劑的生產(chǎn)過程中，引入溶劑、酸堿性試劑、催化劑，從金屬工具中引入金屬雜質(zhì)，引入低效無效的藥物異構(gòu)體或晶型）②貯藏過程中引入，（保存不善或貯藏時間過長，微生物作用，外界條件影響導(dǎo)致水解、氧化、霉變、異構(gòu)化、晶型改變）雜質(zhì)限量：含義，在不影響藥物的療效和不產(chǎn)生毒性的情況下，藥物中可允許的咋質(zhì)量。即藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量。雜質(zhì)限量檢查：不要求測定雜質(zhì)的含量，只需檢查雜質(zhì)是否超過限量。方法：①對照法：去一定量被檢雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液與一定量供試品在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果。特點：注意平行操作，不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量雜質(zhì)限量=（雜質(zhì)最大允許量/供試品量）*100%=【（標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度*標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積）/供試品量】*100%②靈敏度控制法，在供試品溶液中鍵入試劑，一定條件下反應(yīng)后，觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)。以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格。特點：不需對照品。③比較法：取供試品一定量依法檢查，測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)（如吸光度）與規(guī)定的限量進行比較，不得更大一般雜質(zhì)的檢查方法，化物檢查法原理方法1、反應(yīng)試劑：AGNO3試液，2、標(biāo)準(zhǔn)溶液：標(biāo)準(zhǔn)NACL溶液，每1ml相當(dāng)于10ug的cl-適宜比濁濃度：50-80ugcl-/ml原理氯化物AGNO3硫酸鹽Bacl2鐵鹽SCN-重金屬硫代硫酸鈉砷鹽古蔡式法zn+hcl產(chǎn)生H2,+AsSO33-生成ASH3熾濁殘渣硫酸灰分殘留溶劑加入過硫酸鈉的作用，將fe2+氧化成fe3+,防止光纖將硫氰酸鐵離子還原或分解藥物定量分析與分析方法驗證藥物定量分析方法：容量分析法二、光譜分析法三、色譜分析法一、容量分析法1.關(guān)鍵：準(zhǔn)確地確定等當(dāng)點（滴定液與被測藥物完全作用，反應(yīng)達到化學(xué)計量點即等當(dāng)點）2.滴定誤差：滴定終點與等當(dāng)點之間的誤差3.特點簡便，快速，精密、準(zhǔn)確專屬性、靈敏度差常用于化學(xué)原料藥的含測滴定度T：每ml規(guī)定濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的質(zhì)量（mg)aA+bB?cCT=m×(a/b)×M（mg/ml）百分含量計算直接滴定：含量%=生成物滴定法：剩余滴定（做空白實驗）：先加入定量過量的滴定液A,當(dāng)與被測藥物反應(yīng)完全后,再用另一滴定液B回滴剩余的滴定液A含量%=：空白試驗消耗滴定液B的體積：樣品測定消耗滴定液B的體積二、光譜分析法（一）UV-Vis分光光度法1.Lambert-Beer定律A=CL：百分吸收系數(shù)2.特點：較靈敏、較準(zhǔn)確；專屬性差3．儀器校正和檢定波長校正：儀器使用前校正雜散光的檢查吸收度準(zhǔn)確度的檢定：用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定對溶劑的要求：截止波長，純度溶劑在所選波長附近的吸收度應(yīng)不超過一定值?？諝鉃榭瞻?．測定核對檢測波長:供試品的實際吸收峰波長是否與藥典給出的波長一致(±2nm)如果不一致，可能與試樣的真?zhèn)巍⒓兌燃皟x器波長的準(zhǔn)確度有關(guān).以配制供試品溶液的同批溶劑為空白供試品溶液：吸收度0.3-0.7；溶質(zhì)沒有離解、聚合等選擇合適的定量方法測定對照品比較法比色法吸收系數(shù)法計算分光光度法（二）熒光分析法1．特點:靈敏度高于UV;熒光淬滅；干擾多應(yīng)在低濃度溶液中進行高濃度：產(chǎn)生內(nèi)濾光效應(yīng)和自吸收現(xiàn)象線性偏離內(nèi)濾光效應(yīng)：溶液中存在能吸收激發(fā)光和熒光的物質(zhì)，使熒光強度減少?？瞻自囼炁懦蓴_溶劑純度，溶液中的微粒、溶氧、pH、溫度、光照等校正儀器靈敏度：供試品對激發(fā)光穩(wěn)定：用待測物的對照品溶液校正供試品對激發(fā)光不穩(wěn)定：采用激發(fā)、發(fā)射光譜與供試品近似且穩(wěn)定的物質(zhì)校正藍(lán)色熒光---硫酸奎寧的稀硫酸溶液黃綠色熒光---熒光素鈉水溶液紅色熒光---羅丹明B水溶液2．含量測定對照法：熒光強度與藥物濃度線性關(guān)系良好時用Cx=×Cr標(biāo)準(zhǔn)曲線法：熒光強度與濃度明顯偏離線性時用三、色譜分析法特點：高效，快速，高靈敏度，高專屬性1．HPLC法最常用固定相：octadecylsilane-bondedsilicagel十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS或C18）流動相及其pH：RP-HPLC首選甲醇-水，乙腈-水pH2-8(以硅膠為基質(zhì)的鍵合固定相）柱溫、檢測器：室溫、紫外檢測器固定相種類、流動相組分和檢測器類型不得任意改變外系統(tǒng)適用性試驗色譜柱的理論塔板數(shù)色譜峰的分離度色譜系統(tǒng)的重復(fù)性色譜峰的拖尾因子藥物分析中常用的HPLC定量方法：內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)校正曲線法內(nèi)標(biāo)一點法：對照法內(nèi)標(biāo)校正因子法外標(biāo)法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法外標(biāo)一點法：對照法氣相色譜法藥品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的色譜條件除固定液品種、檢測器類型及特殊指定的色譜柱材料不得任意改變外藥物分析方法的驗證：根據(jù)分析項目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗證內(nèi)容，并通過設(shè)計合理的試驗來驗證所建立的分析方法是否科學(xué)、合理。保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需驗證的分析項目：鑒別試驗雜質(zhì)限度或定量檢查原料藥或制劑中有效成分的含量測定制劑中其它成分的含量測定含量均勻度、溶出度、釋放度測定方法驗證內(nèi)容：準(zhǔn)確度精密度專屬性檢測限定量限線性范圍耐用性準(zhǔn)確度accuracy含義：測定結(jié)果與真實值的接近程度表示：回收率試驗樣品：原料的含測：藥物的對照品制劑的含測：處方量的空白輔料+藥物的對照品已經(jīng)測得含量的制劑+藥物的對照品雜質(zhì)定量：已經(jīng)測得雜質(zhì)含量的原料藥或制劑+雜質(zhì)對照品溶出度測定：空白溶出介質(zhì)+藥物的對照品二．精密度precision含義：指在規(guī)定的測試條件下，對同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定，所得結(jié)果之間的接近程度。表示：標(biāo)準(zhǔn)偏差SD相對標(biāo)準(zhǔn)偏差relativestandarddeviationRSD試驗樣品：供試品試驗內(nèi)容：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性三．專屬性specificity（選擇性selectivity）含義：有其他成分（如雜質(zhì)、輔料等）存在時，分析方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性，即分析方法排除各種干擾的能力。表示：對鑒別試驗：不含被測物的供試品，應(yīng)呈負(fù)反應(yīng)對雜質(zhì)檢查和含量測定：被測物應(yīng)能與其它成分分離給出代表性圖譜，說明專屬性四．檢測限limitofdetection,LOD含義：指供試品中被測物能被測定出的最低濃度或量。反映分析方是否具有靈敏的檢測能力，沒有定量意義。試驗樣品：處方量的空白輔料+藥物的對照品（對藥物制劑）藥物的對照品（對原料藥）測定方法：（1）目視法，標(biāo)準(zhǔn)偏差法（2）信噪比法：適用于能顯示信號和基線噪音強度的儀器分析方法LOD為S/N=3時的對應(yīng)濃度或注入儀器的量檢測限驗證：濃度等于檢測限的實際樣品，進行分析，測試圖譜五．定量限limitofquantitation,LOQ含義：指供試品中被測物能被定量測定的最低濃度或量測定結(jié)果應(yīng)有一定準(zhǔn)確度和精密度反映了分析方法定量測定的靈敏度試驗樣品：處方量的空白輔料+藥物的對照品（對藥物制劑）藥物的對照品（對原料藥）信噪比法測定：S/N=10時，被測物濃度或注入儀器的量定量限驗證：測試圖譜，測試結(jié)果的準(zhǔn)確度、精密度六．線性linearity含義：在設(shè)計的“范圍”內(nèi)，測試結(jié)果與樣品中待測物濃度或量直接呈正比關(guān)系的程度。試驗樣品：被測物的對照品數(shù)據(jù)要求：回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖,至少5個點，相關(guān)系數(shù)大于0.999七.范圍range含義：達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，分析方法適用的高、低限濃度或量的區(qū)間。常見規(guī)定范圍：原料和制劑的含測：測試濃度的80%～120%制劑含量均勻度測定：測試濃度的70%～130%溶出度或釋放度測定：限度值的±20%雜質(zhì)的含測：規(guī)定限度的±20%試驗樣品：供試品八．耐用性robustness含義：當(dāng)測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。試驗樣品：供試品常見變動條件：供試品溶液的穩(wěn)定性樣品制備方法HPLC中流動相組成的比例，pH，流速色譜柱的廠牌、批號，柱溫等GC：色譜柱的廠牌、批號，固定液和載體的類型，柱溫等。第五章體內(nèi)藥物分析概述體內(nèi)藥物分析的特點體內(nèi)樣品的特點待測物濃度低、游離/結(jié)合物；干擾物多；樣品數(shù)多、量小。體內(nèi)藥物分析的特點體內(nèi)樣品需要分離、濃集；分析方法需專屬、靈敏；分析工作量大、復(fù)雜1．血樣常用穩(wěn)定劑：酶抑制劑（NaF、三氯醋酸）抗氧劑2．尿樣測定尿藥濃度的目的：藥物劑量回收，藥物清除率，藥物代謝和生物利用度尿樣特點：藥物濃度較大但易變，體積大采樣：常用時間尿保存：立即測定；4℃保存；放置較長時間需冷凍；加入防腐劑：甲苯，氯仿，醋酸等（二）常用預(yù)處理方法1、體內(nèi)樣品中蛋白質(zhì)的去除（1）目的：去除蛋白質(zhì)，釋放結(jié)合型藥物或代謝物，便于測定總濃度；預(yù)防提取過程中蛋白質(zhì)發(fā)泡，減少乳化的形成；保護儀器性能。（2）方法：蛋白質(zhì)沉淀法與水相混溶的有機溶劑：乙腈，甲醇，丙酮，THF中性鹽：飽和硫酸銨，硫酸鈉，磷酸鈉，NaCl，枸櫞酸鹽強酸：10%三氯醋酸，6%高氯酸熱凝固法：可將熱變性蛋白質(zhì)除去酶解法適用于與蛋白質(zhì)結(jié)合牢固及遇酸或遇熱不穩(wěn)定的藥物常用蛋白水解酶中的枯草菌溶素（細(xì)菌性堿性蛋白分解酶）2、體內(nèi)樣品中綴合物的水解綴合物（conjugate)：藥物或代謝物與內(nèi)源性物質(zhì)（葡萄糖醛酸，硫酸等）結(jié)合生成的產(chǎn)物;極性大.（1）目的：使綴合物中的藥物或代謝物游離，便于用有機溶劑提取測定尿液中藥物的總量3、體內(nèi)樣品中藥物或代謝物的分離定量分析方法的建立與驗證分析方法的選擇：首選色譜法色譜條件選擇及優(yōu)化量方法的選擇：首選內(nèi)標(biāo)法建立體內(nèi)藥物分析方法的基本步驟1．色譜條件的初步選擇2.空白生物基質(zhì)試驗——方法特異性 3．模擬體內(nèi)樣品試驗——方法效能指標(biāo) 4．實際體內(nèi)樣品測試——方法特異性體內(nèi)定量分析方法的驗證：專屬性準(zhǔn)確度精密度定量限（定量下限）標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍提取回收率樣品穩(wěn)定性質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：是用以檢測藥品質(zhì)量是否達到用藥要求所作的技術(shù)規(guī)定。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的分類：國家藥品標(biāo)準(zhǔn)1中華人民共和國藥典（療效確切生產(chǎn)成熟產(chǎn)品穩(wěn)定）2局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)3進口藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)4臨床試驗用藥品標(biāo)準(zhǔn)5監(jiān)測期藥品標(biāo)準(zhǔn)企業(yè)藥品標(biāo)準(zhǔn)3.鑒別藥典常用的鑒別方法：（1）化學(xué)法優(yōu)點：操作簡便、快速、成本低，應(yīng)用廣，缺點：專屬性差（2）儀器分析法UV、IR、TLC、HPLC、GC、PC（3）理化常數(shù)測定法4、檢查常用測定方法及其特點：(1)重量分析法原料準(zhǔn)確度高、精密度好靈敏度和專屬性差，操作復(fù)雜分析法原料準(zhǔn)確度高、精密度好靈敏度和專屬性差(3)分光光度法：原料、單方制劑的含測；含量均勻度、溶出度UV法熒光法：靈敏度、專屬性優(yōu)于UV(4)色譜法原料、制劑HPLC：準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度均較好，專屬性強常選色譜柱：ODS，硅膠，氨基鍵合硅膠柱首選檢測器：Vis-UVGC：常選固定液：SE-30、OV-17、OV-101、SE-54、PEG-20M首選檢測器：FID6．貯藏藥品穩(wěn)定性試驗的分類及目的：影響因素試驗除去包裝，高溫、高濕度、強光照射、其他破壞等試驗主要目的：研究藥物的固有穩(wěn)定性及其影響因素，為貯藏條件提供依據(jù)。(2)加速試驗：40oC，75%相對濕度上市藥品包裝目的：未進行室溫或一般條件下長期穩(wěn)定性試驗前，預(yù)測藥物的穩(wěn)定性，保證臨床研究或試生產(chǎn)期間的藥品質(zhì)量；為制劑設(shè)計、包裝、貯藏等提供必要資料。(3)長期試驗：25oC，60%相對濕度上市藥品包裝，目的：考察藥品的有效期（4）配伍穩(wěn)定性試驗：制劑的穩(wěn)定性試驗有時考察第七章藥物制劑分析1.藥物制劑分析的特點1）鑒別特點?可采用原料的鑒別方法。?當(dāng)輔料干擾主藥的鑒別時，不能直接采用。先去除輔料或改用具有分離能力的方法。2）檢查特點雜質(zhì)檢查?項目可能不同。不需重復(fù)原料藥的項目，而檢查在制劑制備和貯藏過程中可能引入的雜質(zhì)。?限量要求不同。劑型常規(guī)檢查保證均一性、安全性、有效性3）含量測定特點測定方法可能不同化學(xué)原料注重精密度；制劑注重選擇性和靈敏度。結(jié)果表示不同原料多用百分含量，制劑多用標(biāo)示量。含量合格要求不同溶出度dissolutionrate:系指藥物從片劑、膠囊劑等制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度溶出度試驗dissolutiontest:測定藥物制劑溶出度的過程，是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中崩解和溶出的體外試驗方法。Noyes-Whitney方程影響藥物溶出的主要因素1藥物粒子大小藥物的理化性質(zhì)溶解度、水合狀態(tài)、晶型等制劑處方和工藝3.藥物制劑的含量均勻度檢查含量均勻度：系指小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每片（個）含量符合標(biāo)示量的程度。檢查目的：控制小劑量或單劑量制劑中藥物含量的均勻程度，保證給藥劑量的準(zhǔn)確性。片劑分析常規(guī)檢查：重量差異崩解時限糖類的干擾及其排除（排除：過濾、改用弱氧化劑硫酸亞鐵片劑：鈰量法；原料：高錳酸鉀法）硬脂酸鎂的干擾及其排除（掩蔽法：酒石酸、草酸等掩蔽。提取分離法：有機溶劑提取藥物UV法：硬脂酸鎂無UV吸收）注射劑分析常規(guī)檢查：裝量滲透摩爾濃度裝量差異可見異物不溶性微粒無菌熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素抗氧劑的干擾及其排除避開VitC的最大吸收波長，可排除其對藥物UV測定法的干擾。加掩蔽劑丙酮或甲醛加酸使抗氧劑分解加弱氧化劑氧化溶劑油的干擾及其排除有機溶劑稀釋法有機溶劑提取法柱色譜法第八章羧酸及其酯類藥物的分析結(jié)構(gòu)與性質(zhì)羧基---酸性-OH、-OCOCH3：鄰位致活基團酸性增強鄰位-OH:分子內(nèi)氫鍵酸性增強酸性大小水楊酸＞阿司匹林＞苯甲酸＞HAc＞H2CO3＞苯酚酯基---水解性酸性介質(zhì):不可能全部水解過量堿(氫氧化鈉和碳酸鈉)存在，可水解完全3）官能團反應(yīng)特性含酚羥基、潛在酚羥基的水楊酸類與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色含芳伯氨基、潛在芳伯氨基重氮化反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng)含硫的丙磺舒分解生成硫化物阿司匹林鑒定水解反應(yīng)與三氯化鐵反應(yīng)含酚羥基或潛在酚羥基的藥物,在中性或弱酸性條件下,可與FeCl3試液反應(yīng),生成類似紫色(紫色,紫堇色,紫紅色)的配位化合物. 丙磺舒鈉鹽在pH5.0~6.0水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀重氮化-偶合反應(yīng)分解反應(yīng)丙磺舒特殊雜質(zhì)：乙酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯,一定量阿司匹林在碳酸鈉試液中溶解應(yīng)澄清。游離水楊酸水楊酸可直接與高鐵鹽反應(yīng)呈色HPLC法阿司匹林含量測定酸堿滴定法UV法HPLC法氯貝丁酯的鑒別異羥肟酸鐵反應(yīng)KOHFe3+紫色卡托普利的鑒別酰化反應(yīng)HNO2紅色酮洛芬的鑒別縮合反應(yīng)酮洛芬+二硝基苯肼偶氮化合物(橙色）第九章巴比妥類藥物的分析環(huán)狀丙二酰脲母核：共性部分—與其它類藥物區(qū)別取代基：特性部分—區(qū)別各巴比妥類藥物 巴比妥苯巴比妥理化性質(zhì)1.弱酸性2.與重金屬離子的反應(yīng)3.紫外吸收光譜特征4.官能團反應(yīng)特性1.弱酸性酰亞胺基上的氫受鄰位羰基的影響，可以發(fā)生1,3-質(zhì)子遷移，由酮式變?yōu)橄〈际健H10的堿性溶液：5，5-二取代和1，5，5-三取代藥物均發(fā)生一級電離pH13的強堿性溶液(0.1mol/LNaOH）：5，5-二取代藥物發(fā)生二級電離，共軛結(jié)構(gòu)延長，最大吸收峰在255nm;鑒別試驗一）丙二酰脲類鑒別反應(yīng)一般鑒別反應(yīng),銀鹽反應(yīng)的方法,銅鹽反應(yīng)的方法利用不飽和取代基的鑒別試驗--司可巴比妥鈉與碘或溴試液的加成反應(yīng)：碘試液或溴試液褪色,與KMnO4的氧化還原反應(yīng)：堿性溶液中，巴比妥類藥物將紫色的KMnO4,還原成棕色的MnO2利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗--苯巴比妥硝化反應(yīng)含芳香取代基的巴比妥類+KNO3+H2SO4黃色硝基化合物與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng)苯巴比妥+硫酸-亞硝酸鈉，橙黃色產(chǎn)物，隨即變?yōu)槌燃t色。與甲醛-硫酸的反應(yīng)苯巴比妥+甲醛-硫酸玫瑰紅色產(chǎn)物含量測定銀量法原理巴比妥類藥物與硝酸銀定量反應(yīng)生成溶于水的一銀鹽。反應(yīng)比為1：1稍過量的銀離子與藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，溶液變混濁，指示滴定終點。以銀-玻璃電極電位法指示終點，準(zhǔn)確。溴量法定量反應(yīng)+Br2剩余滴定+KI置換滴定+硫代硫酸鈉+淀粉第十章芳胺類藥物的分析對氨基苯甲酸酯類藥物基本結(jié)構(gòu):芳酰胺類藥物基本結(jié)構(gòu)共性：芳酰氨基理化性質(zhì)：芳伯氨基特性、水解后顯芳伯氨基特，重氮化-偶合反應(yīng)，與芳醛縮合形成Schiff堿的反應(yīng)Schiff堿：伯胺和醛、酮反應(yīng)生成的化合物ArCHO+H2N-R→ArCH=NR+H2O氧化變色三．鑒別試驗（一）重氮化-偶合反應(yīng)鹽酸丁卡因酸性溶液中，與亞硝酸鈉反應(yīng)N-亞硝基化合物的乳白色沉淀鹽酸普魯卡因重金屬離子與銅和鈷離子的反應(yīng)，Na2CO3試液中：（ChP)鹽酸利多卡因+CuSO4→藍(lán)紫色配位化合物→轉(zhuǎn)入氯仿中呈黃色鹽酸酸性溶液中：（USP)，鹽酸利多卡因+CoCl2→亮綠色鈷鹽三氯化鐵反應(yīng)亞硝酸鈉滴定法1.原理Ar-NH2+NaNO2+2HCl→Ar-N2+Cl-+NaCl+2H2O(定量）2.測定條件1）加入適量KBr，加快反應(yīng)速度2）酸的種類和用量HCL3）反應(yīng)溫度室溫4）滴定速度滴定終點：常用指示劑：KI-淀粉糊劑或指示液缺點：易混淆終點：未達終點時，KI在滴定液的強酸性條件下被空氣中的氧氧化析出碘，與淀粉顯藍(lán)色，多次外試損失樣品第十一章苯乙胺類藥物的分析（一）基本結(jié)構(gòu)酚羥基特性：與Fe3+等重金屬離子配合呈色，易氧化呈色芳環(huán)側(cè)連的氨基醇結(jié)構(gòu)：雙縮脲反應(yīng)在強堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物的反應(yīng)脂肪伯氨基：與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)含酚羥基的本類藥物，易被氧化劑氧化氧化劑：碘過氧化氫鐵氰化鉀三．特殊雜質(zhì)檢查酮體在310nm波長處有最大吸收第十二章甾體激素類藥物的分析基本結(jié)構(gòu)均含環(huán)戊烷并多氫菲母核甾體化合物取代基構(gòu)型的確定甾體分子的4個環(huán)處于同一均等平面若將18-，19-位的角甲基置于平面之上，則：伸在平面之上的氫原子或取代基為β構(gòu)型（實線表示）處于平面之下的氫原子或取代基為α構(gòu)型（虛線表示）第二節(jié)鑒別試驗（一）官能團反應(yīng)1．C17-α-醇酮基的呈色反應(yīng)鑒別腎上腺皮質(zhì)激素：α-醇酮基：強還原性，能與氧化劑反應(yīng)堿性酒石酸酮試液：深藍(lán)色的溶液（Cu2+）→Cu2O↓(紅色)氨制硝酸銀試液：產(chǎn)生Ag↓四氮唑試液：產(chǎn)生有色的甲替2．酚羥基的呈色反應(yīng)鑒別雌激素類：與重氮苯磺酸反應(yīng)生成紅色染料3．炔基的沉淀反應(yīng)鑒別含乙炔基的甾體激素和硝酸銀試液反應(yīng)，生成白色炔銀沉淀。4.甲基酮的呈色反應(yīng)鑒別孕激素類含CH3CO-的甾體激素類可與亞硝基鐵氰化鈉、間二硝基酚和芳香醛反應(yīng)呈色。黃體酮+Na2[Fe(CN)5(NO)]→藍(lán)紫色產(chǎn)物（靈敏、專屬）5．酮基的呈色反應(yīng)與羰基試劑反應(yīng)，形成黃色的腙2，4-二硝基苯肼硫酸苯肼異煙肼6.有機鹵素三．比色法含量測定方法四氮唑比色法腎上腺皮質(zhì)激素類的含測2．反應(yīng)原理在強堿性溶液中，含C17-α-醇酮基的腎上腺皮質(zhì)激素將四氮唑鹽定量還原為有色甲替Kober反應(yīng)比色法雌激素的含測雌激素與硫酸-乙醇反應(yīng)呈色，在520nm附近有最大吸收異煙肼比色法原理酸性條件下，酮基與異煙肼縮合，形成黃色的異煙腙，一定波長處具有最大吸收。反應(yīng)的專屬性對含?4-3-酮基的甾體激素類有一定專屬性第13章

維生素類藥物的分析鑒別試驗三氯化銻反應(yīng)(Carr-Price反應(yīng))1、原理維生素A在飽和無水SbCl3的無醇三氯甲烷溶液中，顯藍(lán)色維生素A和SbCl3中存在的親電試劑氯化高銻（5價）作用，形成不穩(wěn)定的藍(lán)色碳正離子維生素A的無水乙醇-鹽酸溶液：326nm處有單一吸收峰含量測定（一）UV法(三點校正法)維生素A：在325-328nm范圍內(nèi)具有最大吸收維生素A原料中混有的雜質(zhì)：在310-340nm內(nèi)，有吸收2．三點校正法在3個波長處測定吸收度后，在規(guī)定條件下以校正公式校正吸收度，再進行含量計算。消除雜質(zhì)等無關(guān)吸收的影響，求得維生素A的真實含量。求維生素A醋酸酯占標(biāo)示量的百分含量標(biāo)示量%==A：A328或A328(校正)D：供試品稀釋倍數(shù)W：供試品取用量：膠丸的平均內(nèi)容物重標(biāo)示量：每粒膠丸含VitA醋酸酯的國際單位數(shù)維生素A醇維生素B（一）硫色素反應(yīng)---維生素B1的專屬反應(yīng)堿性溶液中，噻唑環(huán)開環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的–NH2環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化，生成硫色素。硫色素溶于正丁醇（或異丁醇），顯藍(lán)色熒光。加酸使成酸性，熒光消失，再加堿使成堿性，熒光又重現(xiàn)。維生素C一．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)二烯醇內(nèi)酯環(huán)2個手性碳原子鑒別試驗與硝酸銀（二）與2，6-二氯靛酚反應(yīng)由玫瑰紅色生成紅色，含量測定1。碘量法2，6-二氯靛酚法，滴定終點顯紅色維生素E硝酸酸性條件下，水解成生育酚，生育酚被硝酸氧化成生育紅（橙紅色）三氯化鐵堿性條件下，水解成生育酚，生育酚與FeCl3發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生育酚對-生育醌Fe3+Fe2+Fe2+與聯(lián)吡啶，生成紅色的配位離子第十四章雜環(huán)類藥物的分析莨菪烷類藥物主要理化性質(zhì)水解性具有酯結(jié)構(gòu)，易水解堿性，脂環(huán)上的叔胺氮原子：堿性較強，易與酸成鹽旋光性氫溴酸東莨菪堿：含手性碳原子，左旋體硫酸阿托品：含手性碳原子，但容易外消旋化消旋體，無旋光性鑒別試驗：托烷生物堿的一般鑒別試驗Vitaili反應(yīng)：水解產(chǎn)物莨菪酸的反應(yīng)氧化還原反應(yīng)吩噻嗪類藥物鑒別試驗：氧化劑氧化顯色反應(yīng)與鈀離子配合顯色反應(yīng)：不受氧化產(chǎn)物的干擾第三節(jié)苯并二氮雜卓類藥物主要理化性質(zhì)弱堿性：苯并二氮雜卓上的N：弱堿性，在非水溶液中可用酸液滴定水解性，二苯甲酮衍生物水解后顯芳伯胺反應(yīng)適于N1位上未取代的該類藥物第四節(jié)喹啉類藥物（一）綠奎寧反應(yīng)6位含氧的喹啉衍生物：顯此