動物細胞工程導學案及習題

②適宜pH：⑷氣體環(huán)境：主要是和，前者是所必需的，后者的主要作用是維持培養(yǎng)液的。[拓展提升]1，動物細胞培養(yǎng)時，為什么選用幼齡的動物或組織?2，使組織分散為單個細胞時，能不能用胃蛋白酶？請闡述理由。3，制成細胞懸液的主要的目的是什么？4，請給傳代培養(yǎng)下個定義。5,為什么對動物細胞進行培養(yǎng)時通常要加血清？6，體外培養(yǎng)細胞時需要提供那些物質(zhì)？7，體外培養(yǎng)的細胞需要什么樣的環(huán)境條件？知識點二：動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物【學習目標】說出體細胞核移植的過程，了解應(yīng)用。1動物核移植概念：將動物的一個細胞的，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的中，使其并發(fā)育成一個，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。2描述體細胞核移植的過程供體體細胞細胞培養(yǎng)（）（）注入（）減Π中期卵巢卵母細胞去核（）與供體遺傳基礎(chǔ)（——）的幼體代孕動物（）重組胚胎【拓展提升】1，克隆動物與植物細胞的組織培養(yǎng)的原理是相同的嗎？說明理由?？寺游锏谋举|(zhì)是什么？3體細胞的核移植是真的將供體的細胞核轉(zhuǎn)入受體的去核的卵母細胞體內(nèi)嗎？在體細胞的細胞核一直到受體卵母細胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細胞的核？5用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞，動物細胞工程練習題1,右圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此回答：（1）容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自。（2）容器A的動物器官或組織首先要進行的處理是，然后用酶處理，這是為了使細胞分散開。這樣做的目的是。（3）培養(yǎng)首先在B瓶中進行。瓶中的培養(yǎng)基成分有等。在此瓶中培養(yǎng)一段時間，這時的培養(yǎng)稱為。（4）為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用處理，然后配置成，再分裝，繼續(xù)培養(yǎng)，稱為。（5）在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細胞全部死亡。原因是。.2現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細胞組成可表示為A細胞核、A細胞質(zhì)，B品種牛則為B細胞核、B細胞質(zhì)。

（1）如果要獲得一頭克隆牛，使其細胞由A細胞核和B細胞質(zhì)組成，基本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細胞，進行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細胞中取出_______注入B品種牛的_________卵母細胞，經(jīng)過某處刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為_______，將該胚胎移入代孕母牛的_______中，通過培育可達到目的。

（2）一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細胞的數(shù)量______。

（3）克隆牛的產(chǎn)生說明_____具有全能性。克隆牛的性狀主要表現(xiàn)____品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細胞核的遺傳物質(zhì)來自______個親本，細胞質(zhì)來自______性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成______（相同，不同）。3．下圖為細胞融合的示意圖，據(jù)圖回答：(1)若A、B是植物細胞，A、B到C的過程中，常用到的化學試劑是__________。融合完成的標志是_________。將D培育成植株需要應(yīng)用_________技術(shù)。(2)若A、B用于動物細胞培養(yǎng)，則A、B一般取自___________________________動物的器官或組織。(3)若該過程用來制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，形成的C有_________種，用來培養(yǎng)符合要求的D細胞應(yīng)該是_________，與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點是_________。(4)用病毒作為融合劑是因為病毒的表面含有___________________________能夠與細胞膜發(fā)生作用，使細胞凝集并發(fā)生融合。4．2003年1月5日18時28分，已在太空遨游92圈的“神舟四號”運行至主著陸場，隨后成功回收?！吧裰鬯奶枴憋w船上曾進行了B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合、黃花煙草原生質(zhì)體和“革新”一號煙草原生質(zhì)體的融合兩個科學實驗，在電融合儀內(nèi)經(jīng)過160min后，終于獲得成功。⑴細胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比，其優(yōu)越性在于。⑵動物細胞融合技術(shù)最重要的用途是。⑶人工誘導動物細胞融合的技術(shù)除物理法、化學法外，還可用作為誘導劑。根據(jù)上述材料，你認為在“神舟四號”飛船上所用的誘導方法是。5．如下圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風桿菌抗體的實驗方案，據(jù)圖回答：(1)該方案能達到預期效果嗎？_________原因是_______________________________。(2)圖中②為_________過程，常用___________________作為誘導劑，該細胞繼承了______________，因此不僅能分泌_________，還有_________________本領(lǐng)。（3）該過程進行了兩次篩選，第一次用，得到了融合的。該細胞的特點是。第二次進行和，最終得到能產(chǎn)生特定抗體的。(4)破傷風桿菌的抗體最終可以從_________和_________中提取。(5)該方案的目的是_________________。(6)整個過程所用到的技術(shù)的基礎(chǔ)是。6下圖表示表示人體內(nèi)各類血細胞生成的途徑。a—f表示不同種類的細胞．①—⑥表示有關(guān)過程。(1)造血干細胞形成各種血細胞，需要經(jīng)歷細胞的和過程。成熟紅細胞失去全能性的原因是。(2)各類血細胞均采自于造血干細胞，但它們的功能各不相同．根本原因是。(3)圖中f代表的細胞名稱是，需要抗原刺激才能發(fā)生的過程有(填數(shù)字)。(4)效應(yīng)B細胞不能無限增殖，若要大量生產(chǎn)某種抗體，可通過細胞工程中的技術(shù)形成雜交瘤細胞。雜交瘤細胞合成抗體的翻譯過程需要作為模板。單克隆抗體具有高度的，在疾病的診斷和治療等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。7.已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有DNA的這兩種合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細胞。

請回答：

(1)試管中除融合的雜種細胞外，還有_______種融合細胞。

(2)設(shè)計一方法(不考慮機械方法)，從培養(yǎng)液中分離出雜種細胞，并說明原理。

方法：_____________________________________________。

原理：_____________________________________________。

(3)將分離出的雜種細胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三種細胞株。各細胞株內(nèi)含有的人染色體如下表(“+”表示有，“-”表示無)，測定各細胞株中人體所具有的五種酶的活性。結(jié)果是：B株有a酶活性；②．A、B、C株均有b酶活性；③．A、B株有c酶活性；④．C株有d酶活性；⑤．A、B、C株均無e酶活性。

若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的_______、_______、_______、_______和_______號染色體上。1答案：(1)胚胎或幼齡動物（2）剪碎組織胰蛋白使細胞與培養(yǎng)液充分接觸（3）糖、氨基酸、無機鹽、動物血清原代培養(yǎng)（4）胰蛋白酶細胞懸液傳代培養(yǎng)（5）細胞沒有發(fā)生癌變2(1)細胞核去核

重組胚胎

子宮

(2)不足

促性腺

(3)動物體細胞核

A

兩

雌

不同3答案：(1)聚乙二醇或PEG產(chǎn)生細胞壁植物組織培養(yǎng)或組織培養(yǎng)(2)動物胚胎或出生不久的幼齡(3)3雜交瘤細胞特異性強，靈敏度高(4)糖蛋白和一些酶4,答案：⑴克服了遠緣雜交不親和的障礙⑵制備單克隆抗體⑶滅活的病毒物理方法5(1)不能因為沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生此種抗體的效應(yīng)B細胞(2)細胞融合滅活的病毒(或聚乙二醇)雙親細胞的遺傳物質(zhì)特異性抗體在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖（3）特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選雜種細胞迅速大量繁殖，能產(chǎn)生專一的抗體克隆化培養(yǎng)和抗體的陽性檢測單個的雜交瘤細胞（雜種細胞)(4)培養(yǎng)液小鼠腹水(5)制備單克隆抗體（6）動物細胞