預(yù)購(gòu)2019年度動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷試劑清單

預(yù)購(gòu)2019年度動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷試劑清單序號(hào)種類參數(shù)數(shù)量單價(jià)金額1口蹄疫O型ELISA試劑盒1．阻斷ELISA2．保存條件：2~8℃保存；3．敏感性：98%4．特異性：99.2%5．穩(wěn)定性：批內(nèi)及批間差異≤3%。6．試劑盒規(guī)格：480孔（5板）/盒7．試劑盒組成：O型蛋白包被板，樣品稀釋液，陰性對(duì)照血清，陽(yáng)性對(duì)照血清，酶標(biāo)抗體，底物液，終止液，洗液。8.操作步驟：（1）使用前將試劑盒所有的組成恢復(fù)到室溫（25+3℃），取出抗原被板；（2）標(biāo)記好樣品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照（對(duì)照各做兩孔），每孔加入樣品稀釋液80ul，然后加入樣品血清、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各20ul后進(jìn)行震蕩混勻；（3）室溫孵育60分鐘；（4）洗板：每孔加入洗液300ul，洗滌3次，最后在吸水紙上拍干；（5）每孔加入100ul酶標(biāo)抗體，室溫孵育60分鐘；（6）重復(fù)步驟4，洗滌3次；（7）每孔加入TMB底物反應(yīng)液100ul.室溫暗處放置15分鐘。（8）每孔加入終止液50ul，置酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處讀數(shù)。9．結(jié)果判定：SN值＞0.6，陰性；SN值≤0.6，陽(yáng)性。10．試劑盒有效期12個(gè)月。2盒2口蹄疫A型ELISA試劑盒1．阻斷ELISA2．保存條件：2~8℃保存；3．敏感性：98%4．特異性：99%5．穩(wěn)定性：批內(nèi)及批間差異≤3%。6．試劑盒規(guī)格：480孔（5板）/盒7．試劑盒組成：A型蛋白包被板，樣品稀釋液，陰性對(duì)照血清，陽(yáng)性對(duì)照血清，酶標(biāo)抗體，底物液，終止液，洗液。8．操作步驟：（1）使用前將試劑盒所有的組成恢復(fù)到室溫（25+3℃），取出抗原被板；（2）標(biāo)記好樣品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照（對(duì)照各做兩孔），每孔加入樣品稀釋液80ul，然后加入樣品血清、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各20ul后進(jìn)行震蕩混勻；（3）室溫孵育60分鐘；（4）洗板：每孔加入洗液300ul，洗滌3次，最后在吸水紙上拍干；（5）每孔加入100ul酶標(biāo)抗體，室溫孵育60分鐘；（6）重復(fù)步驟4洗滌3次；（7）每孔加入TMB底物反應(yīng)液100ul.室溫暗處放置15分鐘。（8）每孔加入終止液50ul，置酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處讀數(shù)。9．結(jié)果判定：SN值＞0.6，陰性；SN值≤0.6，陽(yáng)性。10．試劑盒有效期12個(gè)月。3盒3蘭耳病ELISA試劑盒試劑盒內(nèi)容：PRRSV重組蛋白包被板、酶結(jié)合物濃縮液（10X）、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、稀釋緩沖液14、稀釋緩沖液3、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結(jié)合物、陰陽(yáng)性對(duì)照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產(chǎn)品。檢測(cè)步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復(fù)到室溫（21℃±5℃）。試劑應(yīng)通過(guò)輕輕渦旋、旋轉(zhuǎn)混合均勻。1.微孔板樣品預(yù)稀釋：1:40倍195μL樣品稀釋液14加入每孔。5μL用于檢測(cè)樣品加入對(duì)照不需要稀釋加樣：100μL陰性對(duì)照（不需稀釋）加入孔A1和B1。100μL陽(yáng)性對(duì)照（不需稀釋）加入孔C1和D1。100μL預(yù)稀釋樣品加入剩下孔內(nèi)提示：加樣后板震蕩混勻（2min,200rpm）效果更佳且不會(huì)影響結(jié)果。2.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。3.用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔5次。在洗滌和加入下一個(gè)試劑前，避免孔變干。4.用樣品稀釋液3按照1：10的比例的稀釋濃縮酶標(biāo)結(jié)合物（10X）制備酶標(biāo)結(jié)合物（1X）（1份濃縮洗滌液加9份樣品稀釋液3）。5.吸取100μL的酶標(biāo)記結(jié)合物（1X）加入到每孔中。6.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。7.重復(fù)步驟3。8.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。9.21℃（±5℃）下暗室內(nèi)孵育15min±2min。10.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應(yīng)。11.在酶標(biāo)儀的450nm波長(zhǎng)讀結(jié)果。實(shí)驗(yàn)有效性：在下列情形下實(shí)驗(yàn)有效：陰性對(duì)照的平均OD小于等于0.150.ODNC≤≤0.150陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照平均OD值差值大于等于0.150ODPC-ODNC≥0.150結(jié)果判定：對(duì)于每個(gè)樣品，計(jì)算其S/P比值：每個(gè)樣品得出一個(gè)（S/P）：S/P≤0.4，陰性；SN值＞04，陽(yáng)性2盒4豬瘟ELISA試劑盒試劑盒內(nèi)容：包被的微量滴定板、酶結(jié)合物濃縮液（10X）、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、稀釋緩沖液8、稀釋緩沖液12、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結(jié)合物、陰陽(yáng)性對(duì)照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產(chǎn)品。檢測(cè)步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復(fù)到室溫（21℃±5℃）。試劑應(yīng)通過(guò)輕輕渦旋、旋轉(zhuǎn)混合均勻。1.血清1.加樣：50μL8號(hào)稀釋液加入每孔。50μL陽(yáng)性對(duì)照加入孔A1和B1。50μL陰性對(duì)照加入孔C1和D1。50μL待檢測(cè)樣品加入剩下其他孔內(nèi)。2.2.37℃℃（±±2℃℃））下孵育45±4min（短時(shí)孵育）或在21℃℃（±±5℃℃））下孵育16-20小時(shí)（過(guò)夜孵育）。3.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個(gè)板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個(gè)試劑前，避免孔壁變干。4.非常重要：10X濃縮酶標(biāo)記抗體用稀釋緩沖液12進(jìn)行10倍稀釋（1份濃縮液+9份稀釋液）。吸取稀釋的100μL的酶標(biāo)抗體加入到每孔中。5.21℃℃（±±5℃℃））下孵育30±3min。6.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次，洗滌過(guò)程中避免孔壁變干。7.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。8.21℃℃（±±5℃℃）下暗室避光孵育15min±2min。9.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應(yīng)。10.在酶標(biāo)儀的450nm波長(zhǎng)讀取OD值。實(shí)驗(yàn)有效性：在下列情形下實(shí)驗(yàn)有效：陰性對(duì)照的平均OD大于0.7ODNC>0.7陽(yáng)性對(duì)照平均OD值小于陰性對(duì)照的30%ODPC/ODNC＜0.3結(jié)果判定：對(duì)于每個(gè)樣品，計(jì)算其S/N百分比（S/N%）每個(gè)樣品得出一個(gè)（S/N%）短時(shí)孵育或過(guò)夜孵育：S/N%≤50%陽(yáng)性；50%＜S/N%≤60%可疑；S/N%＞60%陰性。3盒5禽流感H5Re-11株抗原禽流感病毒H5亞型（Re-11株）血凝抑制試驗(yàn)抗原，用于H5亞型（Re-11株）禽流感病原檢測(cè)。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經(jīng)純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成?？乖r(jià)不低于7Log2；

2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；

4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。3瓶6禽流感H7Re-2株抗原禽流感病毒H7亞型（Re-2）株血凝抑制試驗(yàn)抗原，

用于H7亞型（Re-2）株禽流感病原檢測(cè)。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經(jīng)純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成?？乖r(jià)不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；

4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。3瓶7禽流感H5Re-12株抗原禽流感病毒H5亞型（Re-12株）血凝抑制試驗(yàn)抗原，用于H5亞型（Re-12株）禽流感病原檢測(cè)。2ml/瓶。1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經(jīng)純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成?？乖r(jià)不低于7Log2；

2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；

4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。2瓶8禽流感H9抗原1.抗原為禽流感病毒接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經(jīng)純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成?？乖r(jià)不低于7Log2；2.試劑在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。2瓶9新城疫抗原1.抗原為雞新城疫病毒LaSota株接種SPF雞胚培養(yǎng)，收獲雞胚尿囊液，經(jīng)純化、甲醛溶液滅活后，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成?？乖r(jià)不低于9Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；4．無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。2瓶10布病虎紅平板凝集抗原1.主要成分及含量：含滅活的布氏菌菌株2.性狀：紅色均勻懸浮液，久置后，上不澄清，底部有少量紅色菌體沉淀。3.作用與用途：用于虎紅平板凝集試驗(yàn)診斷布氏菌病。4.用法與判定取被檢血清0.03mL與抗原0.03mL相混合，4分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。凡出現(xiàn)“+”以上反應(yīng)者判為陽(yáng)性。對(duì)出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的動(dòng)物，須進(jìn)一步作補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)或其他輔助診斷試驗(yàn)。凝集反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)：++++

凝集塊呈菌叢狀，凝塊間液體明顯清亮。+++

凝集反應(yīng)較強(qiáng)，液體較清亮。++

形成較明顯卷邊，凝集塊間液體稍清亮。+稍能查到凝集，稍有卷邊形成：凝集物間液體呈紅色。－

無(wú)凝集，呈均勻粉紅色。5.規(guī)格：10mL/瓶6.貯藏與有效期：2～8℃保存，有效期為12個(gè)月。7.有經(jīng)農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的獸藥生產(chǎn)的批準(zhǔn)文號(hào)。2瓶11禽流感H5Re-11株陽(yáng)性血清禽流感病毒H5亞型陽(yáng)性血清（Re-11株），用于血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)H5亞型（Re-11株）禽流感病毒試驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照。2ml/瓶1.

陽(yáng)性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經(jīng)冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價(jià)不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；

4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。1瓶12禽流感H5Re-12株陽(yáng)性血清禽流感病毒H5亞型陽(yáng)性血清（Re-12株），用于血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)H5亞型（Re-12株）禽流感病毒試驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照。2ml/瓶1.

陽(yáng)性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經(jīng)冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價(jià)不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；

3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；

4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。1瓶13禽流感禽流感H7Re-2株陽(yáng)性血清禽流感病毒H7亞型陽(yáng)性血清，用于H7亞型禽流感病原檢測(cè)的陽(yáng)性對(duì)照，2ml/瓶。1.陽(yáng)性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經(jīng)冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價(jià)不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立；4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。1瓶14禽流感H9陽(yáng)性血清1.陽(yáng)性血清系用禽流感病毒滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經(jīng)冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價(jià)不低于7Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立，2ml/瓶；4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。1瓶15新城疫陽(yáng)性血清1.陽(yáng)性血清系用雞新城疫滅活疫苗接種SPF雞，采血、分離血清，經(jīng)冷凍真空干燥制成。血凝一抑制效價(jià)不低于8Log2；2.試劑在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；3.試驗(yàn)結(jié)果陰陽(yáng)性對(duì)照成立，2ml/瓶；4.無(wú)菌檢驗(yàn)、剩余水分測(cè)定、真空度測(cè)定按現(xiàn)行《中國(guó)獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)符合要求。1瓶16偽狂犬ELISA試劑盒（gB）試劑盒內(nèi)容：gB病毒抗原包被、酶結(jié)合物濃縮液（10X）、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、稀釋緩沖液4、稀釋緩沖液3、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液。1.酶結(jié)合物、陰陽(yáng)性對(duì)照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.96孔╳5板，相同名稱的洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產(chǎn)品。檢測(cè)步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復(fù)到室溫（21℃±5℃）。試劑應(yīng)通過(guò)輕輕渦旋、旋轉(zhuǎn)混合均勻。1.血清1.1短時(shí)間孵育1.加樣：每孔加入50μL樣品稀釋液4?？譇1和B1分別加入50μL陽(yáng)性對(duì)照?？證1和D1分別加入50μL陰性對(duì)照。剩下其他孔內(nèi)加入50μL待檢測(cè)樣品2.37℃（±2℃）下孵育45min±4min。1.2過(guò)夜孵育1.加樣：每孔加入75μL樣品稀釋液4?？譇1和B1分別加入25μL陽(yáng)性對(duì)照?？證1和D1分別加入25μL陰性對(duì)照。剩下其他孔內(nèi)加入25μL待檢測(cè)樣品2.21℃（±5℃）下過(guò)夜孵育16-20小時(shí)。1.3不過(guò)過(guò)夜孵育或是短時(shí)間孵育，以下1-9步驟相同1.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個(gè)板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個(gè)試劑前，避免孔壁變干。2.用稀釋液緩沖液3按照1：10的比例的稀釋濃縮酶標(biāo)結(jié)合物（10X）制備酶標(biāo)結(jié)合物（1X）（1份濃縮洗滌液加9份樣品稀釋液）。3.吸取100μL的酶標(biāo)記結(jié)合物（1X）加入到每孔中。4.37℃（±2℃）下孵育30min。5.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次，洗滌過(guò)程中避免孔壁變干。6.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。7.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15min。8.在每孔中加入100μL的終止液終止顯色反應(yīng)。9.在酶標(biāo)儀的450nm波長(zhǎng)讀結(jié)果。實(shí)驗(yàn)有效性：在下列情形下實(shí)驗(yàn)有效：陰性對(duì)照的平均OD大于0.7ODNC>0.7陽(yáng)性對(duì)照平均OD值小于陰性對(duì)照的30%ODPC/ODNC＜0.3結(jié)果判定：對(duì)于每個(gè)樣品，計(jì)算其S/N百分比（S/N）每個(gè)樣品得出一個(gè)（S/N）：短時(shí)孵育：S/N≤40%陽(yáng)性；40%＜S/N%≤50%可疑；S/N%＞50%陰性。過(guò)夜孵育：S/N%≤30%陽(yáng)性；30%＜S/N%≤40%可疑；S/N%＞40%陰性1盒17偽狂犬ELISA試劑盒（gE）試劑盒內(nèi)容：gE病毒抗原包被、酶結(jié)合物標(biāo)準(zhǔn)液、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、樣品稀釋液13、稀釋緩沖液12、濃縮洗滌液（20X）、底物溶液、終止液1.酶結(jié)合物、陰陽(yáng)性對(duì)照以及底物溶液必須在5℃（±3℃）下貯存。2.其它試劑可放置+2℃～+26℃保存。3.規(guī)格：96孔╳5板，相同名稱的洗滌液和樣品稀釋液可用于IDVET所有系列產(chǎn)品。檢測(cè)步驟：在使用前，所有的試劑盒組分都必須回復(fù)到室溫（21℃±5℃）。試劑應(yīng)通過(guò)輕輕渦旋、旋轉(zhuǎn)混合均勻。1.血清1.1短時(shí)間孵育1.加樣：每孔加入20μL樣品稀釋液13。孔A1和B1分別加入50μL陽(yáng)性對(duì)照?？證1和D1分別加入50μL陰性對(duì)照。剩下其他孔內(nèi)加入50μL待檢測(cè)樣品。2.37℃（±2℃）下孵育1h30±6min。1.2過(guò)夜孵育(可以提高檢測(cè)能力)1.加樣：每孔加入80μL樣品稀釋液4?？譇1和B1分別加入20μL陽(yáng)性對(duì)照?？證1和D1分別加入20μL陰性對(duì)照。剩下其他孔內(nèi)加入20μL待檢測(cè)樣品。2.21℃（±5℃）下過(guò)夜孵育（16-20小時(shí)）。1.3不管過(guò)夜孵育或是短時(shí)間孵育，以下1-8步驟相同1.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次。在每一次洗滌后，甩去每個(gè)板孔中的液體，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在洗滌和加入下一個(gè)試劑前，避免孔壁變干。44002.吸取100μL的酶標(biāo)記結(jié)合物（直接使用）加入到每孔中。3.21℃（±5℃）下孵育30±3min。4.甩干板中液體，用300μL左右的洗滌液洗滌每個(gè)板孔3次，洗滌過(guò)程中避免孔壁變干。5.吸