安徽醫(yī)科大學(xué)研究生細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)考試重點詳解

接觸克制（contactinhibition）：密度克制（densityinhibition）：腫瘤干細(xì)胞(tumorstemcellsTSC)體現(xiàn)為一種特殊類型的干細(xì)胞，含有高度增殖能力TSC細(xì)胞匯合(Confluent)：二倍體細(xì)胞系或株(Diploidcelllineorstrain)二倍體(Diploid)：細(xì)胞融合(Cellfusion)：指兩個獨立的細(xì)胞借媒介物(PEG細(xì)胞富集：當(dāng)細(xì)胞分離純化并不完全徹底，培養(yǎng)物中能達(dá)成以某種細(xì)胞為主（數(shù)）滲入壓、同時供應(yīng)細(xì)胞生存所需的能量和無機(jī)離子成分的作用。消化液：（EDTA消毒disinfection滅菌sterilization轉(zhuǎn)化細(xì)胞系雜交瘤技術(shù)BBB增大的物質(zhì)，如仙臺病毒，PEGPHiPS克隆種類：（1）保持工作區(qū)清潔：常規(guī)清洗地面和臺面，定時清潔水浴箱、CO2實際意義：組織（細(xì)胞）5~1024~48h41℃作用5~10h18hpH胚胎浸出液（embryonicextract）是早期動物細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用的天然培養(yǎng)基，如雞 pH等、消化液（分離細(xì)胞、血清、pH細(xì)胞接種：接種細(xì)胞密度10-4-10-5CO2-NaHCO3系統(tǒng)。4)pH，（轉(zhuǎn)化細(xì)胞系的特性3）失去錨著依賴性（停泊依賴性5×105／ml，37℃7）雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的三個技術(shù)基礎(chǔ)（核心普通不再進(jìn)行細(xì)胞分裂，存活一段時間后便會死亡——短命細(xì)胞。②骨髓瘤細(xì)胞(myelomacells)：惡性增殖的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，只要營養(yǎng)條件適合可永遠(yuǎn)分裂和存活——長HGPRTˉTKˉ。細(xì)胞融合技術(shù)：分泌抗體短命脾細(xì)胞(BHATNS1SP2/0105／ml，細(xì)胞活力達(dá)95%，進(jìn)行細(xì)胞融合時1.5*108細(xì)胞數(shù)。3）融合劑良好適宜，50%PEG1）選擇培養(yǎng)基（HAT）2）喂養(yǎng)細(xì)胞（104／ml）：來自同系小鼠的胸腺細(xì)胞或腹成體干細(xì)胞體積小，細(xì)胞器稀少，RNAout成體干細(xì)胞也含有類胚胎干細(xì)胞的高度分化能力。在人體發(fā)育的過程中，可能成體干試述癌細(xì)胞系鑒定要點（簡述體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)檢測的常規(guī)項目1～4周。特點：①培養(yǎng)細(xì)胞成分混雜，呈現(xiàn)異質(zhì)性。②細(xì)胞活躍移動,分裂,但不旺盛,多呈二倍體核型。③原代與體內(nèi)原組織形態(tài)構(gòu)造和功效活動基本相似，適宜進(jìn)行疫苗制備、藥品測試、移植等。為保持二倍體體細(xì)胞性質(zhì)，應(yīng)粘附生長型細(xì)胞根據(jù)形態(tài)分為幾個類型，試述各型重要特點1）粘附型細(xì)胞（Monolayercells）:a成纖維細(xì)胞型：①形態(tài)：似體內(nèi)成纖維細(xì)胞的形態(tài)，胞體梭形或不規(guī)則，三角形，胞質(zhì)b上皮細(xì)胞型：①形態(tài)：類似體內(nèi)的上皮細(xì)胞，扁平、不規(guī)則多角形c游走型細(xì)胞：培養(yǎng)需要支持物，分散生長，不連接成片，在培養(yǎng)皿中生長位置不定，處在活躍的游走或變形運(yùn)動，因另外形不規(guī)則且不停變化,密度大連接成片呈多角形不易d多型性細(xì)胞：無規(guī)律的形態(tài)，細(xì)胞分胞體和胞突。胞突細(xì)長形，似絲狀偽足，胞體略呈試述“克隆”的基本概念并舉例闡明其在細(xì)胞培養(yǎng)工作中的實際意義b蛋白質(zhì)的提純：單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一pH，欲分離的抗原與抗體解離，收集洗脫液便2.