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脂肪、糖類、蛋白質(zhì)鑒定1鑒定原理3注意事項(xiàng)2實(shí)驗(yàn)選材

(1)脂肪的檢測(cè):脂肪+(2)糖類的檢測(cè)①還原糖+

。②淀粉+碘液

。(3)蛋白質(zhì)的檢測(cè):蛋白質(zhì)+

雙縮脲試劑變性的蛋白質(zhì)也可,或具有兩個(gè)及兩個(gè)以上肽鍵的化合物原理:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的相關(guān)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。橘黃色紅色斐林試劑磚紅色沉淀藍(lán)色檢測(cè)原理50℃~65℃水浴加熱2min紫色蘇丹IV蘇丹III1.實(shí)驗(yàn)選材基本要求:①被檢測(cè)物質(zhì)含量豐富②易獲取的原則③顏色淺或接近于淺色實(shí)驗(yàn)選材蘇丹Ⅲ、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液、蒸餾水2.試劑:斐林試劑

甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液雙縮脲試劑A液:0.1g/mL的NaOH溶液B液:0.01g/mL的CuSO4溶液對(duì)提供的材料進(jìn)行選擇和分類:①蘋(píng)果②花生種子③豆?jié){④梨⑤稀釋雞蛋清⑥鮮肝提取液

⑦馬鈴薯勻漿⑧芝麻種子⑨西瓜汁⑩去皮葡萄勻漿

?白蘿卜勻漿(1)適合還原糖檢測(cè)的有

。(2)適合脂肪檢測(cè)的有

。(3)適合蛋白質(zhì)檢測(cè)的有

。(4)適合淀粉檢測(cè)的有

。⑦①④⑩?②③⑤⑥實(shí)驗(yàn)選材(1)淀粉的檢測(cè)和觀察實(shí)驗(yàn)步驟(2)脂肪的檢測(cè)方法一:花生種子勻漿+3滴蘇丹Ⅲ染液→橘黃色方法二取材:花生種子(浸泡,去掉種皮)↓切片:將子葉切成若干薄片,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中待用↓制片

↓觀察:先低倍顯微鏡下尋找已著色顆粒,再高倍顯微鏡觀察↓結(jié)論:①取最薄的切片,用毛筆蘸取放在載玻片中央②染色:滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液,染色3min③去浮色:加1~2滴

體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精

溶液④制成臨時(shí)裝片:滴一滴蒸餾水,蓋上蓋玻片75%——消毒50%——洗去浮色圓形小顆粒呈橘黃色,證明花生種子中含有脂肪選材:試劑:制備樣液:顏色反應(yīng):含糖(可溶性糖)量高、白色或近于白色的植物組織斐林試劑

甲液:的NaOH

乙液:的CuSO4

制漿→過(guò)濾(一層紗布)→取液注入2mL梨組織樣液振蕩、混合搖勻注入1mL剛配制好的斐林試劑變成磚紅色50-65℃的溫水藍(lán)色棕色磚紅色新制Cu(OH)2Cu2O(沉淀)結(jié)論:組織樣液含有還原糖不宜用甘蔗;不宜用西瓜汁和番茄汁等顏色較重的材料(顏色會(huì)掩蓋實(shí)驗(yàn)結(jié)果)(3).還原糖的檢測(cè)不能用酒精燈直接加熱①常見(jiàn)的單糖(葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖、脫氧核糖等)、二糖中的麥芽糖、乳糖是還原糖;蔗糖、多糖(淀粉、糖原和纖維素)都不是還原糖。②非還原糖(如蔗糖)+斐林試劑水浴加熱后的現(xiàn)象不是無(wú)色而是淺藍(lán)色[Cu(OH)2的顏色]。提醒取材制備組織樣液黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)蛋清必須稀釋,以免實(shí)驗(yàn)后黏住試管壁,不易清洗雞蛋清蛋清稀釋液加水稀釋黃豆(侵泡1-2d)豆?jié){研磨濾液過(guò)濾(4)蛋白質(zhì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟(4)蛋白質(zhì)檢測(cè)顯色反應(yīng)現(xiàn)象搖勻2mL組織樣液1mL雙縮脲試劑A液創(chuàng)設(shè)堿性環(huán)境3-4滴雙縮脲試劑B液提供Cu2+無(wú)色藍(lán)色紫色蛋白質(zhì)中肽鍵在堿性環(huán)境遇到Cu2+會(huì)形成紫色絡(luò)合物A液:質(zhì)量濃度0.1g/mlNaOH,B液:質(zhì)量濃度0.01g/mlCuSO4先加A液、再加B液過(guò)量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。使用雙縮脲試劑時(shí)為什么B液只能加3~4滴而不能過(guò)量?斐林試劑雙縮脲試劑不同點(diǎn)濃度使用方法原理顏色變化甲液乙液:g/mLCuSO4A液B液:g/mLCuSO4甲液和乙液混合均勻后方可使用,且現(xiàn)配現(xiàn)用需水浴加熱。使用時(shí)先加A液再加B液,不需加熱實(shí)質(zhì)是新配制的Cu(OH)2,還原為Cu2O沉淀實(shí)質(zhì)是堿性環(huán)境中的Cu2+肽鍵與堿性環(huán)境中的Cu2+生成紫色的絡(luò)合物。斐林試劑和雙縮脲試劑對(duì)比藍(lán)色→棕色→磚紅色淺藍(lán)色→紫色①唯一需要加熱——還原糖的檢測(cè),且必須水浴加熱,不能用酒精燈直接加熱。若不加熱,則無(wú)磚紅色沉淀出現(xiàn)。②唯一需要使用顯微鏡——脂肪的檢測(cè)。③唯一使用酒精——脂肪的檢測(cè),實(shí)驗(yàn)用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液洗去浮色。④因?yàn)槠浞磻?yīng)原理是具有兩個(gè)或以上肽鍵的化合物在堿性條件下與Cu2+反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物提醒1.利用斐林試劑的甲液、乙液和蒸餾水能否檢測(cè)蛋白質(zhì)?為什么?

能。斐林試劑的甲液、乙液的成分分別與雙縮脲試劑的A液、B液相同,只是斐林試劑的乙液的質(zhì)量濃度比雙縮脲試劑的B液高,只需將斐林試劑的乙液用蒸餾水稀釋即可。2.鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)材料是否可選擇西瓜、番茄、馬鈴薯、

甘蔗組織樣液?不可以。西瓜和番茄組織樣液本身的顏色對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯;馬鈴薯含淀粉,淀粉為非還原糖;甘蔗主要含蔗糖,為非還原糖。應(yīng)選顏色為白色或近白色、富含葡萄糖、果糖或麥芽糖等還原糖的植物組織樣液,以蘋(píng)果、梨的勻漿最好。思考1、生物材料原有的顏色是否影響結(jié)果的觀察?2、材料需要如何處理?3、兩種檢測(cè)試劑的使用方法是否一致?4、如何排除其他因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響?5、能與雙縮脲產(chǎn)生紫色反應(yīng)的一定是蛋白質(zhì)嗎?實(shí)驗(yàn)室證據(jù)“生物組織中糖類、蛋白質(zhì)的的檢測(cè)”討論活動(dòng)1、下列有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)中,操作有誤的是()

A.鑒定蛋白質(zhì)時(shí),把雙縮脲試劑A液和B液混合后再加入蛋白質(zhì)樣液中

B.鑒定還原糖時(shí),用60℃水浴加熱

C.鑒定淀粉時(shí),直接把碘液加入淀粉樣液中

D.鑒定脂肪時(shí),在花生種子勻漿中滴加蘇丹Ⅲ染液后,直接進(jìn)行觀察A2、現(xiàn)提供可配制斐林試劑的溶液:甲液(0.1

g/mL的NaOH溶液)、乙液(0.05g/mL的CuSO4

溶液)以及蒸餾水,如果充分利用上述試劑及必需的實(shí)驗(yàn)用具,可靈活性地鑒別出下列哪些物質(zhì)

()

①葡萄糖

②蔗糖

③胃蛋白酶(其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì))

④DNA

A.只有①

B.①②

C.①③

D.②③④C課堂練習(xí)課堂練習(xí)3、(2023·四川宜賓高一期末)某生物興趣小組對(duì)作物種子發(fā)育過(guò)程中有機(jī)物的積累及轉(zhuǎn)化進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。下列關(guān)于檢測(cè)方法及出現(xiàn)結(jié)果的敘述,不正確的是(

)A.小麥種子加水浸泡→用小刀縱切→在切面滴加碘液→依據(jù)被染成藍(lán)色檢測(cè)淀粉B.甜玉米籽加水研磨→離心取上清液→加斐林試劑→觀察磚紅色沉淀檢測(cè)還原糖C.花生種子切片→蘇丹Ⅲ→去浮色→顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)被染成橘黃色的脂肪顆粒D.雞蛋清加水?dāng)嚢琛覰aOH溶液→再加CuSO4溶液→依據(jù)紫色反應(yīng)檢測(cè)蛋白質(zhì)B課堂練習(xí)4、NaOH溶液和CuSO4溶液可作為斐林試劑(甲液和乙液)檢測(cè)生物

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