海洋鋼結(jié)構(gòu)中兩種貝類毒素含量的測(cè)定

海洋鋼結(jié)構(gòu)中兩種貝類毒素含量的測(cè)定

麻痹性貝類素（psp）是水中藻類或微生物的次生代謝產(chǎn)物。由于它食物產(chǎn)生的病毒在體內(nèi)積聚，人類誤解了含有中毒生物的外殼，導(dǎo)致中毒或死亡。為確保海產(chǎn)品的食用安全,一些受麻痹性貝類毒素危害較大的國家,在一些主要貝類海產(chǎn)區(qū)將PSP列為常規(guī)性監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。我國有關(guān)人員開展了一些PSP方面的調(diào)查研究工作,報(bào)道了食用織紋螺(Nassariussp.)、菲律賓蛤仔(Ruditapesphilipinensis)、櫛江瑤(Pinnapectinata)、有鰭魚(finfish)引起的PSP中毒案例。但整體上,我國對(duì)PSP的研究多為零星的中毒事件調(diào)查或季節(jié)性普查,缺乏系統(tǒng)性。因此,針對(duì)一些受麻痹性貝毒影響較大的貝類養(yǎng)殖區(qū),較系統(tǒng)地開展貝類PSP動(dòng)態(tài)變化研究,將對(duì)沿海貝類養(yǎng)殖的發(fā)展及其食用安全具有重要意義。1貝類毒素檢測(cè)于1997年10月至1999年6月間,對(duì)受PSP影響較大的廣東大亞灣、大鵬灣內(nèi)養(yǎng)殖的主要經(jīng)濟(jì)貝類翡翠貽貝(Pernaviridis)(俗稱青口)、華貴櫛孔扇貝(Chlamysnobilis)進(jìn)行每月一次采樣,采樣地點(diǎn)位于上述兩灣貝類養(yǎng)殖區(qū)(圖1)?？紤]到人們?cè)谌粘Ｊ秤秘愵悤r(shí)常將貝類消化腺去除,故本文將貝類的消化腺組織與其他貝類軟組織所含的PSP分別測(cè)定。以美國化學(xué)家協(xié)會(huì)推薦的“麻痹性貝類毒素小白鼠的生物測(cè)定法”對(duì)貝類毒素提取和毒性測(cè)定。實(shí)驗(yàn)用小白鼠購于暨南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,昆明種系,雄性,每只重18~21g,每組實(shí)驗(yàn)小白鼠數(shù)量一般為3只。2結(jié)果2.1貽貝sd-月間資格樣品中所見表1深圳大亞灣東山(S2)的測(cè)定結(jié)果表明(表1):1999年1~6月,華貴櫛孔扇貝PSP毒性很高,毒素主要集中在消化腺,含量為1263.0至105Mu/g,剔除消化腺的其他軟組織存有一定量的毒素。貝肉平均含毒為117.1至5.5Mu/g。在時(shí)間分布上,冬季高于春季,且呈波浪性下降。用聯(lián)合國糧農(nóng)組織推薦的適合人類安全消費(fèi)的貝類PSP含量最高限定值4Mu/g來衡量,本采樣點(diǎn)扇貝PSP含量均已超標(biāo),尤其是一月份,超標(biāo)近30倍。貽貝消化腺PSP含量1至4月均超標(biāo),剔除消化腺后的其余貽貝肉僅一月份超標(biāo),貽貝肉PSP含量平均值也僅一月份超標(biāo)。整體上貽貝PSP含量的變化亦表現(xiàn)為由冬至春逐月波動(dòng)下降的特點(diǎn)。大亞灣澳頭(S3,S4)海域扇貝和貽貝的PSP含量不高,且均低于4Mu/g,貽貝PSP出現(xiàn)的高峰期約在5月,總體上,扇貝PSP的含量較貽貝高(圖2)。2.2檢測(cè)cdp的極限大鵬灣南澳(S1)華貴櫛孔扇貝和翡翠貽貝的平均PSP含量都不高,且低于4Mu/g(表2)。扇貝消化腺中PSP含量1月份最高,并隨時(shí)間的向后推移,呈波浪式降低。在扇貝的其他軟組織中,檢測(cè)不出PSP,僅在個(gè)別樣品中發(fā)現(xiàn)受試的小白鼠有典型的PSP中毒反應(yīng)。貽貝的消化腺中PSP含量均低于本方法的檢測(cè)極限,僅在1998年12月及1999年1月的樣品中發(fā)現(xiàn)有PSP存在的跡象。在貽貝的其他軟組織中未檢測(cè)出PSP。3討論3.1貝的檢測(cè)機(jī)理扇貝和貽貝在一些貝類養(yǎng)殖區(qū)是主要的養(yǎng)殖對(duì)象,也是一些國家的主要經(jīng)濟(jì)貝類,在進(jìn)行PSP調(diào)查時(shí),此兩類貝類常作為受檢對(duì)象。本研究表明,兩者在積累PSP的數(shù)量及持續(xù)時(shí)間方面存在明顯差異,華貴櫛孔扇貝積累PSP的能力較強(qiáng),排除速率慢,PSP在貝體內(nèi)含量較高,保存時(shí)間較長(zhǎng);翡翠貽貝積累PSP的能力較扇貝低,排毒能力強(qiáng),PSP在貝體組織內(nèi)含量較低,保存時(shí)間短。貝類對(duì)麻痹性毒素的積累能力除取決于貝類的種類,產(chǎn)生毒素的有毒藻種類及數(shù)量外還與攝食的環(huán)境溫度、鹽度及光(包括光強(qiáng)、光周期)等因素有關(guān)。就貝類而言,貝類軟組織的毒素含量與貝類對(duì)有毒藻的攝食行為、貝類對(duì)毒藻毒素的吸收和代謝能力等因素有關(guān),因而,同一采樣點(diǎn)不同種貝類間PSP含量差別很大,也就是說,在同樣毒藻數(shù)量條件下,同一采樣點(diǎn)的不同種貝類PSP含量不盡相同。一般認(rèn)為,貝類可攝食含麻痹性貝毒的藻類并在體內(nèi)積累PSP而自身不受影響,但進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明,貝類攝食有毒藻后所產(chǎn)生的生理反應(yīng)差別很大,有的種類部分個(gè)體會(huì)中毒死亡,有的種類會(huì)不同程度地關(guān)閉貝殼膜瓣,收縮水管,降低攝食率,而有的種類則未發(fā)生異常反應(yīng)。這種反應(yīng)與貝類種類有關(guān),也與貝類的攝食經(jīng)歷有關(guān),長(zhǎng)期處于有毒藻中的貝類通常對(duì)毒藻有較好的適應(yīng)性,其攝食受毒藻影響小。其結(jié)果,造成貝類對(duì)有毒藻的攝食率和消化吸收差異。PSP在貝組織內(nèi)的轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移機(jī)理目前尚不十分清楚,但已認(rèn)識(shí)到不同貝類的不同組織PSP含量差異很大且依季節(jié)變化,有的轉(zhuǎn)移到水管、生殖腺等組織的毒素與貝體結(jié)合,不易為貝體代謝釋出而逐漸積累,長(zhǎng)期帶毒?；谏鲜鲈?不同貝類對(duì)毒素積累與排除的速率不同。已有資料證明,與沖浪蛤Spisulasolidissima和蛤Myaarenaria相比,翡翠貽貝M.edulis能迅速在其組織中積累和排除毒素,據(jù)此,加拿大在其東部沿海主要貝類養(yǎng)殖區(qū),美國在緬因?yàn)持饕愵愷B(yǎng)殖區(qū)附近均設(shè)有PSP常年監(jiān)測(cè)點(diǎn),選取翡翠貽貝為監(jiān)測(cè)對(duì)象,據(jù)以往的歷史資料,可提前一周對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的PSP作出預(yù)報(bào)。本實(shí)驗(yàn)表明,與華貴櫛孔扇貝相比,翡翠貽貝積累和排除PSP較快(圖2),其亦可作為大亞灣貝類PSP監(jiān)測(cè)首選對(duì)象之一。3.2pcd含量的測(cè)定雖然貝類各器官PSP含量存在較大差異且依季節(jié)而變化,但一般而言,PSP主要蓄積在貝類的消化腺中。比較S2取樣點(diǎn)PSP在扇貝及貽貝不同組織中的分布可知,PSP含量在扇貝消化腺與扇貝其他軟組織之比為64至113,平均約為79,貽貝之比則為2.5至40,平均約為15,在PSP含量較高的1月份,這種比值較高,表明扇貝的PSP主要集中在消化腺中,PSP在其體內(nèi)可能需經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間代謝才可緩慢轉(zhuǎn)移到其他組織。由此似可推測(cè),貝類PSP積累能力越強(qiáng),貝類消化腺所含毒素量與其他組織所含毒素量之比就越高。由于本研究所涉及貝類種類少,上述推論是否可作為判定貝類積累PSP能力強(qiáng)弱的標(biāo)準(zhǔn),尚待進(jìn)一步研究。3.3采樣點(diǎn)水質(zhì)及季節(jié)不同取樣點(diǎn)間同種貝類PSP含量的差異因時(shí)間而變化,在同一時(shí)間的同種貝類間PSP含量的差異則因取樣地點(diǎn)而變化。比較各采樣點(diǎn)貝類毒素測(cè)定結(jié)果可知,在同一時(shí)間內(nèi),S2采樣點(diǎn)的扇貝和貽貝的PSP含量比其他取樣點(diǎn)高,尤其在PSP含量高的1月份,S2采樣點(diǎn)兩種貝類PSP含量遠(yuǎn)較其他采樣點(diǎn)高。有趣的是,這些采樣點(diǎn)間的地理間距并不遠(yuǎn),水體的營(yíng)養(yǎng)成分差別不大,不過,S2采樣點(diǎn)的水灣出口較淺,水體交換能力差,這可能是造成該灣貝類PSP含量高的原因。Sekiguchi等人比較相鄰的Yamada灣和Ofunato灣的扇貝Patinopectenyessoensis所含PSP年變化時(shí)發(fā)現(xiàn),有毒赤潮生物塔瑪亞歷山大藻(Alexandriumtamarense)與扇貝PSP含量密切相關(guān),后者灣內(nèi)扇貝PSP含量比前者高得多,持續(xù)時(shí)間也比后者長(zhǎng)。造成此差異的原因是前者海灣為寬口袋型,灣口深,與外界水體交換強(qiáng),灣內(nèi)水體中高密度有毒藻主要來自外部水體,但其在灣內(nèi)滯留時(shí)間短,很快會(huì)被沿岸流帶出灣外;后者則為狹長(zhǎng)口袋型,灣口窄淺,水體交換差,水體中的高密度有毒藻主要來自灣內(nèi)底泥中孢囊的萌發(fā)。本文S2采樣點(diǎn)地理特點(diǎn)與Ofunato灣十分相似,在該點(diǎn)亦發(fā)現(xiàn)有豐富的A.tamarense孢囊,所以S2采樣點(diǎn)貝類PSP含量較高的原因應(yīng)與Ofunato灣相同。不過,在間距不大,地理?xiàng)l件相近的采樣點(diǎn)間,同一種貝類PSP含量及高峰出現(xiàn)時(shí)間差異不明顯(圖2)。因此,在規(guī)劃貝類養(yǎng)殖區(qū)PSP監(jiān)測(cè)方案時(shí),既要保持采樣點(diǎn)間有一定的間距,減少工作強(qiáng)度,又要考慮局部水體的地理特點(diǎn),合理布局。貝類PSP含量變化除與貝類的種類及地點(diǎn)有關(guān)外,其季節(jié)性變化也十分明顯。Chan報(bào)道,1978~1990年香港海域貝類PSP含量通常每年有一大一小兩個(gè)高峰期,主峰于3~4月份出現(xiàn)在港島的東南海域,次峰于7~11月份出現(xiàn)在港島西部珠江口水域。1992~1994年對(duì)香港市售海產(chǎn)貝類(來自當(dāng)?shù)睾．a(chǎn)養(yǎng)殖筏)的監(jiān)測(cè)結(jié)果還顯示,次高峰出現(xiàn)的時(shí)間扇貝為8~10月,貽貝為7~10月,而蛤和牡蠣的主峰分別出現(xiàn)在9月和11月,次峰出現(xiàn)在3~4月。因此,不同種貝類PSP的高峰期不盡相同,在不同年份,同種貝類的PSP含量季節(jié)變化也有一定差異。S2采樣點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果顯示,1998~1999年翡翠貽貝和華貴櫛孔扇貝PSP的峰值出現(xiàn)在冬春季,而S3采樣點(diǎn)則顯示1998年貝類PSP的峰值出現(xiàn)在春夏季,其它季節(jié)變化不大,保持在很低的水平。這與林燕棠等人的結(jié)果有一定的差別,他們經(jīng)過1990~1991年的調(diào)查后認(rèn)為,大亞灣的這兩種貝類PSP含量季節(jié)變化大致為春季最高,秋季最低。造成這種差異的原因可能有兩種,其一為如上所述的不同年份貝類PSP含量的季節(jié)變化差異,其二為調(diào)查方法的差異。他們采取的是每季節(jié)檢測(cè)一次的方法,檢測(cè)結(jié)果有一定偶然性,難以全面地代表貝類PSP含量的季節(jié)變化。當(dāng)然,本調(diào)查進(jìn)行的時(shí)間不長(zhǎng),積累的數(shù)據(jù)有限,這也是造成差異的原因。因而,零星、短期的調(diào)查難以全面真實(shí)反應(yīng)貝類養(yǎng)殖區(qū)PSP含量的分布變化規(guī)律,只有經(jīng)長(zhǎng)期、廣泛的調(diào)查后,才可建