動物微生物學(xué)及免疫學(xué)課件

細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)第一節(jié)細菌的大小與形態(tài)一、球菌（Coccus）球形或近似圓球形，有的呈矛頭狀或腎狀，單個球菌的直徑約在0.8～1.2μm左右。由于繁殖時細菌細胞分裂方向和分裂后細菌排列方式不同可分為：1.雙球菌：在一個平面上分裂成雙排列，如肺炎雙球菌、腦膜炎雙球菌。2.鏈球菌：在一個平面上分裂，成鏈狀排列，如溶血性鏈球菌。3.四聯(lián)球菌：在兩個相互垂直平面上分裂，以四個球菌排呈方形，如四聯(lián)加夫基菌。4.八迭球菌：在三個垂直平面上分裂，八個菌體重疊呈立方體狀，如藤黃八疊球菌。5.葡萄球菌：多個不規(guī)則平面上分裂，菌體無秩序堆積呈葡萄狀排列，如金葡菌。二、桿菌

菌體呈園柱狀，根據(jù)分裂繁殖后排列不同分為：單桿菌、鏈桿菌。菌體兩端多呈鈍圓形，少數(shù)兩端平齊（如炭疽桿菌），或尖細（如梭桿菌），或未端膨大呈棒狀（如白喉桿菌）。三、螺旋狀菌1.弧菌：菌體只有一個彎曲，呈弧狀或逗點狀。如霍亂弧菌。2.螺菌：菌體有數(shù)個彎曲，如鼠咬熱螺菌細菌的基本形態(tài)第二節(jié)細菌的結(jié)構(gòu)一、基本結(jié)構(gòu)細胞壁細胞膜細胞質(zhì)核體間體細胞壁

細胞壁為細菌表面比較復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。位于細胞最外層，包圍整個菌體的一層堅韌而具有彈性的膜壁，稱為細胞壁。細胞壁的結(jié)構(gòu)革蘭氏陽性菌：主要成分是肽聚糖又稱粘肽。占細胞壁干重的50～80%。還有大量磷壁酸。脂類含量少。革蘭氏陰性菌：細胞壁較薄，約10～15nm,粘肽含量極微，約占細胞壁干重的5～20%。不含磷壁酸。結(jié)構(gòu)比較復(fù)且蔬松。在粘肽層外有由脂蛋白、外膜和脂多糖三者組成的多聚物。附著于外膜的脂多糖由特異性多糖、核心多糖及類脂體A組成。2.細胞壁與染色反應(yīng)的關(guān)系與革蘭氏染色反應(yīng)的關(guān)系：革蘭氏陽性菌：細胞壁主要成分為粘肽，脂質(zhì)含量少，經(jīng)高濃度灑精脫色后，細胞壁通透性改變不大，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物仍被保留在細胞內(nèi)而呈蘭紫色染色結(jié)果。革蘭氏陰性菌：

細胞壁主要成分為脂質(zhì)，粘肽含量極少，經(jīng)高濃度灑精脫色后，細胞壁通透性增加，孔隙增大，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被洗出細胞外，最后被品紅復(fù)染為紅色。與抗酸染色反應(yīng)的關(guān)系抗酸染色概念與原理：結(jié)核分支桿菌細胞壁中含有分支桿菌酸或臘質(zhì)成分，二者具有抵抗鹽酸灑精的脫色的作用使菌體染為紅色，故稱結(jié)核分支桿菌染（抗酸染色）?？顾崛旧Y(jié)果：結(jié)核分支桿菌為紅色其它細菌為蘭色3.細胞壁與藥物反應(yīng)的關(guān)系

青霉素和頭孢菌素：能與細菌競爭合成胞壁過程所需的轉(zhuǎn)肽酶，使細菌不能合成完整細胞壁，而導(dǎo)致細菌死亡。4.細胞壁的功能保持細菌的一定形態(tài)。與物質(zhì)交換有關(guān),可溶性小分子自由通過。保護細菌免受外界不良環(huán)境的影響。

5.細胞壁缺陷型細菌L型細菌：細菌通過變異而喪失形成細胞壁的能力，呈高度多形態(tài)性的細菌變種原生質(zhì)體：在培養(yǎng)基中加入溶菌酶或青霉素使細胞壁完全除去剩下胞漿膜圍繞的軟性脆弱的個體。球狀體：經(jīng)溶菌霉處理后除去細胞壁的硬質(zhì)粘肽部分，形成的一個疏松外套圍繞的個體。二、特殊結(jié)構(gòu)

1、莢膜概念：細菌在生長繁殖過程中分泌到細胞外，包圍整個菌體的一種粘性物質(zhì)稱莢膜。莢膜厚度隨菌種不同而異微莢膜只能在電子顯微鏡下看見

一個莢膜內(nèi)含多個菌體者稱為菌膠團。成分：水分（90%），固體成分為多肽（炭疽桿菌）和多糖（肺炎雙球菌，志賀氏痢疾桿菌為多糖多肽質(zhì)類復(fù)合物）功能：抗干燥；菌種特征；具有Ag性；有莢膜的病原菌可增強毒力莢膜2、鞭毛概念：細菌由胞漿中的基礎(chǔ)顆粒生長出來，穿過胞漿膜、細胞壁，向外伸出，比菌體長若干倍，呈波狀彎曲的絲狀物，稱細菌的鞭毛。功能：運動器官；具有抗原性；有鞭毛的病原菌可增強毒力。類型（鞭毛位置數(shù)目排列方式是菌種的征）：3、芽胞（1）芽胞的概念：

某些桿菌生長發(fā)育到一定階段，由胞漿胞質(zhì)濃脫水縮后，在菌體內(nèi)形成的一個折光性強、通透性低、園形或卵園形的堅實小體，叫細菌芽胞。帶有芽胞的菌體稱芽胞體，未形成芽胞的菌體稱繁殖體。（2）形成條件及發(fā)芽：

芽胞形成必須具備一定條件，一般在營養(yǎng)缺乏時容易形成芽胞。菌種不同其形成條件亦不同。芽胞是細菌的休眠狀態(tài)，當環(huán)境條件適宜時，又可發(fā)芽成一個菌體。（3）芽胞的抵抗力及意義

芽胞對外界環(huán)境的抵抗力比繁殖體強得多，特別耐高溫和滲透壓作用，一般化學(xué)藥品也不容易滲透進去。其原因如下：①芽胞壁有多層結(jié)構(gòu)其通透性很低，化學(xué)藥品不易進入，所以消毒劑不能用于殺滅芽胞。

②含水量極少，其內(nèi)的酶類和蛋白質(zhì)不易遇熱凝固變性，故短時高溫仍不能殺滅芽胞（如破傷風芽胞可耐受1-3h煮沸）。③芽胞內(nèi)酶活性與新陳代謝極低，故干燥和營養(yǎng)缺乏時可長時間存活。芽胞在土壤中可存活幾年至幾十年，故土壤中經(jīng)常有破傷風梭菌芽胞和炭疽桿菌芽胞存在。芽胞對外界環(huán)境的抵抗力極強。被芽胞污染的器械等，用一般的化學(xué)消毒法不能徹底殺死芽胞。殺滅芽胞最有效的方法是高溫滅菌法（判斷高壓滅菌器是否有效常以能否殺滅芽胞為標準）。（4）芽胞類型：

芽胞類型是菌種的特征，一般有以下幾種：中央芽胞偏端芽胞頂端芽胞游離芽胞4、柔毛（菌毛）

借助于電子顯微鏡可以觀察到細菌的柔毛，它比鞭毛多而且短，分為普通柔毛和性毛兩種。一般為有鞭毛的細菌才具有。細菌生理細菌的化學(xué)組成細菌的物理性狀細菌的營養(yǎng)細菌的新陳代謝細菌的生長繁殖第一節(jié)細菌的化學(xué)組成

結(jié)合水水份（75-85%）自由水無機物干物質(zhì)

（15-25%）有機物第二節(jié)細菌的物理特性比面積大光學(xué)性質(zhì)多相膠體性質(zhì)滲透壓帶電現(xiàn)象布朗氏運動第三節(jié)細菌的營養(yǎng)一、營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與運轉(zhuǎn)擴散：物質(zhì)由高濃度向低濃度方向的運輸方式。分為：單純擴散易化擴散

主動運輸：物質(zhì)由低濃度向高濃度方向的運輸方式。它需要酶的作用，如滲透酶各周圍間隙蛋白，在運輸大分子物質(zhì)（糖、氨基酸、無機離子）中起著重要作用。運輸示意圖為：

主支運輸轉(zhuǎn)動方式

營養(yǎng)物質(zhì)釋放營養(yǎng)物質(zhì)滲透酶載體復(fù)合物細胞內(nèi)周圍間隙蛋白載體回位二、細菌的營養(yǎng)需要水分—新陳代謝所需媒介。含碳化合物—用來合成菌體的糖、蛋白質(zhì)、核酸等，亦作為能量來源。含氮化合物—用來合成菌體的各種含氮化合物。礦物質(zhì)—在細菌代謝中起著酶激活物的作用，用來構(gòu)成酶的輔基，對于維持原生質(zhì)膠體狀態(tài)和細胞滲透性具有較大作用。Vit—在代謝中起重要作用（如B簇Vit起著輔酶或輔基的作用。三、細菌的營養(yǎng)類型自養(yǎng)型這類細菌酶系統(tǒng)完善，能利用無機碳（CO2、C、H2CO3）合成菌體有機碳。分為光能和化能自養(yǎng)型兩類。異養(yǎng)型這類細菌酶系統(tǒng)不完善，只能利用有機碳作為養(yǎng)料。分為光能異養(yǎng)菌和化能異養(yǎng)菌兩大類。絕大多數(shù)病原菌都屬于化能異養(yǎng)菌。第四節(jié)細菌的新陳代謝一、細菌的酶胞外酶、胞膜酶、固有酶、適應(yīng)酶與醫(yī)學(xué)有關(guān)的酶類：卵磷脂酶、透明質(zhì)酸酶、膠原酶、溶纖蛋白酶、凝血漿酶、溶血素、尿素酶

二、細菌的呼吸1、細菌呼吸的概念：細菌借助于體內(nèi)的酶類，從物質(zhì)的氧化還原過程中獲得它所需要的能量的過程，稱細菌的呼吸。ATP2、細菌呼吸類型：專性需氧菌微需氧菌兼性厭氧菌厭氧菌專性厭氧菌各型細菌呼吸特點專性需氧菌：需充足O2，生長于表面.。微需氧菌：需低濃度O2，生長于表面以下數(shù)mm處。兼性厭氧菌：生長于整個培養(yǎng)基中。厭氧菌和專性厭氧菌：生長于培養(yǎng)基底部。3、厭氧菌培養(yǎng)的原理1、厭氧菌缺乏細胞色素和細胞色素氧化酶二者具有較高的氧化還原電勢，能氧化高電勢的化合物產(chǎn)生能量。在有氧環(huán)境中，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)多為氧化型狀態(tài)，氧化還原電勢隨之升高。故厭氧菌不能利用這些營養(yǎng)物質(zhì)，造成能量不足而不能生長。2、缺乏過氧化氫酶和過氧化物酶

細菌在有氧環(huán)境的代謝中常產(chǎn)生H2O2，這是一種氧化劑，有殺菌作用，缺乏二酶，故厭氧菌不能分解H2O2，而不能生長。3、有氧環(huán)境中－SH被氧化－SH是菌體許多酶類的輔酶（如CoA、琥珀酸脫氫酶、氨基酸轉(zhuǎn)移酶等），故厭氧菌不能生長。三、細菌的代謝產(chǎn)物（一）分解產(chǎn)物的檢測1．糖代謝測定糖發(fā)酵試驗：多糖經(jīng)胞外酶分解為雙糖單糖再經(jīng)胞內(nèi)酶分解為有機酸、醇、CO2和H2O。細菌分解糖的能力是不同的。

⊕—產(chǎn)酸不產(chǎn)氣

—產(chǎn)酸產(chǎn)氣

－—陰性VP試驗：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗及甲基紅試驗。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化（在堿性溶液中）生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。甲基紅試驗：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH＜5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗陽性。枸櫞酸鹽利用試驗：能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍（BTB）由淡綠轉(zhuǎn)為深藍，此為枸櫞酸鹽利用試驗陽性。2、蛋白質(zhì)代謝測定H2S試驗：含S氨基酸菌產(chǎn)生H2S與基中醋酸鉛PbS黑色沉淀物。吲哚試驗：色氨酸菌吲哚明膠試驗：明膠菌液化紫乳試驗：酪蛋白菌胨化（二）合成代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)毒素與酶色素抗生素細菌素第五節(jié)細菌的生長繁殖一、細菌生長繁殖的條件1、營養(yǎng)物質(zhì)供給細菌適量的H2O、糖類、蛋白質(zhì)或氨基酸、無機鹽及Vit等。2、溫度細菌生長的最適溫度隨菌種不同而異，一般病原菌要求與體溫相同，如牛羊病原菌需37℃，魚類病原菌則要求22℃。3、酸堿度（PH）PH對細菌發(fā)育影響很大，大多數(shù)病原菌最適酸堿度為PH7.2-7.6，少數(shù)細菌可在特殊PH條件下生長，如霍亂弧菌在PH6.4-9.6時均能生長（最適為7.8-8.0），乳酸桿菌在PH3.4-4.5時可生長，霉菌則在PH3.0-6,0生長良好。4、滲透壓細菌只有在等滲環(huán)境中才能生存。若環(huán)境滲透壓過高，則菌體被脫水造成質(zhì)壁分離；若環(huán)境滲透壓過低，則細菌臌脹破裂。5、氣體O2、CO2、N二、細菌的繁殖方式和速度多數(shù)細菌為橫分裂式繁殖（1→2→22→23→2?）。少數(shù)細菌如酵母進行出芽繁殖。近年來，電子顯微鏡觀察可見，某些細菌也存在有性結(jié)合。絕大多數(shù)細菌繁殖速度為15-30min一代。但菌種不同其繁殖速度亦不同，如大腸桿菌20min繁殖一代，結(jié)核桿菌較慢，需0.5-18h才能繁殖一代。三、細菌群體的人工培養(yǎng)用人工的方法，將細菌從自然界、動物體或病料中分離出來，其目的是為了研究細菌的形態(tài)、生理特性、生物學(xué)特性或制取細菌的某種代謝產(chǎn)物等。這對于傳染病的診斷、流行病學(xué)調(diào)查、菌苗制備、微生物的工業(yè)生產(chǎn)都具有重要意義。為此，了解和掌握細菌分離培養(yǎng)的有關(guān)基礎(chǔ)知識是十分必要的。（一）培養(yǎng)基的種類和常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的概念：將細菌所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)按一定比例混合在一起，并調(diào)節(jié)到適宜的PH，這種人工配制的適合細菌生長繁殖的細菌營養(yǎng)物，稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基必需符合以下條件：營養(yǎng)物適宜的PH環(huán)境溫度和滲透壓無菌培養(yǎng)基種類

1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有培養(yǎng)一般細菌的最基本成分。又分為：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三種。在液體（肉湯）培養(yǎng)基中，加入2-3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基，加入0.2-0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。2、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長因子等，以滿足營養(yǎng)要求較高的細菌生長需要。有的細菌還需加入特殊物質(zhì)，如結(jié)核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長3、選擇培養(yǎng)基

利用細菌對某種物質(zhì)敏感程度的不同，可在培養(yǎng)基中加入抑制某些細菌生長的藥物，而選擇性地讓欲分離的細菌旺盛生長的培養(yǎng)基如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌的生長，而不影響Gˉ菌的生長。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。

4、鑒別培養(yǎng)基

利用細菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同，可在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)和指示劑，即制為鑒別培養(yǎng)基，以測定不同細菌的生化反應(yīng)。5、厭氣培養(yǎng)基將培養(yǎng)基與空氣及氧隔離，或降低培養(yǎng)基中的氧化還原電勢，供厭氧菌生長。除去培養(yǎng)基中氧的方法：a、降低培養(yǎng)基中氧化還原電勢：如肝湯或加入谷胱甘肽、硫基醋酸鹽等。

b、化合去氧法：如焦性沒石子酸、好氧厭氧菌混合、種子發(fā)芽等。

c、隔絕阻氧法：如液體石臘等。（二）細菌群體的生長現(xiàn)象劃線接種分點接種涂抹接種液體接種穿剌接種傾注接種注射接種活體接種細菌的接種方法1、細菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象：

觀察細菌在平板上的菌落特征：形態(tài)、大小、邊緣、表面構(gòu)造（濕潤度和光滑度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板上的溶血現(xiàn)象（β溶血、α溶血）。菌落特征2、細菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛的細菌，沿穿剌線呈模糊羽毛狀生長。無鞭毛的細菌，沿穿剌線呈清晰的線狀生長。3、細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底沉淀、肉湯表面菌膜或菌環(huán)，以及有無汽泡等。⑸⑹⑺⑻⑴⑵⑶⑷3、細菌群體的生長曲線將一定數(shù)量的細菌接種在適宜的液體培養(yǎng)基中，在適宜溫度下孵育，每隔一定的時間取樣計算，如以時間為橫坐標，細菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標，則可繪制出一條曲線，稱細菌生長曲線。細菌生長曲線由四個時期組成：：遲緩期：細菌進入新環(huán)境，數(shù)目不增加，一般需2-6h。對數(shù)生長期：細菌代謝最旺盛繁殖快，細菌數(shù)以對數(shù)的速度增加，細菌抵抗力最強病原菌毒力最強，形態(tài)染色特征典型。此期需6-10h。穩(wěn)定期：細菌數(shù)目保持恒定不變，G?菌可變?yōu)镚ˉ菌。此期持續(xù)8h。衰退期：活菌數(shù)下降。

細菌（微生物）的分布細菌種類多，繁殖快，適應(yīng)環(huán)境的能力強，是自然界中分布最廣泛的一群微小生物。微生物在自然界中的分布可概括為：

“無孔不入，無處不有”

第一節(jié)土壤中的細菌土壤是細菌生存的天然場所（因為土壤中有水分、營養(yǎng)物質(zhì)、空氣、一定的PH環(huán)境和溫度）自然界中，以土壤的含菌量（種類）最多，土壤素有“天然培養(yǎng)基”之稱。土壤也是一切自然環(huán)境中細菌的總發(fā)源地，也是人類利用細菌的主要來源。在肥沃的土壤中，每克土壤含菌量達幾十億-幾仟億（沙漠含菌量僅10萬/g）。細菌在土壤各層分布不均：表面含菌量少；距表面10-20cm土壤含菌量最多土壤中的細菌多數(shù)為非病原菌，它們在自然界的物質(zhì)循環(huán)中起著重要的作用，是動植物與人類生存的必要條件之一。土壤中僅有少數(shù)病原菌，它們來自人和動物體（糞、尿、痰、尸體等）。多數(shù)病菌在土壤中很能容易死亡。主要為球菌和芽胞桿菌，如炭疽桿菌、破傷風桿菌、氣性壞疽可長期存活。所以，當人體創(chuàng)傷處污染泥土?xí)r，要嚴防破傷風和氣性壞疽感染。第二節(jié)空氣中的細菌一、空氣細菌來源

空氣中的細菌來自土壤、塵埃和高聲說話、噴啑及咳嗽飛沫。在人口密集的公共場所或醫(yī)院，空氣中細菌種類和數(shù)量顯著增多。二、空氣中的病原菌及空氣感染

空氣中一般沒有病原菌，但疫區(qū)或患者周圍空氣中有大量病原菌。如乳牛的唾液沫（結(jié)核）隨咳嗽或噴啑可噴射5m遠，且飄浮很長時間。帶有病原菌的塵埃也會飛揚到大氣中?？諝庵蟹遣≡３Ｎ廴舅幬镏苿?、培養(yǎng)基、生物制劑（品），引起食品、飼料變質(zhì)以及造成手術(shù)感染。所以在外科手術(shù)、細菌接種、制備生物藥劑及生物制品等工作中，應(yīng)嚴格無菌操作杜絕污染。空氣細菌衛(wèi)生檢查有時用甲型溶血性鏈球菌作為指示菌，表明空氣受到人上呼吸道分泌物中微生物的污染程度。在疫區(qū)或患者周圍空氣中有大量病原菌。如乳牛的唾液沫（結(jié)核）隨咳嗽或噴啑可噴射5m遠，且飄浮很長時間。帶有病原菌的塵埃也會飛揚到大中。三、空氣消毒法1、紫外線照射：在工作前照射0.5-1h，停照后0.5h方可入內(nèi)工作。2、化學(xué)噴霧：用3-5%來蘇兒或石碳酸（酚）或2%乳酸葉霧。3、化學(xué)藥物熏蒸：①KMnO4+福爾馬林→按1：2混合熏蒸，即10003，250g（高）+500ml（福）→熏蒸24h。②1-2ml乳酸/㎡熏蒸。

第三節(jié)水中的細菌一、水中細菌來源二、水中的病原菌三、水的自潔作用四、水的細菌學(xué)檢查水的自潔作用①水中泥沙沉降作用；②水面日光紫外線照射；③水中營養(yǎng)物耗盡；④水中生物拮抗作用；⑤水中噬菌體滅菌作用；⑥原蟲澡類吞噬作用；⑦清潔支流沖淡作用。水質(zhì)細菌學(xué)檢查三項指標指標名稱意義國家標準菌總數(shù)檢定1ml自來水中所含各種活細菌數(shù)<100個大腸桿菌價能檢出1個大腸桿菌的最小自來水量>300ml大腸桿菌指數(shù)在1000ml自來水中檢出的大腸桿菌數(shù)<3個第四節(jié)細菌在動物體的分布人體細菌分布

正常菌群及其意義

正常情況下，寄居于動物體對機體無害且有益和必需的微生物類群，稱為正常菌群或正常微生物群。正常菌群對機體的意義表現(xiàn)在三個方面：

正常菌群對機體的有利作用正常菌群轉(zhuǎn)化為條件致病菌菌群失調(diào)及菌群失調(diào)癥1、正常菌群對機體的有利作用①促消化作用：

將不溶必蛋白和糖類轉(zhuǎn)化為可溶性狀態(tài)，促進機體吸收。②營養(yǎng)作用：

大腸桿菌及乳鏈球菌能合成VitB1、B12泛酸、葉酸及VitC、K等，供機體利用；雙岐桿菌產(chǎn)酸造成酸性環(huán)境可促進對VitD、Ca、Fe的吸收。

③生物屏障作用：

即對病原菌的拮抗作用，如大腸菌素可抑制痢疾桿菌生長；唾液鏈球菌產(chǎn)生的H2O2抑制腦膜炎球菌生長。④免疫作用：

微生物具有免疫原性、促分裂和佐劑的作用?？韶菁C體免疫系統(tǒng)發(fā)育和成熟。2、正常菌群轉(zhuǎn)化為條件病原菌①機體免疫機能低下：如大面積燒傷，過度疲勞，受涼，長期患消耗性疾病。②正常菌群寄居部位發(fā)生變遷：如外傷，手術(shù)，留置導(dǎo)尿管等使大腸桿菌進入腹腔、泌尿道或血液等。③不適當?shù)目咕厮幬镏委煟喝玳L期或濫用抗菌素治療。33、菌群失調(diào)及菌群失調(diào)癥菌群失調(diào)：指機體、菌群、環(huán)境三者之間的動態(tài)平衡發(fā)生改變，導(dǎo)至體內(nèi)正常菌群中各種細菌的數(shù)量和比例發(fā)生大幅度的變化，生態(tài)體系表現(xiàn)出的不平衡狀態(tài)。菌群失調(diào)癥：指嚴重的菌群失調(diào)使機體發(fā)生功能紊亂表現(xiàn)出明顯臨床癥狀者。菌群失調(diào)癥又叫菌群交替癥（二次感染）。菌群失調(diào)經(jīng)常發(fā)生而菌群失調(diào)癥則少見?；级馗腥镜臋C體抵抗力很弱，細菌對抗菌素藥物不敏感，治療難度大，應(yīng)嚴加預(yù)防，避免發(fā)生。第五節(jié)畜產(chǎn)品中的細菌1、乳汁中的細菌：健康動物乳汁中細菌數(shù)量和種類少。乳汁易被污染，其原因(來源）有：皮毛、容器工具、擠奶員衛(wèi)生習(xí)慣及擠奶前的塵埃等。傳染病和乳房炎病畜帶金葡、rts、結(jié)核、布氏桿菌等。

2、肉（蛋）中的細菌：健康肉（蛋）無菌。但污染環(huán)節(jié)多。傳染病肉含相應(yīng)病原菌（尤其是蛋中的沙門氏菌）。第六節(jié)細菌在物質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用外界環(huán)境因素對細菌的影響致病菌可隨污染的環(huán)境經(jīng)一定途徑侵入機體引起疾病（傳染?。挥挚蓮幕疾游矬w、帶菌動物、及病亡動物體排出污染環(huán)境。因而，細菌在自然界中受許多環(huán)境因素的影響，其生命活動與外界因素有著及其密切的關(guān)系。當環(huán)境條件適宜時，能促進細菌的生長繁殖，當環(huán)境條件改變時，其代謝隨之發(fā)生相應(yīng)變化。由于外因素作用的強度和時間的不同，可引起細菌的變異、生長繁殖抑制、甚至死亡。概念

消毒：指用化學(xué)或物理的方法，殺滅物體中的病原微生物的方法。滅菌：指用物理或化學(xué)的方法，殺滅物體中所有微生物的方法。防腐：指用化學(xué)藥品防止或抑制細菌生長繁殖的方法（又稱抑菌）。無菌：是沒有活菌的意思，指采取杜絕一切微生物進入動物體或物體的方法（無菌技術(shù)或無菌操作）這是防止手術(shù)感染及人工培養(yǎng)杜絕雜菌污染的有效措施。抑菌作用：某些物質(zhì)或因素具有阻礙細菌生長的作用。殺菌作用：某些物質(zhì)或因素具有殺滅細菌生長的作用?？咕饔茫核幬锞哂械囊志驓⒕饔?。過濾除菌：通過濾器過濾后，液體或氣體中無任何細菌存在的方法。

第一節(jié)物理因素一、溫度對細菌的影響㈠低溫對細菌的影響細菌對寒冷的抵抗力較強。因此，低溫不能用于滅菌。

低溫常用于保存菌種。但是，反復(fù)凍融對微生物不宜。各種細菌對低溫的抵抗力亦不同。溫度㈡高溫對細菌的影響高溫對細菌有明顯的至死作用。影響高溫滅菌的因素：細菌對高溫的耐受性與細菌種類、發(fā)育時期、菌體濃度及細菌所處界質(zhì)有關(guān)。

分類

1、干熱滅菌法：

滅菌對象為玻璃器皿、金屬器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。分類：燒灼、焚燒滅菌法熱空氣滅菌法紅外線、微波2、濕熱滅菌①煮沸消毒法：溫度在100℃左右，3-5min殺滅繁殖體，芽胞煮沸3h以上。若在水中加入2-5%酚，則10-15min可殺滅芽胞；若在水中加入1-2%Na2CO3，可提高沸點既可促進芽胞的摧毀，亦可防止生銹。滅菌對象:飲水、玻璃器皿、外科器械②流通蒸汽消毒法：又叫常壓蒸汽消毒法，用普通蒸籠或阿諾氏（Arnold）流通蒸汽滅菌器，在1個大氣壓下，用100℃左右的水蒸汽，30min，可殺滅繁殖體。用于食品、食具及不耐用高溫的物品消毒。③間隙滅菌法：利用連續(xù)3次的流通蒸汽消毒法，達到徹底滅菌的目的。即將待滅菌物品放入蒸籠（滅菌器）內(nèi)，加熱（約100℃）15-30min，取出置室溫24h，次日重復(fù)滅菌。連續(xù)3次（10磅20min）。用于一些不宜100℃以上，溫度滅菌物質(zhì)，以達到殺滅芽胞的目的。常用于含糖、牛乳、血清等培養(yǎng)基的滅菌。④巴氏消毒法：指利用不太高的溫度，殺死食品中的病原菌及一般雜菌，同時又不致嚴重損害營養(yǎng)物質(zhì)和風味的消毒方法。牛奶（酒類）常用此法殺死其中的結(jié)核桿菌或巴氏桿菌。方法有3：一是61.1-62.8℃，15-30min。二是71.7℃，150-30s。三是96℃，6S⑤高壓蒸汽滅菌法：利用密閉高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌加熱后隨著鍋內(nèi)的壓力持續(xù)必增高，溫度隨之上升，殺菌力亦隨之增強，而達到殺菌和殺滅芽胞的目的。常用15磅（121℃）30min普通培養(yǎng)基生理鹽水玻璃器皿手術(shù)器械工作服實驗動物尸體滅菌對象第二節(jié)化學(xué)因素對細菌的影響一、消毒劑消毒劑使用范圍：體表（皮膚、粘膜、傷口）器械排泄物周圍環(huán)境

消毒劑殺菌機制：①使菌體蛋白變性沉淀。②與菌體內(nèi)的酶類結(jié)合，影響細胞代謝或酶喪失活性。③降低菌細胞的表面張力，使胞漿膜通透性示增加，菌體破裂溶解。常用消毒劑種類酸類消毒劑堿類消毒劑其它消毒劑H+OH--SH醇脫水Hg（一）酸類消毒劑無機酸（三大強酸）具有腐蝕性。但硼酸腐蝕性較?。⒕σ嗳酰Ｓ?-2%硼酸用粘膜消毒。有機酸如甲酸，醋酸，乳酸等均有殺菌作用，常用乳酸水蒸氣或溶液殺滅細菌或病毒。

（二）堿類消毒劑堿類消毒劑對所有細菌及芽胞和病毒都有殺滅作用。尤其常用于病毒的消毒：

10-20%石灰乳

20-30%草木灰水

1-3%NaOH（三）其它常用消毒劑0.1%升汞用于非金屬器械消毒0.1%KMnO4和3%H2O2用于粘膜和創(chuàng)傷消毒70－75%乙醇用于體表和體溫表的消毒1－3%碘液用于粘膜消毒5－10%碘液可殺滅放線菌0.2－0.5%過氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纖維消毒及皮膚消毒。

3－5%酚、3-5%來蘇兒用于環(huán)境消毒或空氣消毒。甲醛殺菌力較強，常用于器械消毒。40%甲醛溶液用于烈性傳染病的消毒，

4－10%甲醛溶液浸泡30min可殺滅繁殖體及真菌。20%甲醛溶液浸泡6h以上，可殺滅芽胞體。消毒房間：1－2ml福爾馬林/m3加等量水薰蒸或加入KMnO4。二、防腐劑用于防腐的藥物稱為防腐劑。生物制劑（如疫苗、類毒素、抗毒素等）中常加入防腐劑，以防止雜菌生長。常用防腐劑有0.5%石炭酸、0.01%硫柳汞和0.1～0.2%甲醛等。

第三節(jié)生物因素對細菌的影響寄生；一種生物從另一種生物獲營養(yǎng)，賴以生存，并對后者呈現(xiàn)有害作用者。共生：兩種生物生活在一起，互為有利，互不損害者。拮抗：兩種生物生活在一起，一種生物能產(chǎn)生一種對他種生物呈現(xiàn)毒害作用的物質(zhì)，抑制或殺滅他種生物者。一、噬菌體噬菌體是能感染細菌、放線菌、真菌、螺旋體的一類病毒。噬菌體分布廣泛。噬菌體有嚴格的宿主特異性，只寄居于易感宿主菌體內(nèi)。噬菌體對理化因素的抵抗力較強。噬菌體感染菌細胞后可引起細胞裂解。

二、抗生素某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的一類殺滅或抑制另一種微生物的化學(xué)物質(zhì)叫抗生素。抗生素來源：主要為放線菌，少數(shù)為細菌和真菌或某些植物?？股氐淖饔迷?/p>

①抑制細菌細胞壁的合成，如青霉素②影響細菌細胞膜的通透性，如多粘菌素③抑制菌體蛋白質(zhì)的合成，如氯、四④抑制細菌核酸合成，如灰黃霉素。細菌的致病性與傳染明確幾個概念：

第一節(jié)病原菌的致病性一、細菌的毒力（一）侵襲力指病原菌突破機體的防御屏障，在機體內(nèi)生長繁殖，蔓延擴散的能力。侵襲力對機體無直接毒害作用。侵襲力由病原菌的毒性酶和莢膜構(gòu)成。1．細菌的酶2．莢膜（二）毒素1、外毒素病原菌在生長繁殖過程中分泌到周圍環(huán)境中的一種有毒代謝產(chǎn)物。產(chǎn)生外毒素的細菌種類：某些G+菌如破傷風、白喉、肉毒、魏氏梭菌等及少數(shù)G-菌如志賀氏痢疾桿菌、的N毒，霍亂弧菌的腸毒素等。外毒素特點：

⑴毒性強，小劑量即可致死易感機體。⑵對易感動物組織細胞有高度的特異性，常常選擇性地作用于某些組織上或器官，引起特殊的病變。⑶外毒素是一種蛋白質(zhì)。一切破壞蛋白質(zhì)的因素都有可能使之變性凝固，不耐熱，60-70℃20min即被破壞或減弱。⑷溶于水，⑸具有抗原性。⑹外毒素經(jīng)0.2-0.5%甲醛處理后可喪失毒性，而仍然保留其抗原性制成類毒素。外毒素特點2、內(nèi)毒素

概念：

存在于某些G-菌細胞壁的最外層，是菌體的結(jié)構(gòu)組成部（脂體A，在生活狀態(tài)時不釋放出來，只有當菌細胞自溶、死亡或用人工的方法（如反復(fù)凍融、加熱、長時間碾磨、超聲波等），使菌體裂解后，才釋放出來，故稱內(nèi)毒素。

內(nèi)毒素的特點：

⑴毒性低。⑵無特異性致病作用對組織器官無選擇性。⑶內(nèi)毒素為類脂—多糖—蛋白質(zhì)復(fù)合物，主要成分是脂多糖（簡稱LPS），故為易被蛋白酶破壞⑷性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱性強，不被100℃1h所破壞。⑸抗原性弱。⑹內(nèi)毒素經(jīng)甲醛處理后不能制成類毒素。外毒素與內(nèi)毒素性質(zhì)的主要區(qū)別區(qū)別要點外毒素內(nèi)毒素存在部位由活細菌產(chǎn)生而釋放或分泌到菌體外為細胞結(jié)構(gòu)成分，菌體溶解后釋放細菌種類以G+菌多見以G-菌多見化學(xué)組成蛋白質(zhì)脂多糖理化特性不耐熱，不穩(wěn)定，易受氧化劑破壞耐熱，穩(wěn)定，能被酸水解毒性作用強。對組織器官具有高度特異性癥狀獨特弱。無特異中毒癥狀抗原性強。剌激產(chǎn)生大量抗弱。甲醛處理制成類毒素不能制成類毒素二、病原菌毒力的測定最小致死量（MLD）：能使特定動物于感染后的一定時間內(nèi)發(fā)生死亡的最小活微生物量或毒素量。半數(shù)死量（DL50）：在特定時間內(nèi)能使半數(shù)實驗動物于感染后發(fā)生死亡的活微生物量或毒素量。第二節(jié)病原菌引起傳染的必要件1、病原菌的毒力與數(shù)量2、易感動物3、傳染途徑（侵入門戶）呼吸道傳染消化道傳染皮膚粘膜創(chuàng)傷傳染接觸傳染節(jié)肢動物傳染第三節(jié)感染的發(fā)生發(fā)展和結(jié)局一、感染的來源

內(nèi)源性外源性二、感染的結(jié)局一是機體免疫力將病原微生物消滅，使傳染告終，機體獲得痊愈，并遺留有或強或弱、或長或短的免疫力。二是病原菌戰(zhàn)勝機體的免疫力，毒害機體，以至造成長期病癥，甚至死亡。三、感染的類型1、顯性傳染概念：又叫臨床感染或傳染病，指侵入機體的病原菌毒力強，數(shù)量多，而機體的免疫力薄弱時，則病原菌在機體內(nèi)生長繁，產(chǎn)生毒素，以致使機體組織細胞受到嚴重損害，生理功能紊亂，并出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，稱明顯傳染。類型：鏈接局部傳染全身性傳染

局部傳染病原菌侵入機體后，在一定部位定居繁殖，產(chǎn)生毒性產(chǎn)物，引起局部病理損害的過程。原因為，病原菌毒力不強數(shù)量不多，機體的免疫力較強而將其限制于局部。

全身傳染指侵入機體的病原菌毒力強，數(shù)量多，機體免疫力薄弱時，病原菌向周圍擴散和蔓延，至適宜病原菌生長的靶器官，引起全身性傳染，并出現(xiàn)全身臨床癥狀者，稱全身傳染。病原菌在全身性傳染的過程中有以下幾種病理表現(xiàn)菌血癥：病原菌自局部病灶侵入血流，并不在血液中繁殖，只能短暫經(jīng)過，但也能傳至機體的其它部位。如傷寒病初期。敗血癥：病原菌侵入血液，并在血中大量生長繁殖，造成機體嚴重的病理損害，引起顯著的臨床癥狀。毒血癥：病原菌在局部生長繁殖過程中產(chǎn)生的毒素侵入血流和淋巴液，運至敏感的組織或器官，引起獨特的中毒癥狀，而細菌不進入血流，如破傷風。膿毒血癥：于感染化膿菌發(fā)生敗血癥的同時，化膿菌經(jīng)血液循環(huán)到達其它臟器或組織，引起化膿性全身病變的傳染

2、隱性感染當入侵機體的病原菌數(shù)量不多毒力較弱，機體有較強的免疫力時，病原菌被迅速消滅或部分在機體一定部位生長繁殖，引起輕度病理損害，但機體生理功能無破壞，不出現(xiàn)或僅出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀，稱隱性感染。

隱性感染的意義：通過隱性感染，機體仍可獲得一定程度的特異性免疫力，在防止同種病原菌感染上有重要意義。機體可隨時向環(huán)境排出病原菌。故隱性傳染在傳染病的發(fā)生和蔓延方面有著重要的臨床意義。

3、帶菌狀態(tài)在隱性感染或傳染痊愈后，病菌在體內(nèi)繼續(xù)存在并不斷排出體外者處于帶菌狀態(tài)的機體稱帶菌者。帶菌者是體內(nèi)帶有病原，但無臨床癥狀。這種機體不斷排出病原菌，不易引起人們的注意，常成為傳染病流行的重要傳染源。分為：健康帶菌恢復(fù)期帶菌者第四節(jié)病原菌的排出途徑在局部傳染時，因病灶破潰隨分泌物和膿汁排出病原菌。在全身性傳染時，發(fā)病動物機體的各種分泌物和排泄物（如鼻漏、眼漏、尿液、糞便、乳汁等）都能排出大量病原菌，是極其危險的傳染源，務(wù)必引起高度重視，以避免傳染病的蔓延。細菌感染的診斷一、檢測細菌或其抗原直接涂片顯微鏡檢查分離培養(yǎng)生化反應(yīng)抗原檢測二、檢測抗體微生物（細菌）的分類分類系統(tǒng)：界、門、綱、目、科、屬、種、型細菌的遺傳與變異第一節(jié)細菌的變異現(xiàn)象形態(tài)變異

形態(tài)變異生理變異菌落的變異第二節(jié)細菌的遺傳變異機制病毒

概述

一、病毒的概念：病毒（Viruses）是一類結(jié)構(gòu)簡單，只含一種核酸（DNA或RNA）、對抗生素不敏感、營嚴格寄生生活、非細胞形態(tài)的最微小生物。病毒特點個體微小結(jié)構(gòu)簡單專性寄生抵抗力特殊第一節(jié)病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)一、病毒的大小與形態(tài)磚形（痘病毒）彈狀（狂犬病病毒）水泡性口炎病毒）球形（絕大多數(shù)病毒）二、包含體病毒在宿主細胞內(nèi)增殖后，于細胞中形成的一種用光學(xué)顯微鏡即可看到的特殊“斑塊”三、病毒的結(jié)構(gòu)與功能

1、核酸（芯髓）：為單股或雙股RNA（或DNA），導(dǎo)入活細胞后可形成新的完整病毒，并致細胞病變。2、衣殼：包圍芯髓的蛋白質(zhì)稱衣殼，為二十面體或螺旋對稱。具有抗原性、保護作用、吸附作用。核酸和衣殼統(tǒng)稱為核衣殼。3、襄膜：由脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和糖類組成，故對乙醚敏感。有的病毒在襄膜外還有剌突。4、觸須：某些無襄膜的病毒所具有。第二節(jié)病毒的增殖病毒缺乏生物細胞所具有細胞器、新陳代謝必須的酶系統(tǒng)和能量。其增殖，只能靠宿主細胞提供原料、能量、生物合成場所（細胞器），在病毒核酸指控下，合成病毒的核酸與蛋白質(zhì)等成分，然后在宿主細胞內(nèi)裝配為成熟的具有感染性的病毒體，再以特定的方式釋放到細胞外，感染其它易感細胞，病毒的這種增殖方式稱為復(fù)制。所需時間稱為復(fù)制周期。病毒復(fù)制的過程一、吸附首先是病毒與宿主細胞之間通過靜電引力發(fā)生的非特異性吸附。其次是病毒與宿主細胞之間有選擇性和有特殊親和力的特異性吸附。它是病毒感染具有明顯選擇性的理論基礎(chǔ)。二、穿入①通過胞飲作用進入細胞，如牛痘病毒②通過病毒與細胞膜融合后進入細胞，如皰疹病毒③病毒與細胞膜上受體作用進入細胞，如脊髓灰質(zhì)炎病毒④病毒直接完整進入細胞內(nèi)，如呼腸孤病毒三、脫殼病毒脫殼包括脫去襄膜和衣殼兩個過程①脫襄膜，有的在與細胞膜融合時發(fā)生并向胞漿內(nèi)釋放核衣殼如皰疹病毒；有的在吞飲泡內(nèi)發(fā)生如痘病毒。②脫衣殼，發(fā)生在吞飲泡內(nèi)或細胞漿內(nèi)。四、生物合成包括核酸和蛋白質(zhì)合成。一般為：DNA病毒（除痘病毒和虹病毒外）在細胞核中復(fù)制。RNA病毒（含痘病毒和虹病毒）在細胞質(zhì)中復(fù)制。病毒脫殼后釋放核酸，這時在細胞內(nèi)查不到具有感染性的完整病毒子，此期稱隱蔽期或黑暗期。

五、裝配及釋放①無襄膜的DNA病毒如腺病毒，核酸與衣殼在細胞核內(nèi)裝配，細胞溶解后一次釋放。②無襄膜的RNA病毒如脊髓灰質(zhì)炎病毒，核酸與衣殼在細胞漿內(nèi)裝配，細胞溶解后一次釋放。

③有襄膜的DNA病毒如單純皰疹病毒，在核內(nèi)裝配為核衣殼。釋放方式有三種：一是移至核膜以芽生方式進入胞漿，獲得核膜成分作為襄膜。并由此漸漸釋放到細胞外；二是通過核膜裂隙進入胞漿，從胞漿膜上獲得襄膜，沿核周圍與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相通的部位從細內(nèi)逐漸釋放。三是復(fù)合病毒如牛痘病毒的DNA與蛋白質(zhì)均在胞漿中合成，形成“未成熟顆?！苯?jīng)再分化成為成熟顆粒，其中一部分通過細胞表面釋放，大部分則通過細胞與細胞之間接觸而擴散釋。④有襄膜的RNA病毒如副流感病毒，核酸與蛋白質(zhì)在胞漿中裝配螺旋狀核衣殼，并在感染過程中使病毒特異性Ag成分（如血凝素、神經(jīng)氨酸）整合于細胞膜上。當病毒以芽生方式通過細胞膜時，獲得襄膜，并產(chǎn)生剌突。第三節(jié)干擾現(xiàn)象與干擾素一、干擾現(xiàn)象一種病毒（活病毒或滅活病毒）作用于宿主細胞后，可導(dǎo)致另一種在免疫學(xué)上有關(guān)或無關(guān)的病毒株不能在其中正常增殖的現(xiàn)象，稱病毒的干擾現(xiàn)象。二、干擾素概念：干擾素（IFN）是病毒或其它因素如干擾素誘生劑，剌激脊椎動物組織細胞（體外或體內(nèi)）產(chǎn)生的一種能干擾病毒增殖的特殊蛋白質(zhì)。產(chǎn)生機理：⑴病毒與細胞DNA中干擾素基因的“抑制物”結(jié)合，從而消除抑制作用，導(dǎo)致產(chǎn)生特異性mRNA合成干擾素。⑵干擾素被釋放以后進入另一個細胞，與細胞“作用因子約束物”結(jié)合導(dǎo)致產(chǎn)生干擾素。作用機制：

干擾素的作用機制不象抗病毒那樣直接滅活病毒。干擾素對病毒體身沒有作用，既不能直接阻止其吸附或穿入，也不能阻斷釋放，而是作用于宿主細胞，使其產(chǎn)生抗病毒蛋白質(zhì)，這種蛋白質(zhì)附著于細胞的核蛋白體上，選擇性地抑制病毒mRNA譯制為病毒蛋白質(zhì)，從而影響病毒結(jié)構(gòu)蛋白和酶類的合成，使復(fù)制受到阻抑而呈現(xiàn)抗病毒的作用。即最初感染的細胞由于病毒核酸的剌激被誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素，它透過細胞膜向外擴散并進入血液循環(huán)進入其它細胞。干擾素具有廣譜抗病毒作用，又具有細胞種屬特征。即某一種動物產(chǎn)生的干擾素只能保護同種屬或近緣種屬動物細胞。干擾素是一種活性很強的生物制劑，但對沒有Ag性（或Ag很弱），故治療病毒性疾病。亦具有抗腫瘤和調(diào)節(jié)免疫機能的作用。作用機制第四節(jié)病毒的抵抗力與分類一、病毒對理化因素的抵抗力病毒對理化因素的抵抗力與細菌繁殖體相似用理化因素使病毒喪失感染性的過程稱滅活滅活后的病毒仍然保留其它生物學(xué)活性1、溫度：病毒耐寒不耐熱。大多數(shù)病毒可在4℃以下良好生存，尤其在干冰溫度（－70℃）和液氮（－196℃）下更能長期保持其感染性。而大多數(shù)病毒于55-60℃10－30min滅活，100℃迅速滅活。有的在室溫下只能存活數(shù)小時（流感、麻疹病毒），有的在自然界中可存活數(shù)日或數(shù)月（腸道病毒群、肝炎病毒）。但豬瘟Vi可耐受50℃2h，70℃1h，100℃0.5－1h。2、PH：大多數(shù)病毒在PH6－8的范圍內(nèi)保持穩(wěn)定。在PH<5.0>9.0的環(huán)境中迅速滅活。病毒種類不同對PH的穩(wěn)定性亦不同。例如呼腸孤病毒能抗PH3.0；口蹄疫病毒在PH6.0－6.5及8.0－9.0迅速滅活，豬水泡病毒在PH2.2，24h仍具有感染性。3、氧化劑：多數(shù)病毒對氧化劑敏感，常用H2O2、K2MO4、漂白粉、碘化物等滅活病毒。酚可用于幾種病毒的消毒，但不宜于脊髓灰質(zhì)炎病毒。4、甘油和抗生素：常用50%甘油生理鹽水并加“雙抗”保存病毒病料。二、病毒的分類1、按病毒的性質(zhì)綜合來分類：雙股或單股、有無包膜、立體或螺旋體對稱、子粒多少、顆粒大小、對乙醚敏感性等方面對病毒分類。2、依傳染途徑不同分類：呼吸道病毒、腸病毒、蟲媒病毒等。3、根據(jù)寄生宿主不同分類：細菌病毒、植物病毒、動物病毒。第五節(jié)病毒的分離培養(yǎng)一、病料的采集與送檢盡早采取病料部位適宜

冷藏速送

二、病毒的分離三、分離病毒的鑒定細胞致病作用(CPE)紅細胞吸附現(xiàn)象干擾現(xiàn)象

非特異性免疫機制非特異性免疫：又叫先天性免疫，指動物生來就對某些病原微生物及其產(chǎn)物的不感受性。非特異性免疫的特點：具遺傳性免疫力較鞏固發(fā)揮作用快，作用范圍廣是特異性免疫的基礎(chǔ)起著一道防御線的作用二、非特異性免疫的表現(xiàn)種的免疫品種的免疫個體的免疫三、非特異性免疫的機制體表的防御功能體表屏障機械阻擋和排除作用淋巴結(jié)屏障血腦屏障分泌物的局部抗菌作用正常菌群的拮抗作用炎癥及吞噬作用

正常體液因素的作用組織的不感受性

抗原與抗體

第一節(jié)抗原一、抗原的概念與特性凡能剌激機體產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細胞，并能與相應(yīng)的抗體和致敏淋巴細胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)，稱抗原或叫免疫原，即具有抗原性的物質(zhì)叫抗原。抗原的特性：免疫原性：抗原能剌激機體產(chǎn)生抗體和致敏感淋巴細胞的特性，即產(chǎn)生免疫應(yīng)答的特性。反應(yīng)原性：指抗原能與相應(yīng)的抗體和致敏淋巴細胞（即能與相應(yīng)的免疫反應(yīng)產(chǎn)物）發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的特性。

二、抗原的性質(zhì)異物性大分子膠體特異性完全性三、抗原的特異性與類屬性四、抗原類型完全抗原和半抗原

細菌抗原

異種動物血清

同種異體組織細胞抗原

自身抗原

天然抗原與人工抗原

異嗜性抗原和腫瘤抗原

第二節(jié)抗體

機體的免疫系統(tǒng)在Ag剌激下產(chǎn)生，并能與相應(yīng)Ag發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白稱抗體。主要存在于血清、淋巴液、腦脊液、粘膜分泌物和組織液中，尤其以血清中含量最高。含有Ig的血清叫抗血清（免疫血清）。Ig主要存在于血清Υ球蛋白部分。一、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)

免疫球蛋白單體分子由四條肽鏈構(gòu)成：兩條重鏈（H鏈）兩條輕鏈（L鏈）形成“T”或“Y”字形結(jié)構(gòu)對稱

7S單體分子結(jié)構(gòu)示意圖

ss

ss

v區(qū)

ss

c區(qū)

ss

樞紐區(qū)

Ig單體分為兩個端：

Ig單體中四條肽鏈兩端游離的氨基或羧基的方向是一致的，分別命名為：多肽鏈的氨基端（N端，L鏈的1/2與H鏈的1/4）多肽鏈的羧基端（C端，L鏈的1/2和H鏈的3/4）Ig單體上分為三個區(qū)域：可變區(qū)（V區(qū)）：即抗原結(jié)合區(qū)或抗原結(jié)合部。1/2L鏈的和1/4H鏈的1/4。穩(wěn)定區(qū)（C區(qū)）：氨基酸排列順序比較穩(wěn)定。L鏈的1/2和H鏈的3/4。

樞紐區(qū)（絞鏈區(qū)）：使抗體分子由“T”字形變成“Y”字形，暴露補體結(jié)合點。穩(wěn)定區(qū)的作用①激活補體②具有抗原性，這是制備第二抗體和標記抗體的重要基礎(chǔ)③吸咐吞噬細胞④在IgE能與肥大細胞和堿性粒細胞結(jié)合木瓜蛋白酶作用于C區(qū)

使Ig裂解為三個片段：

兩個單價的具有抗體活性、能結(jié)合抗原的Fab段一個包含補體結(jié)合部及與親細胞性功能區(qū)的Fc可結(jié)晶片段

二、抗體的性質(zhì)“兩價抗體”

分子量大

雙重性

不均一性

破壞蛋白質(zhì)的因素能破壞抗體三、免疫球蛋白的功能

與特異性抗原結(jié)合激活補體結(jié)合組織細胞通過胎盤四、抗體的分類

按作用對象：按理化特性：按來源：抗細菌性IgIgG天然Ig

抗病毒性IgIgA免疫Ig

抗外毒素IgIgM自身Ig

親細胞性IgIgE

抗IgIgD

按反應(yīng)表現(xiàn)：凝集素、沉淀素、補體結(jié)合Ig五、五種Ig的特性IgG

由一個7s單體構(gòu)成。IgG約占血清Ig總量的75%。IgG在血清中出現(xiàn)稍遲，但含量高，維持時間長，分解緩慢，對構(gòu)成機體的免疫力起著重要的作用?？煽咕⒖共《?、抗毒素，是體液免疫的主要因素。診斷用的血清所含抗體主要為IgG。IgG是人唯一能通過胎盤傳遞的抗體人初乳中含大量IgG。IgA

含量僅次于IgG，占血清Ig總量的10-20%。分兩型：血清型IgA，存在于血清中，為單體。分泌型IgA，為2個單體和一個蛋白片組成的雙聚體。它存在于哺乳動物的初乳、唾液、淚液鼻和氣管分泌物、膽汁、胃腸道和泌尿道粘膜上及血清中。分泌型IgA含量高于血清型IgA6—8倍。分泌型IgA在消化道呼吸道和泌尿道抗傳染免疫中起著十分重要的作用，是粘膜局部抗傳染免疫的重要體滿面液因素，又稱“局部抗體”。IgM

存在于血清中，I占血清Ig總量的5-10%，由五個單體組成，故有巨球蛋白之稱。在血清中出現(xiàn)最早，但消失快。IgM與細胞結(jié)合的特性最強。IgM對細菌有調(diào)理作用。IGM是一種高效能的Ig，IgM有較強的凝集作用和補體結(jié)合作用。IgE

含量極微，為單體。是親細胞性Ig它通過Fc段與肥大細胞、堿性粒細胞、血小板血管內(nèi)皮細胞等靶細胞上的受體連在一起，當細胞上的IgE分子再次與相應(yīng)Ag相遇時，引起細胞損傷，導(dǎo)致組織胺等一些具有藥理作用的活性物質(zhì)釋放引起過敏感反應(yīng)，故IgE又叫致敏素。IgD

含量甚低，功能尚不清楚，可能與某些過敏性疾病和自身免疫病有關(guān)。特異性免疫

第一節(jié)免疫系統(tǒng)骨髓免中樞免疫器官胸腺疫腔上襄器官脾臟外周免疫器官淋巴結(jié)彌散淋巴結(jié)

T淋巴細胞免疫活性細胞B淋巴細胞巨噬細胞一、免疫器官1、中樞免疫器官（一級免疫器官）：提供免疫活性細胞并控制機體的免疫反應(yīng)組成：骨髓、胸腺、腔上襄及襄的類同組織2、外周免疫器官（二級免疫器官）：是后天淋巴細胞定居、增生及對Ag異物產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要場所組成：淋巴結(jié)和脾臟二、免疫細胞T細胞、B細胞、N細胞、K細胞及參與免疫應(yīng)答過程中的過濾細胞和效應(yīng)細胞單核細胞和粒細胞起主要協(xié)同作用。在免疫細胞中，受Ag剌激后，能特異識別決定簇，并通過分化增殖，形成能產(chǎn)生Ig和致敏淋巴細胞的的一類細胞稱免疫活性細胞。1、T細胞由骨髓干細胞進入胸腺后在胸腺激素作用下經(jīng)10-30天分化增殖而形成，經(jīng)血液循環(huán)遷移至外周免疫器官胸腺依賴區(qū)（淋巴結(jié)副皮質(zhì)區(qū)和脾小體中央動脈周圍），定居繁殖。受Ag剌激后發(fā)生分化增殖，大部分形成致敏淋巴細胞，少部分形成記憶細胞。壽命較長，可存活數(shù)年數(shù)月有等。分為五個亞群T1……T5其中T1可輔助B細胞產(chǎn)生Ig。2、B細胞：由骨髓干細胞進入腔上襄后在腔上襄激素作用下分化增殖而形成，經(jīng)血液循環(huán)遷移至外周免疫器官非胸腺依賴區(qū)（淋巴小結(jié)生發(fā)中心和脾臟紅髓）定居繁殖受Ag剌激后發(fā)生分化增殖，大部分形成漿細胞少部分形成記憶細胞。壽命較短僅數(shù)天（3d）。3、參與免疫反應(yīng)的其它細胞：K細胞：又叫殺傷淋巴細胞或抗體依賴性細胞毒性淋巴細胞。來源于骨髓干細胞。

K細胞重要特點：細胞膜上只有IgG的Fc受體，當特異性IgGFab段與靶細胞（如寄生蟲、腫瘤細胞）膜結(jié)合后，則IgGFc段與K細胞表面的Fc受體結(jié)合，從而觸發(fā)K細胞將靶細胞殺死或破壞。NK細胞：又叫自然殺傷淋巴細胞或無標志細胞。來源于骨髓干細胞。對各種靶細胞如組織細胞、瘤細胞、微生物及培養(yǎng)細胞均有非特異性殺傷作用，但無需Ig致敏。NK細胞主要以自身產(chǎn)生的淋巴毒而破壞或殺傷靶細胞，其殺傷作用較T、K弱。巨噬細胞的：吞噬或殺滅病原微生物。殺傷腫瘤細胞。識別和處理Ag住處信息。釋放淋巴因活化因子激活免疫活性細胞可適當調(diào)節(jié)Ag濃度（濃縮集中或降解破壞）以免造成免疫麻痹產(chǎn)生干擾素。第二節(jié)特異性免疫應(yīng)答過程一、特異性免疫它具有三大特點：具有嚴格特異性和針對性具有一定的免疫期主要表現(xiàn)為體液免疫和細胞免疫Ag

巨噬細胞處理

超級Ag

B淋巴細胞

TH（抗原橋）

T淋巴細胞記憶細胞記憶細胞

漿細胞敏敏淋巴細胞回憶反應(yīng)回憶反應(yīng)

Ig淋巴因子

體液免疫細胞免疫二、免疫反應(yīng)的總過程第三節(jié)體液免疫

免疫系統(tǒng)在Ag剌激下，以B細胞活動為主，產(chǎn)生特異性Ig，以及Ig與相應(yīng)Ag結(jié)合的特異性免疫反應(yīng)。一、抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律具有高度特異性初次反應(yīng)再次反應(yīng)和回憶反應(yīng)

二、體液免疫的作用1、Ag-Ig復(fù)合物激活補體系統(tǒng)（溶菌）2、Ag-Ig復(fù)合物增強吞噬細胞吞噬作用3、Ag-Ig復(fù)合物中和外毒素、病毒4、Ag-IgG復(fù)合物可協(xié)同K細胞殺傷靶細胞5、某些Ig可造成有害的免疫損傷。三、機體獲得抗體的方式通過顯性或隱性傳染后可相應(yīng)Ig通過乳汁接受Ig人工預(yù)防接種后，機體可產(chǎn)生相應(yīng)Ig

第四節(jié)細胞免疫細胞免疫：機體的免疫系統(tǒng)在Ag剌激下以T細胞活動為主，產(chǎn)生致敏淋巴細胞，后者釋放淋巴因子的特異性免疫反應(yīng)。又稱細胞介導(dǎo)免疫。一、淋巴因子種類及其特點二、細胞免疫的臨床意義1、抗細胞內(nèi)寄生病原體感染：結(jié)核、布氏、鼻疽桿菌、真菌（念珠菌、球孢子菌等）和病毒等抗感染。2、引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)：反應(yīng)部位局部組織損傷、壞死、潰瘍等變態(tài)反應(yīng)。3、異體組織移植排斥反應(yīng)：由于毒性T細胞的產(chǎn)生和淋巴毒素因子的釋放所故。4、抗腫瘤免疫和自身免疫疾病。第五節(jié)抗傳染免疫的特點一、天然自動免疫：動物自然感染某種傳染病痊愈后，或隱性感染后，所獲得的對該疾病的免疫力特點：免疫力持續(xù)時間較長，強度較大，如動物耐過炭疽、腺疫、豬瘟等傳染病后，甚至可以終身免疫。二、人工自動免疫：動物接種了某種菌苗、疫苗或類毒素等生物制品后，所產(chǎn)生的一種免疫力。特點：免疫力持續(xù)時間的長短，因生物制品的性質(zhì)、機體的反應(yīng)性等因素不同而異，如接種活苗的免疫期一般較長可達一年以上，接種死苗則較短，通常只能持續(xù)4-6個月；其免疫狀態(tài)往往可因病原微生物大量侵入所破壞而發(fā)生傳染，因此應(yīng)加強管理和檢疫制度。三、天然被動免疫：動物在胚胎時期通過胎盤或出生后通過初乳，由免疫的母體被動獲得Ig而形成的一種免疫力。特點：持續(xù)時間短，只有幾個月，因而僅為幼畜所有。四、人工被動免疫：動物在注射了高免血清或康復(fù)動物血清后，所獲得的一種免疫力。特點：產(chǎn)生迅速，注射免疫血清后數(shù)小時即可建立免疫力，但持續(xù)時間極短，僅2-3周，多用于緊急治療或緊急預(yù)防。人工自動免疫和人工被動免疫區(qū)別要點變態(tài)反應(yīng)第一節(jié)概述一、概念變態(tài)反應(yīng)：機體再次接受同種Ag剌激后，發(fā)生的一種機能紊亂及組織損傷的特異性免疫病理反應(yīng)，即改變常態(tài)的反應(yīng)，嚴重時，可導(dǎo)致機體發(fā)生過敏性休克，甚至死亡。所致疾病稱為變態(tài)反應(yīng)性疾病或免疫性疾病。變應(yīng)原完全Ag：

異種動物血清異種組織細胞微生物寄生蟲動物皮毛飼料半Ag：

青霉素磺胺阿司匹林奎寧碘二硝基氯苯非那西酊生漆變應(yīng)原進入機體的途徑呼吸道消化道皮膚粘膜注射二、變態(tài)反應(yīng)的過程致敏階段：

機體初次接觸變應(yīng)原，產(chǎn)生Ig或致敏淋巴細胞，稱致敏階段，般為2-3周反應(yīng)階段：敏感機體再次接觸同種Ag時，發(fā)生的變態(tài)反應(yīng)，稱反應(yīng)階段。

三、變態(tài)性疾病的表現(xiàn)有的是全身性的，如青霉素過敏性休克、血清過敏癥等；有的是局部性的，如呼吸道反應(yīng)包括酵喘和過敏性鼻炎等，消化道反應(yīng)包括采食引起的過敏癥等，皮膚變態(tài)反應(yīng)包括蕁麻疹和結(jié)核等的傳染性變態(tài)反應(yīng)；異體植皮臟器移植產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)第二節(jié)各型變態(tài)反應(yīng)及特點根據(jù)Ig和組織細胞參與情況、抗原抗體反應(yīng)情況及補體是否參加等，可將變態(tài)反應(yīng)分為：第Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)第Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)

稱速發(fā)型第Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)第Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)

稱遲發(fā)型第Ⅴ型變態(tài)反應(yīng)第Ⅵ型變態(tài)反應(yīng)第Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)——過敏反應(yīng)通常包括由異種動物血清及青霉素等藥物引起的全身過敏反應(yīng)。其特點：①是發(fā)現(xiàn)最早，臨床上最常見；②反應(yīng)發(fā)生快，通常于接觸過敏原后數(shù)min或數(shù)h內(nèi)發(fā)作，但消失亦快；③有較明顯個體差異；④變應(yīng)原可以是完全Ag也可以是半Ag；⑤參與抗體為IgE或IgG4過敏性Ig，它們吸于靶細胞上，使機體處于致敏狀態(tài)；⑥補體不參加，故只引起機能紊亂而無后遺性組織損傷；⑦反應(yīng)重，局部或全身性反應(yīng)，嚴重者可休克而死亡。第Ⅱ型變態(tài)反應(yīng)——細胞溶解反應(yīng)①變應(yīng)原可以是體內(nèi)細胞本身成分，如A、B血型交叉輸血時，可激活補體將紅細胞溶解；②外源性變應(yīng)原如某些病毒、細胞蛋白或多糖，更多見是由于大量應(yīng)用某些藥物與血細胞等靶細胞結(jié)合成為完全Ag；③不釋放介質(zhì)，在補體、吞噬細胞或在K細胞參與下殺死靶細胞，造成組織損傷。第Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)——血管炎型①參與Ig為IgG或IgM或IgA。Ag-Ig復(fù)合物存在于血液循環(huán)中或組織間隙里；②Ag-Ig復(fù)合物激活補體或招來中性細胞，釋放溶酶體酶，引起組織損傷；③Ig不需固定在細胞上而是游離于血液循環(huán)中，隨時可與Ag結(jié)合形成有害免疫復(fù)合物第Ⅵ型變態(tài)反應(yīng)——細胞介導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)①無Ig和補體參加，而與致敏淋巴細胞有關(guān)②反應(yīng)較慢，持續(xù)時間長，一般于第二次接觸Ag后6-48h，反應(yīng)達高峰可持續(xù)1-2天。③見于胞內(nèi)寄生菌如結(jié)、布、鼻、真菌等引起的傳染性變態(tài)反應(yīng)，由血吸蟲及蛔蟲等侵襲后引起的肉芽腫，組織排斥反應(yīng)及接觸性皮炎等。血清學(xué)反應(yīng)血清學(xué)反應(yīng)：抗原抗體在體外結(jié)合的反應(yīng)，因?qū)嵤┓磻?yīng)的某些重要因素是含抗體的動物血清，故名血清學(xué)反應(yīng)。血清學(xué)反應(yīng)具有嚴格的特異性和較高的敏感性，因此可用抗原或抗體的已知一方檢測未知的另一方，作為傳染病的輔助診斷和微生物的鑒定。一、凝集反應(yīng)

1、直接凝集反應(yīng)：

細菌、紅細胞等顆粒性Ag與相應(yīng)Ig混合以后，在電解質(zhì)參與下，經(jīng)過一定時間Ag顆粒相互凝集形成肉眼可見凝集塊。參與凝集反應(yīng)的Ag稱凝集原，Ig稱凝集素。平板法和試管法2、間接凝集反應(yīng)先將可溶性Ag或Ig吸附于一種與免疫無關(guān)的有一定大小的顆粒載體表面制成固相Ag或Ig，再與相應(yīng)的待檢Ig或Ag結(jié)合產(chǎn)生的反應(yīng)。分為兩類：間接血球凝集反應(yīng)（HA）間接血球凝集抑制反（HI）間接血球凝集反應(yīng)（HA）＋

＋陽性間接血球凝集抑制反（HI）＋＋陽性陰性二、沉淀反應(yīng)膠體狀態(tài)的可溶性Ag（如細菌和寄生蟲的浸出液、組織浸出液、培養(yǎng)濾液、動物血清等）與相應(yīng)Ig混合后，經(jīng)一定時間，形成肉眼可見的沉淀物。臨床上常用于診斷炭疽、梅素、鼠疫、豬丹毒、氣腫疽等傳染病。沉淀反應(yīng)分為以下三種：實驗管：

4mm小管已知Ig層疊未知Ag交界面白色沉淀環(huán)對照管：

4mm小管已知Ig層疊生理鹽水交界面無沉淀環(huán)1、環(huán)狀沉淀反應(yīng)（Ascoli反應(yīng)）2、絮狀沉淀反應(yīng)：將Ag和相應(yīng)在試管內(nèi)或凹玻片上混勻，經(jīng)過一定時間性，出現(xiàn)肉可見絮狀或顆粒狀不溶性沉淀物為陽性。如診斷梅毒的康氏反應(yīng)，及用標準類毒素測定抗毒素血清效價的絮狀試驗等。3、瓊脂擴散試驗單相瓊擴：將已知（1：10稀釋），加入等量的1%瓊脂（56℃）管（或平板）中，凝固后，于其上（打孔）加待檢Ag（孔中），置37℃濕合感作，2-3h后可見白色沉淀帶。雙相瓊擴：1%瓊脂凝膠制成平板后，在上面按設(shè)計圖形打孔，在孔內(nèi)分別加Ag和Ig，放密閉濕盒中，將使之雙相擴散而形成沉淀帶。

單相瓊擴雙相瓊擴含已知Ig瓊脂被檢血清（Ig）待檢Ag已知Ag三、補體結(jié)合反應(yīng)溶菌反應(yīng)：

某些細菌（霍亂弧菌）與相應(yīng)的抗體混合以后，如有補體參加，則細菌發(fā)生溶解的反應(yīng)，稱溶菌反應(yīng)。溶血反應(yīng)：

紅細胞與相應(yīng)的抗體（溶血素）混合以后，如有補體以參加，則紅細胞發(fā)生溶解的反應(yīng)，稱溶血反應(yīng)。補體的特點1、補體是酶類物質(zhì)，但均以無活性的前體形式存在于血清中2、動物血清中尤其以豚鼠血清含量最高，故多用豚鼠的新鮮血清作為補體的來源3、補體性質(zhì)不穩(wěn)定，易失活，經(jīng)56度30分處理即滅活4、補體本身沒有特異性能與任何一組抗原抗體復(fù)合物相結(jié)合，一但結(jié)合后不再游離。5、補體不與單獨的抗原或單獨的抗體相結(jié)合。補體結(jié)合反應(yīng)的概念補體結(jié)合反應(yīng)（簡稱補反CFT）：是指在補體參加下，以綿羊紅細胞（Ag）和抗綿羊溶血素（Ig）作為指示系統(tǒng)的抗原抗體反應(yīng)。補體結(jié)合反應(yīng)的原理補反包括兩個系統(tǒng)五種成分：一是被檢系統(tǒng)（溶菌系）中的已知Ag、待檢Ig及僅供一組Ag-Ig系統(tǒng)反應(yīng)的定量補體。二是指示系統(tǒng)（溶血系）中的紅細胞和溶血素。首先是溶菌系統(tǒng)的抗原與抗體復(fù)合物與補體相互混合后產(chǎn)生的反應(yīng)。其次為了測知溶菌系統(tǒng)中補體是否被利用，再加入溶血系（綿紅細胞和抗綿溶血素）作為指示系統(tǒng)，以觀察因補體游離所產(chǎn)生的溶血情況。如果反應(yīng)的結(jié)果是不溶血為診斷陽性，發(fā)生了溶血為診斷陰性。操作與結(jié)果操練時，分兩步進行：將待檢系統(tǒng)的Ag、Ig與補體三種成加入試管內(nèi)，于37度水浴作用3