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文檔簡介
一、無菌的環(huán)境1、無菌室標(biāo)準(zhǔn)無菌室的要求:房間設(shè)置〔外面有緩沖室〕、空氣過濾、墻面、墻角、微生物操作相關(guān)設(shè)備、紫外燈等。無菌室布局如條件有限,可在微生物實驗室內(nèi)專辟一個小房間作為無菌室??梢杂冒宀暮筒AЫㄔ?,面積4-5平方米即可。板材和玻璃隔出的無菌室2、超凈工作臺超凈工作臺是一種提供局部無塵無菌工作環(huán)境的垂直單向流型空氣凈化設(shè)備。超凈工作臺3、生物平安柜生物平安柜外形與超凈臺類似,也提供局部無塵無菌工作環(huán)境。但它設(shè)置了風(fēng)槽,氣流不會吹向使用者,可以有效保護(hù)使用者。生物平安柜二、無菌的器具、培養(yǎng)基1、玻璃、金屬等器具--干熱滅菌法設(shè)備:電烘箱用途:用于玻璃器皿、金屬器具等耐熱物品的烤干和滅菌。條件:160-165℃,滅菌1-2小時。
2、玻璃、金屬、含水物品等--高壓蒸汽滅菌法設(shè)備:高壓蒸汽滅菌鍋用途:培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。條件:121℃水蒸氣15分鐘
培養(yǎng)基一般使用高壓蒸汽滅菌法4、液體或水溶性物質(zhì)--過濾除菌法器具:細(xì)菌過濾器用途:不耐高溫的液體、水溶性物質(zhì)的除菌。細(xì)菌過濾器1、手部清潔消毒洗手:手部有可見灰塵時、飯前、便后,用水和肥皂洗手;Handrub〔揉手〕:手部較清潔時,75%乙醇或者醇基消毒劑揉手。動作:手掌-手背-指縫-手指-拇指-指尖-手腕2、培養(yǎng)皿操作培養(yǎng)皿開合:單手翻開和蓋上皿蓋,包括持皿法和皿加法兩種。此操作用于制作培養(yǎng)基平板、接種等。持皿法皿加法3、接種環(huán)操作包括灼燒接種環(huán)、接種、劃線等。灼燒接種環(huán)先斜放外焰灼燒接種環(huán),然后垂直放置后繼續(xù)灼燒,再斜燒金屬桿?,F(xiàn)在紅外接種環(huán)滅菌器使用也比較廣泛。紅外接種環(huán)滅菌器用接種環(huán)進(jìn)行接種用接種環(huán)進(jìn)行劃線4、涂布棒操作灼燒滅菌:可以沾酒精然后灼燒,灼燒范圍要包括其桿部。涂布:將菌液滴在培養(yǎng)基外表中央。右手拿涂布棒將菌液沿一條直線來回推動,然后沿一垂直線來回推動,平板邊緣處可改變方向再涂幾次。涂布5、試管操作單試管操作〔注意左右手的使用〕雙試管操作四、根本規(guī)那么不得留長指甲,頭發(fā)需扎好;無菌操作中不要大聲笑、說話、打噴嚏、打鬧
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