普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(植物部分)_第1頁(yè)
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普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn):glayertop2@163物學(xué)部分王建芳Contents1.植物的徒手切片和植物各類組織的察看2.植物葉脈標(biāo)本的制造3.葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定4.植物種子活力的快速測(cè)定實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看一、植物徒手切片法實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐绞智衅姆椒ㄊ俏覀儚氖陆虒W(xué)、科研及消費(fèi)技術(shù)任務(wù)中常用的最簡(jiǎn)便的察看植物內(nèi)部構(gòu)造的方法,這種方法不需求復(fù)雜的設(shè)備,又能隨時(shí)迅速地察看植物的生活細(xì)胞及各器官內(nèi)部組織的生活情況和天然的顏色,所以有很大的實(shí)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看一、植物徒手切片資料與工具芹菜葉柄〔長(zhǎng)度2~3厘米〕、刀片藥品和試劑染色劑實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看一、植物徒手切片方法和步驟〔1〕切片前,在小培育皿中盛以清水,預(yù)備好滴管和刀片等器具和欲切的資料〔芹菜葉柄〕?!?〕切片時(shí)用左手的三個(gè)指頭拿住資料,并使其稍突出手指之上。右手持刀片,平放在左手的食指之上,刀口向內(nèi),且與資料斷面平行,然后以均勻的動(dòng)作,自左前方向右后方滑行切片,留意要用整個(gè)手臂向后拉〔手腕不用用力〕。切下薄片后,將薄片悄然移入已盛水的培育皿中備用?!?〕挑選最薄而透明的切片,取出放在載玻片上,制成暫時(shí)裝片察看,也可制成永久性的玻片標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看一、植物徒手切片實(shí)驗(yàn)本卷須知〔1〕選擇資料時(shí)不易太硬也不要太軟。〔2〕切片時(shí)動(dòng)作要矯捷,資料要一次切下?!?〕整個(gè)切片過(guò)程中運(yùn)用清水潮濕資料和刀面,使之滑潤(rùn),否那么資料容易破損。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)種子植物的組織構(gòu)造按照其發(fā)育特點(diǎn),可分為兩大類,即分生組織和成熟組織。分生組織細(xì)胞在植物的終身中一直具有分裂才干,一方面添加新細(xì)胞到植物體中,另一方面使本人永存下去。成熟組織是由分生組織分裂的一些細(xì)胞在后來(lái)的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中陸續(xù)分化而失去分裂才干,所構(gòu)成的有特定功能的細(xì)胞。按成熟組織的功能又可以分成營(yíng)養(yǎng)組織、維護(hù)組織、輸導(dǎo)組織、機(jī)械組織和分泌組織。在不同種植物、植物體不同的器官和植物發(fā)育的不同階段,組織構(gòu)造有所不同。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)分生組織:植物根尖頂端有一帽狀的根冠,其內(nèi)圓錐狀的部分染色深,細(xì)胞小,細(xì)胞核相對(duì)較大,細(xì)胞質(zhì)較厚,沒(méi)有明顯的液泡,無(wú)分化,為原分生組織。原分生組織上方略有分化的組織,為初生分生組織,其外表是原表皮,表皮以內(nèi)染色較淡的是根本分生組織,中央染色較深的部位為原構(gòu)成層。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)維護(hù)組織:是覆蓋在植物體外表起維護(hù)作用的組織,由一層或數(shù)層細(xì)胞構(gòu)成,其功能主要是防止水分過(guò)度散失,調(diào)理植物與環(huán)境的氣體交換,抵御外界風(fēng)雨和病蟲(chóng)害的侵襲,防止機(jī)械的或化學(xué)的損傷。根據(jù)其來(lái)源和形狀的不同,維護(hù)組織又分為表皮〔初生維護(hù)組織〕和周皮〔次生維護(hù)組織〕。維護(hù)組織細(xì)胞陳列整齊,具有維護(hù)內(nèi)部柔嫩部分的功能。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)輸導(dǎo)組織:是植物體中擔(dān)負(fù)物質(zhì)長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)闹饕M織,是植物體中最復(fù)雜的系統(tǒng)。根從土壤中吸收的水分和無(wú)機(jī)鹽,由輸導(dǎo)組織運(yùn)送到地上部分。葉的光協(xié)作用的產(chǎn)物,由輸導(dǎo)組織運(yùn)送到根、莖、花、果實(shí)中去。植物體各部分之間經(jīng)常進(jìn)展的物質(zhì)的重新分配和轉(zhuǎn)移,也要經(jīng)過(guò)輸導(dǎo)組織來(lái)進(jìn)展。輸導(dǎo)組織分為二類,一類為木質(zhì)部,主要運(yùn)輸水分和溶解于其中的無(wú)機(jī)鹽;另一類為韌皮部,主要運(yùn)輸有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。輸導(dǎo)組織細(xì)胞的特點(diǎn)是細(xì)胞長(zhǎng)形,常上下相連,構(gòu)成適于輸導(dǎo)的管道。木質(zhì)部有導(dǎo)管,韌皮部有篩管和伴胞。

實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)輸導(dǎo)組織植物莖的構(gòu)造木栓構(gòu)成層雙子葉植物莖的構(gòu)造實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)輸導(dǎo)組織小麥莖的構(gòu)造實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)厚角組織:厚角組織是植物機(jī)械組織的一類,厚角組織細(xì)胞最明顯的特征是細(xì)胞壁具有不均勻的增厚,壁的增厚通常在幾個(gè)細(xì)胞鄰接處的角隔上特別明顯,故稱厚角組織。厚角組織分布于莖、葉柄、葉片、花柄等部分,根中普通不存在。厚角組織的分布具有一個(gè)明顯的特征,即普通總是分布于器官的外圍,或直接在表皮下,或與表皮只隔開(kāi)幾層薄壁細(xì)胞。在莖和葉柄中厚角組織往往成延續(xù)的圓筒或分別成束,常在具脊?fàn)钔黄鸬那o和葉柄中棱的部分特別興隆,例如在薄荷的方莖中,南瓜、芹菜具棱的莖和葉柄中。細(xì)胞為長(zhǎng)柱形,相互重疊陳列。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)引見(jiàn)分泌組織:分泌組織是由具有分泌作用能分泌揮發(fā)油、樹(shù)脂、蜜汁、乳汁等的細(xì)胞所組成。根據(jù)分泌組織分布在植物的體表或植物的休內(nèi),可分為外部分泌組織和內(nèi)部分泌組織兩大類。

〔一〕外部分泌組織:位于植物的體表,其分泌物直接排出于體外,其中有腺毛和蜜腺〔二〕內(nèi)部分泌組織:存在于植物體內(nèi),其分泌物貯在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間隙中。按其組成,外形和分泌物的不同,可分為:1.分泌細(xì)胞;2.分泌腔;3.分泌道;4.乳汁管。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看二、植物各類組織的察看實(shí)驗(yàn)?zāi)康哪苷f(shuō)出植物的分生組織、薄壁組織、維護(hù)組織、輸導(dǎo)組織和機(jī)械組織的根本形狀構(gòu)造特點(diǎn),并能從植物器官中識(shí)別各種植物組織。器材和試劑1.植物資料玉米根尖縱切永久制片、南瓜莖縱切永久制片、大葉黃楊葉、芹菜葉柄、柑橘果實(shí)。2.實(shí)驗(yàn)器材顯微鏡、剪刀、鑷子、刀片、載玻片、蓋玻片、滴管、培養(yǎng)皿。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看實(shí)驗(yàn)步驟1.分生組織的察看〔1〕取玉米根尖縱切永久制片,先在低倍鏡下察看,再用高倍鏡?!?〕留意察看:初生分生組織的細(xì)胞形狀特點(diǎn),有無(wú)正在分裂的細(xì)胞;假設(shè)察看到了正在分裂的細(xì)胞,留意察看其分裂的方向;初生分生組織的細(xì)胞之間有無(wú)細(xì)胞間隙?〔3〕細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞小,細(xì)胞核較大,沒(méi)有大液泡,細(xì)胞呈正方形,陳列整齊嚴(yán)密。由于正在分裂,細(xì)胞質(zhì)密度大,活動(dòng)旺盛,細(xì)胞壁薄。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看實(shí)驗(yàn)步驟2.維護(hù)組織的察看〔1〕撕取大葉黃楊葉表皮制成暫時(shí)裝片,察看其表皮細(xì)胞、氣孔器的形狀構(gòu)造?!?〕留意察看:細(xì)胞間的陳列、細(xì)胞間有無(wú)間隙。〔3〕細(xì)胞特點(diǎn):外有細(xì)胞壁,內(nèi)有大液泡;細(xì)胞之中可察看到綠色顆粒狀物〔葉綠體).另外,還能夠察看到唇狀的葉孔維護(hù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看實(shí)驗(yàn)步驟3.輸導(dǎo)組織的察看〔1〕察看南瓜莖的縱切永久制片,找出木質(zhì)部中的導(dǎo)管、韌皮部中的篩管和半胞,〔2〕留意察看:篩板和長(zhǎng)構(gòu)成群分布的一類細(xì)胞,此為木纖維?!?〕細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞長(zhǎng)形,常上下相連,構(gòu)成適于輸導(dǎo)的管道。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看實(shí)驗(yàn)步驟4.厚角組織的察看〔1〕將芹菜葉柄制成的暫時(shí)裝片置于顯微鏡下,察看葉柄的棱角處,在表皮和維管束之間有一團(tuán)厚角組織,細(xì)胞壁較厚,并有光澤?!?〕細(xì)胞特點(diǎn):細(xì)胞稍長(zhǎng),具有明顯加厚的初生壁,其加厚的部分多在細(xì)胞相互毗連的角隅處,有的植物細(xì)胞壁加厚在切向壁或近胞間隙的部位。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看實(shí)驗(yàn)步驟5.分泌組織〔1〕取柑橘外果皮,察看其上透明的小囊,擠壓果皮,察看小囊中有什么物質(zhì)溢出?將果皮制成切片,在顯微鏡下察看,小囊為一空腔,其中有什么物質(zhì)?〔2〕細(xì)胞特點(diǎn):是由細(xì)胞分化來(lái)的特化細(xì)胞。這種細(xì)胞的體積普通較相鄰細(xì)胞大,外形各異,它們常呈單個(gè)細(xì)胞分散在植物體內(nèi)其他較不特化的細(xì)胞間,在各類器官中存在。實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看三、思索題1.初生分生組織、維護(hù)組織的細(xì)胞之間有無(wú)細(xì)胞間隙?2.木質(zhì)部和韌皮部在保送過(guò)程中的作用有什么區(qū)別?篩管和導(dǎo)管的細(xì)胞是死細(xì)胞還是活細(xì)胞?3.厚角組織的細(xì)胞是死細(xì)胞還是活細(xì)胞?實(shí)驗(yàn)一植物徒手切片和植物各類組織察看作業(yè)1.完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告ThankYou!實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定水勢(shì)表示水的化學(xué)勢(shì),水分在浸透系統(tǒng)中總是由水勢(shì)高處向水勢(shì)低處流動(dòng)。植物生活細(xì)胞是一個(gè)浸透系統(tǒng),當(dāng)將植物細(xì)胞或組織放入外界溶液中時(shí),水分將以水勢(shì)差為動(dòng)力在兩者間流動(dòng),最終到達(dá)動(dòng)態(tài)平衡。假設(shè)植物組織的水勢(shì)小于外界溶液的水勢(shì),植物細(xì)胞吸水,使外界溶液濃度增大;反之,植物細(xì)胞失水,使外液濃度變小。假設(shè)植物組織與外界溶液水勢(shì)一樣,將不改動(dòng)外部溶液的濃度,此時(shí)外液的浸透勢(shì)就等于植物組織的水勢(shì)。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理利用外界溶液的濃度不同其比重也不同的原理來(lái)確定與植物組織水勢(shì)一樣的外液,根據(jù)公式計(jì)算植物組織的水勢(shì)。實(shí)驗(yàn)方法小液流法實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆罩参锝M織水勢(shì)的測(cè)定方法,并了解浸透系統(tǒng)中水勢(shì)大小是水分挪動(dòng)方向的決議要素。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)器材吸水紙、容量管〔或10ml量筒〕、試管、帶蓋小瓶、膠頭細(xì)玻璃彎管、移液管、剪刀、橡皮塞、試管架、溫度計(jì)、鑷子。試劑與資料植物葉片〔大葉黃楊葉〕、1mol/L蔗糖溶液、染色試劑。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟1.外界溶液的配制與浸透作用①配制0.1~0.8mol/L8個(gè)梯度的蔗糖溶液各10ml,注入8只試管中,并分別加上塞子后編號(hào),作為對(duì)照組。②將8只帶蓋小瓶編號(hào),分別從對(duì)照組中一樣編號(hào)的試管中取蔗糖溶液4ml注入各瓶,加上塞子作為實(shí)驗(yàn)組。③用剪刀將植物葉片剪成大小一樣〔約0.5cm2〕的小塊,每瓶中投入40小塊〔約占1/4溶液體積〕,塞好塞子,放置30min。在此期間搖動(dòng)小瓶數(shù)次。④用針尖挑取少許染色劑參與上述帶蓋小瓶中,搖勻,此時(shí)溶液為淺藍(lán)色。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟2.等滲溶液確定①用膠頭細(xì)玻璃彎管從各帶蓋小瓶中依次汲取少量的淺藍(lán)色溶液,并用吸水紙吸掉管外壁上的溶液,然后將彎管伸入一樣的編號(hào)的對(duì)照組試管液體中部,緩慢放出溶液一滴,察看有色液滴的挪動(dòng)方向。②假設(shè)有色液滴向上挪動(dòng),闡明組織失水,使蔗糖溶液濃度降低、比重減小;假設(shè)有色液滴向下挪動(dòng),闡明組織吸水,使蔗糖溶液濃度升高、比重增大;假設(shè)有色液滴靜止不動(dòng),那么闡明蔗糖溶液與植物組織水勢(shì)相等,記錄該蔗糖溶液的濃度。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟3.結(jié)果計(jì)算根據(jù)上述蔗糖溶液的濃度,根據(jù)公式計(jì)算植物組織的水勢(shì)。計(jì)算公式:ψw=-iRTc式中ψw為植物組織水勢(shì),以bar表示;i為解離系數(shù),蔗糖是1;R為氣體常數(shù),0.083L·bar/mol·K;T為絕對(duì)溫度,K〔即273℃+t,t為實(shí)驗(yàn)室溫度〕;c為等滲溶液濃度,mol/L。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定一、植物組織的水勢(shì)測(cè)定思索1.小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)時(shí),為什么操作時(shí),應(yīng)強(qiáng)調(diào)所用試管、毛細(xì)管應(yīng)堅(jiān)持枯燥?2.剪取植物葉片,并投入試管中時(shí)動(dòng)作為什么要迅速?3.參與甲烯藍(lán)不應(yīng)太多?實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理當(dāng)植物組織細(xì)胞內(nèi)的汁液與其周?chē)哪撤N溶液處于浸透平衡形狀,植物細(xì)胞內(nèi)的壓力勢(shì)為零時(shí),細(xì)胞汁液的浸透勢(shì)就等于該溶液的浸透勢(shì)。這種浸透勢(shì)相等的溶液稱為等滲溶液。該溶液的濃度稱為等滲濃度。當(dāng)一系列梯度濃度溶液察看細(xì)胞質(zhì)壁分別景象時(shí),細(xì)胞的等滲濃度介于剛剛引起初始質(zhì)壁分別的最低濃度和尚不能引起質(zhì)壁分別的最高濃度之間的溶液濃度。代入公式即可計(jì)算其浸透勢(shì)。

實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)方法質(zhì)壁分別法實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟炜粗参锝M織在不同濃度溶液中細(xì)胞質(zhì)壁分別的產(chǎn)生過(guò)程,了解其用于測(cè)定植物組織浸透勢(shì)的原理與方法。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)器材顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、刀片、酒精燈、濾紙、滴管、移液管、小培育皿。資料與試劑洋蔥鱗片、1mol/L蔗糖溶液。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定方法步驟1.配制0.1~0.8mol/L濃度的8個(gè)梯度的蔗糖溶液各10ml,分別盛于小培育皿中,并加上蓋子。2.從部位相近的鱗片上斯取大小相近〔約幾個(gè)平方毫米〕的內(nèi)表皮,從濃度高的蔗糖溶液開(kāi)場(chǎng),依次每隔3min投放3片內(nèi)表皮到一種濃度的溶液中〔以便有充足的時(shí)間察看,并使組織在不同的溶液中處置時(shí)間一致〕,并使之完全浸沒(méi),室溫下放置30min。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定方法步驟3.按濃度由高到低依次取出處置過(guò)的表皮,放在有1~2滴相應(yīng)濃度蔗糖溶液的載玻片上,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下察看質(zhì)壁分別的情況〔每次鏡檢約100個(gè)細(xì)胞〕,并記錄不同濃度溶液處置下質(zhì)壁分別的程度。4.根據(jù)不同溶液中植物細(xì)胞質(zhì)壁分別的程度,確定一個(gè)引起50%的細(xì)胞角隅上出現(xiàn)質(zhì)壁分別〔作為初始質(zhì)壁分別〕的溶液濃度,或確定引起細(xì)胞質(zhì)壁分別最低濃度和不引起質(zhì)壁分別最高濃度的平均值,作為等滲濃度。用新的溶液和植物資料進(jìn)展反復(fù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定結(jié)果計(jì)算根據(jù)所確定的等滲濃度,根據(jù)下式計(jì)算該植物組織的平均浸透勢(shì)。計(jì)算公式ψs=-iRTc式中ψs為平均浸透勢(shì),以bar表示;i為解離系數(shù),蔗糖是1;R為氣體常數(shù),0.083L·bar/mol·K;T為絕對(duì)溫度,K〔即273℃+t,t為實(shí)驗(yàn)室溫度〕;c為等滲溶液濃度,mol/L。實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定二、植物組織浸透勢(shì)的測(cè)定思索題1.如何提高質(zhì)壁分別法測(cè)定植物組織浸透勢(shì)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性?2.不同濃度的NaCl可否用于測(cè)定植物組織的浸透勢(shì)?實(shí)驗(yàn)二植物組織的水勢(shì)和浸透勢(shì)的測(cè)定作業(yè)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定一、葉綠體色素的提取、分別實(shí)驗(yàn)原理植物色素包含脂溶性的葉綠體色素和水溶性的細(xì)胞液色素。葉綠體色素是植物進(jìn)展光協(xié)作用吸收光能的重要物質(zhì)根底。葉綠體色素主要包括葉綠素a、葉綠素b、葉黃素和胡蘿卜素,它們與類囊體膜蛋白結(jié)合成色素蛋白復(fù)合體而存在。根據(jù)葉綠體色素的脂溶性特性,常用乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑離析而從植物資料將其提取。葉綠體色素是由化學(xué)構(gòu)造和相對(duì)分子質(zhì)量不同的多種成分組成,根據(jù)它們?cè)谟袡C(jī)溶劑中的溶解性和在吸附劑上的吸附性差別,可分別出它們的各組分。

實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定一、葉綠體色素的提取、分別實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊灾参锶~片組織為資料,提取葉綠體色素;以紙層析法分別其成分。實(shí)驗(yàn)器材天平、剪刀、研缽、離心機(jī)、玻璃棒、量筒、燒杯、濾紙、小燒杯。資料與試劑植物葉片、丙酮、碳酸鈣粉、石英砂、層析液[按石油醚:丙酮〔25:3〕比例配置〔V/V〕]。實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定一、葉綠體色素的提取、分別實(shí)驗(yàn)步驟1.葉綠體色素的提?、俜Q取新穎的植物葉片2g,洗凈,擦干,去中脈,剪碎后放入研缽中。②參與少許石英砂和CaCO3,再參與無(wú)水丙酮10ml,研磨成勻漿,再加丙酮15ml,搖勻。③離心,取上清液,即可得到葉綠體色素提取液〔保管于暗處備用〕。實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定一、葉綠體色素的提取、分別實(shí)驗(yàn)步驟2.葉綠體色素的分別——紙層析法①層析樣紙制備將優(yōu)質(zhì)濾紙剪成3cm×9cm的長(zhǎng)條,將一端剪成高約1cm的三角形。②點(diǎn)樣用細(xì)玻璃棒蘸取葉綠體色素提取液,于層析紙的三角形一端在三角形底邊上劃一條樣線,風(fēng)干后在原處反復(fù)點(diǎn)樣幾次。③展層在小燒杯中參與3~5ml層析液,然后將層析紙?jiān)?jīng)點(diǎn)樣的一端放入小燒杯里,留意層析液不可觸及樣線,并蓋好蓋子,于陰暗處展層約10min,即可在層析紙上分辨出4種不同的清楚色層。④用鉛筆在層析紙上指出4種色層的輪廓,并注明色層的稱號(hào)和顏色,附在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定一、葉綠體色素的提取、分別思索1.嚴(yán)密提取色素時(shí)參與CaCO3有什么作用?2.色素分散速度與什么有關(guān)?實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定二、葉綠體色素含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理葉綠體色素溶液各組成成分在可見(jiàn)光譜中具有不同的特征吸收峰。因此,運(yùn)用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)下所測(cè)定的吸光度,根據(jù)閱歷公式即可計(jì)算出色素溶液中各色素濃度,不同溶劑所提取的色素吸收光譜有差別,因此,應(yīng)運(yùn)用不同的計(jì)算公式。葉綠體色素的提取常用丙酮和乙醇有機(jī)溶劑。用80%丙酮提取葉綠素a和葉綠素b以及類胡蘿卜素分別在663nm、646nm和470nm波長(zhǎng)下有最大吸收峰,而用95%乙醇提取那么在665nm、649nm和470nm波長(zhǎng)下具有最大吸收峰,據(jù)此所測(cè)得的吸光度值代入不同的閱歷公式,計(jì)算出葉綠素a和b的濃度,及葉綠素總濃度和類胡蘿卜素的總濃度,并根據(jù)所運(yùn)用的單位植物組織〔鮮重、干重、或面積〕,計(jì)算出色素的含量。實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定二、葉綠體色素含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆辗止夤舛扔?jì)法對(duì)植物葉綠體色素提取液中葉綠素a和b的濃度及其葉綠素總濃度和類胡蘿卜素的總濃度測(cè)定與計(jì)算方法,以及植物資料中各種色素含量的計(jì)算方法。實(shí)驗(yàn)器材分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定二、葉綠體色素含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟1.吸光度的測(cè)定①將色素提取液重新混勻。②以丙酮溶液做空白對(duì)照,分別在波長(zhǎng)為663、646和470nm下測(cè)定提取液的吸光度值,即A663、A646和A470。實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定二、葉綠體色素含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟2.結(jié)果計(jì)算①葉綠素濃度的計(jì)算計(jì)算公式:Ca=12.21A663-2.81A646Cb=20.13A646-5.03A663CT=Ca+Cb=17.32A646-7.18A663Cx.c=〔1000A470-3.27Ca-104Cb〕/229式中,Ca、Cb和CT、Cx.c分別為葉綠素a、b濃度和葉綠素及類胡蘿卜素的總濃度,mg.L-1。

實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定二、葉綠體色素含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)步驟2.結(jié)果計(jì)算②葉綠體色素含量的計(jì)算葉綠體色素的含量實(shí)驗(yàn)三葉綠體色素的提取、分別及含量測(cè)定作業(yè)完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)四植物種子活力的快速測(cè)定植物種子的活力是指種子萌生出芽的潛能,它決議種子的質(zhì)量和適用價(jià)值大小。測(cè)定種子活力的常規(guī)方法是測(cè)定種子的發(fā)芽率。種子發(fā)芽率是指在適宜的條件下,規(guī)定時(shí)間內(nèi)發(fā)芽的種子占供試種子的百分率。常規(guī)發(fā)芽率的測(cè)定所需時(shí)間長(zhǎng),限制了在實(shí)踐消費(fèi)實(shí)際中的運(yùn)用。實(shí)驗(yàn)四植物種子活力的快速測(cè)定實(shí)驗(yàn)方法TTC法〔氯化三苯基四氮唑法〕BTB法〔溴麝香草酚藍(lán)法〕紅墨水染色法

實(shí)驗(yàn)四植物種子活力的快速測(cè)定TTC法是利器具有活力的種子呼吸時(shí)所產(chǎn)生的NADH2和NADPH2與滲入胚細(xì)胞內(nèi)的TTC反響,將無(wú)色TTC復(fù)原成紅色的三苯基甲腙〔TTF〕,從而使種胚著色〔無(wú)生活力的種子浸泡TTC時(shí)種胚不著色〕,以鑒別種子活力的方法。BTB法是利器具有活力的種子呼吸時(shí)所釋放的CO2溶于水后所解離成的H+和HCO3-,使活細(xì)胞周?chē)乃岫忍砑?,?dǎo)致藍(lán)色的BTB轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色〔死種子不能使BTB變色〕,以鑒別種子活力的方法。紅墨水染色法是根據(jù)活種子的胚細(xì)胞具有物質(zhì)選擇性吸收,用紅墨水浸泡活種子其胚不被染色〔而死種子胚細(xì)胞膜喪失半透性其胚可被染色〕,來(lái)鑒別種子活力的方法。實(shí)驗(yàn)四植物種子活力的快速

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