醫(yī)療器械的滅菌方法以及滅菌效果的驗(yàn)證

—論文發(fā)表專(zhuān)家—―由國(guó)導(dǎo)氟友志網(wǎng)§gwww.qikanwang,net醫(yī)療器械的滅菌方法以及滅菌效果的驗(yàn)證【摘要】常用的滅菌方法有多種，如濕熱滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法和過(guò)濾除菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。滅菌后還要采取適當(dāng)方法進(jìn)行滅菌效果驗(yàn)證，這樣才能保證產(chǎn)品無(wú)菌?！娟P(guān)鍵詞】滅菌方法;濕熱;干熱;輻射;滅菌效果;驗(yàn)證一、滅菌方法滅菌法系指用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段將物品中活的微生物殺滅或除去，從而使物品殘存活微生物的概率下降至預(yù)期的無(wú)菌保證水平的方法。無(wú)菌物品是指物品中不含任何活的微生物。對(duì)于任何一批滅菌物品而言，絕對(duì)無(wú)菌既無(wú)法保證也無(wú)法用試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。一批物品的無(wú)菌特性只能相對(duì)地通過(guò)物品中活微生物的概率低至某個(gè)可接受的水平來(lái)表述，即無(wú)菌保證水平(sterilityassurancelevel，簡(jiǎn)稱(chēng)sal)。實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，滅菌是指將物品中污染微生物的概率下降至預(yù)期的無(wú)菌保證水平。最終滅菌的物品微生物存活概率，即無(wú)菌保證水平不得高于10-6。已滅菌物品達(dá)到的無(wú)菌保證水平可通過(guò)驗(yàn)證確定。常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法和過(guò)濾除菌法?？筛鶕?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要物品允許，應(yīng)盡可能選用最終滅菌法滅菌。若物

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net品不適合采用最終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無(wú)菌保證要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌的物品作補(bǔ)充性滅菌處理(如流通蒸汽滅菌)。濕熱滅菌法本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可采用本法滅菌。采用濕熱滅菌，被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)难b載方式，不能排列過(guò)密，以保證滅菌的有效性和均一性。濕熱滅菌法應(yīng)確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí)可能存在的冷點(diǎn)。當(dāng)用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)滅菌效果時(shí)，應(yīng)將其置于冷點(diǎn)處。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(sporesofbacillusstearothermophilus)。氣體滅菌法本法系指用化學(xué)消毒劑形成的氣體殺滅微生物的方法。常用的化學(xué)消毒劑為環(huán)氧乙烷、氣態(tài)過(guò)氧化氫、甲醛、臭氧(o3)等，本法適用于在氣體中穩(wěn)定的物品滅菌。采用氣體滅菌法時(shí)，應(yīng)注意滅菌氣體的可燃可爆性、致畸性和殘留毒性。本法中最常用的氣體是環(huán)氧乙烷，一般與80%?90%的惰性氣體

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net混合使用，在充有滅菌氣體的高壓腔室內(nèi)進(jìn)行。該法可用于醫(yī)療器械，塑料制品等不能采用高溫滅菌的物品滅菌。含氯的物品及能吸附環(huán)氧乙烷的物品則不宜使用。使用生物指示劑監(jiān)控滅菌效果，對(duì)滅菌物品中的環(huán)氧乙烷殘留物和反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行監(jiān)控，以證明其不超過(guò)規(guī)定的濃度，避免產(chǎn)生毒性。采用環(huán)氧乙烷滅菌時(shí)，應(yīng)進(jìn)行泄漏試驗(yàn)，以確認(rèn)滅菌腔室的密閉性。滅菌程序確認(rèn)時(shí)，還應(yīng)考慮物品包裝材料和滅菌腔室中物品的排列方式對(duì)滅菌氣體的擴(kuò)散和滲透的影響。生物指示劑一般采用枯草芽孢桿菌孢子(sporesofbacillussubtilis)。輻射滅菌法本法系指將滅菌物品置于適宜放射源輻射的Y射線或適宜的電子加速器發(fā)生的電子束中進(jìn)行電離輻射而達(dá)到殺滅微生物的方法。本法最常用的為60co-Y射線輻射滅菌。醫(yī)療器械、容器、生產(chǎn)輔助用品、不受輻射破壞的原料藥及成品等均可用本法滅菌。采用輻射滅菌法滅菌的無(wú)菌物品其sal應(yīng)W10-6°y射線輻射滅菌所控制的參數(shù)主要是輻射劑量(指滅菌物品的吸收劑量)。該劑量的制定應(yīng)考慮滅菌物品的適應(yīng)性及可能污染的微生物最大數(shù)量及最強(qiáng)抗輻射力，所使用的劑量事先應(yīng)驗(yàn)證不影響被滅菌物品的安全性、有效性及穩(wěn)定性。常用的輻射滅菌吸收劑量為25kgy。對(duì)最終產(chǎn)品、原料藥、某些醫(yī)療器材應(yīng)盡可能采用低輻射劑量滅菌。60co-y射線輻射滅菌法常用的生物指示劑為短小芽孢桿菌孢子

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net(sporesofbacilluspumilus)。二、滅菌效果的驗(yàn)證(以管路產(chǎn)品為例)1、濕熱滅菌法和輻射滅菌法檢測(cè)環(huán)境的要求：潔凈度10000級(jí)以下局部100級(jí)的超凈工作臺(tái)單向流空氣環(huán)境下，并且環(huán)境潔凈度檢驗(yàn)合格。1.2.1.培養(yǎng)基的適用性檢查無(wú)菌性檢查取滅菌后的兩種培養(yǎng)基各5支，按規(guī)定溫度培養(yǎng)14天，均應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。靈敏度檢查所需菌種：金黃色葡萄球菌[cm22(b)26003]枯草芽孢桿菌[cm22(b)63501]生孢梭菌[cm22(b)64941]白色念珠菌[cm22(b))98001]黑曲霉[cm22(b)98003]培養(yǎng)基接種：取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基9支，分別接種確定好稀釋級(jí)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養(yǎng)基5支，分別接種確定好稀釋級(jí)的白色念

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)5天，逐日觀察結(jié)果。結(jié)果判斷：空白對(duì)照管應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)，若加菌的培養(yǎng)基管均生長(zhǎng)良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合規(guī)定。1.2.2檢驗(yàn)方法驗(yàn)證（薄膜過(guò)濾法）取產(chǎn)品用10ml注射器按102m2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度沖洗產(chǎn)品內(nèi)壁，收集沖洗液（內(nèi)外壁）于無(wú)菌三角瓶中，將沖洗液分成三份，分別將其倒于三張濾膜上，過(guò)濾，再用沖洗液沖洗濾膜，反復(fù)三次，取出濾膜，分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的試管中；用沖洗液沖洗濾膜，反復(fù)三次，在最后一次沖洗液中加入確定好稀釋級(jí)的試驗(yàn)菌，過(guò)濾，取出濾膜接種至相應(yīng)的培養(yǎng)基中；另取一裝有同體積培養(yǎng)基的試管，加入等量的試驗(yàn)菌，作為陽(yáng)性對(duì)照。按規(guī)定溫度培養(yǎng)3—5天。各試驗(yàn)菌同法操作。結(jié)果判斷：與對(duì)照管比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長(zhǎng)良好，則供試品的該檢驗(yàn)條件下無(wú)抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不計(jì)，照此檢查法和檢查條件進(jìn)行供試品的無(wú)菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長(zhǎng)微弱、緩慢或不生長(zhǎng)，則供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，可采用增加沖洗量，或增加培養(yǎng)基的用量，更

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net換濾膜品種等方法，消除供試品的抑菌作用，并重新進(jìn)行方法驗(yàn)證。1.2.3產(chǎn)品檢查取產(chǎn)品用10ml注射器按102m2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度沖洗產(chǎn)品內(nèi)壁，收集沖洗液（內(nèi)外壁）于無(wú)菌三角瓶中，將沖洗液分成三份，分別將其倒于三張濾膜上，過(guò)濾，再用沖洗液沖洗濾膜，反復(fù)三次，取出濾膜，分別置于含20ml硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基及改良馬丁培養(yǎng)基的試管中，其中一份做陽(yáng)性對(duì)照用。陽(yáng)性對(duì)照：方法同上，在最后一次沖洗液中加入確定好稀釋級(jí)的金黃色葡萄球菌，培養(yǎng)48—72小時(shí)應(yīng)生長(zhǎng)良好。陰性對(duì)照：方法同上，只是直接將沖洗液或提取液倒于濾膜上，其上不得有菌生長(zhǎng)。上述含培養(yǎng)基的容器按規(guī)定的溫度培養(yǎng)14天。培養(yǎng)期間應(yīng)逐日觀察并記錄是否有菌生長(zhǎng)。如在加入供試品后、或在培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，培養(yǎng)14天后，不能從外觀上判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)，可取該培養(yǎng)基液適量轉(zhuǎn)種至同種新鮮培養(yǎng)基中或劃線接種于斜面培養(yǎng)基上，細(xì)菌培養(yǎng)2天、真菌培養(yǎng)3天，觀察接種的同種新鮮培養(yǎng)基是否再出現(xiàn)渾濁或斜面是否有菌生長(zhǎng)；或取培養(yǎng)液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌。結(jié)果判斷：若供試品均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無(wú)菌生長(zhǎng)，則滅菌完全；若供試品管中任何一管顯渾濁并確證有菌生長(zhǎng)，則滅菌不完全，除

—論文發(fā)表專(zhuān)家—ED國(guó)學(xué)JK友志廁www.qikanwang,net非能充分證明試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效。2、氣體滅菌法將產(chǎn)品最難滅菌部位放置一定數(shù)量的菌片，用所需檢測(cè)的包裝袋按正常程序包裝，熱合。之后用相應(yīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)菌片7天后觀察是否滅菌完全。對(duì)照菌片：枯草芽孢桿菌孢子將菌片取出，按滅菌鍋布點(diǎn)位置，順序培養(yǎng)在無(wú)菌營(yíng)養(yǎng)肉湯中，置30--35°C恒溫箱中培養(yǎng)觀察7天。每天記錄是否有菌生長(zhǎng)。若培養(yǎng)基澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確