實驗診斷學(xué)《腦脊液》課件

腦脊液檢驗一、概述70%側(cè)腦室脈絡(luò)叢(主動分泌與超濾）30%大腦與脊髓的細胞間質(zhì)液腦脊液（cerebrospinalfluid,CSF)側(cè)腦室

室間孔

第3腦室中腦導(dǎo)水管

第4腦室正中孔和外側(cè)孔

蛛網(wǎng)膜絨毛上矢狀竇吸收后進入體循環(huán)生理作用1.保護腦組織免于脊髓免受外力震蕩損傷2.參與腦組織物質(zhì)代謝并供給營養(yǎng)3.調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓與酸堿平衡4.參與運轉(zhuǎn)生物胺類物質(zhì)影響垂體功能，參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)血腦屏障（Blood-Brainbarrier）

毛細血管內(nèi)皮細胞及細胞間緊密連接、基膜、周細胞、星形膠質(zhì)細胞足突和極狹小的細胞外隙共同組成的一個細胞復(fù)合體。維持腦內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和避免有害物質(zhì)入侵。功能Diagram葡萄糖鈣離子乳酸氨基酸尿素肌酐氯化物鎂離子乙醇膽紅素纖維蛋白原補體抗體毒物膽固醇容易較易極難通透性炎癥、腫瘤、損傷、缺血、阻塞等病理狀態(tài)下，血腦屏障被破壞，通透性改變，可引起腦脊液成分的改變血腦屏障檢查目的通過對腦脊液壓力、一般性狀、化學(xué)成分、顯微鏡、微生物、免疫學(xué)的檢查，對神經(jīng)系統(tǒng)疾病進行診斷、療效觀察與預(yù)后判斷。二、適應(yīng)證與標本采集1.適應(yīng)證：（1）有腦膜刺激癥狀（2）疑有顱內(nèi)出血（3）劇烈頭痛、昏迷、抽搐、癱瘓等癥狀與體征而原因不明（4）中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病進行椎管內(nèi)治療、造影等。禁忌癥：（1）懷疑顱內(nèi)壓明顯增高、視神經(jīng)乳頭水腫或顱內(nèi)占位、有腦疝先兆者（2）休克、嚴重衰竭或瀕危病人（3）穿刺部位的皮膚和軟組織有感染者、（4）腰椎骨質(zhì)破壞

2.標本采集腰椎穿刺小腦延髓池側(cè)腦室步驟：

壓力測定細菌學(xué)檢驗生化與免疫學(xué)檢驗細胞學(xué)檢驗留取3管，每管約1-3ml。盡快送檢，以防細胞破壞、葡萄糖分解或形成凝塊。（一）一般性狀檢查（二）化學(xué)檢查（三）顯微鏡檢測（四）細菌學(xué)檢測三、檢查項目（一）一般性狀檢查（1）顏色正常:無色顏色臨床意義紅色穿刺損傷、蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦室出血黃色陳舊性出血、黃疸、腫瘤壓迫、蛛網(wǎng)膜下腔黏連梗阻白色各種化膿性感染引起的白細胞增多綠色銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、甲型鏈球菌感染所致腦膜炎褐色神經(jīng)系統(tǒng)黑素瘤紅色腦脊液鑒別：（1）穿刺損傷第一管血性，第二到第三管顏色變淺或消失，離心后上清液無色透明（2）蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦室出血三管均勻血性，離心后上清液可成淡紅或黃色黃變癥腦脊液中因含變性血紅蛋白、膽紅素、或蛋白異常升高所致的顏色變黃。黃變癥分類原因臨床意義出血性紅細胞破壞陳舊性出血黃疸性膽紅素增高多種原因引起的膽紅素增加瘀滯性紅細胞滲出、膽紅素增高顱內(nèi)靜脈、腦脊液循環(huán)瘀滯梗阻性蛋白質(zhì)含量增高脊髓腫瘤壓迫導(dǎo)致的椎管梗阻2、透明度正常：清澈透明

化膿性感染：明顯渾濁

病毒感染：微渾或透明

結(jié)核性腦膜炎:毛玻璃樣3、凝固物正常：無

纖維蛋白原含量增多時可出現(xiàn)凝塊，化膿性炎癥（1-2小時內(nèi)塊狀凝固）結(jié)核性腦膜炎（12-24h后液面網(wǎng)狀薄膜）（二）化學(xué)檢查1.蛋白質(zhì)檢查正常：含量極低（血漿蛋白的1/200),絕大部分為球蛋白病理情況下CSF蛋白含量呈不同程度上升，且以球蛋白為主（1）Pandy’stest(潘氏試驗）實驗原理：腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合可形成不溶性蛋白鹽而沉淀，產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。結(jié)果：半定量（-）——（++++）陰性:清晰透明，不顯霧狀。極弱陽性(土):微呈白霧狀。陽性(+):灰白色云霧狀。(2+):白色渾濁。(3+):白色濃絮狀沉淀。(4+):白色凝塊。結(jié)果判斷正常（2)定量試驗

1）比濁法：磺基水楊酸-硫酸鈉法

2）比色法：麗春紅和考馬斯亮蘭法參考值：<400mg/L

（1）血腦屏障通透性增高

①腦膜炎：化腦、結(jié)腦、病腦

（病腦↑，結(jié)腦↑↑，化腦↑↑↑）；②出血性疾?。耗X室及蛛網(wǎng)膜下腔出血腦脊液中蛋白質(zhì)含量升高（2）腦脊液循環(huán)障礙：腦部腫瘤、椎管梗阻，蛛網(wǎng)膜下隙梗阻、格林-巴利綜合征（蛋白-細胞分離現(xiàn)象）時，腦脊液中蛋白質(zhì)含量增高。（三）葡萄糖測定

正常含量：血清葡萄糖60%（2.5-4.5mmol/L)

影響因素：血清葡萄糖含量血腦屏障通透性葡萄糖酵解程度方法：葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法臨床意義降低：

1.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染

降低程度（化腦>結(jié)腦>隱球菌腦膜炎）

2.腦腫瘤

3.腦寄生蟲、神經(jīng)梅毒

4.低血糖升高：新生兒、病毒性感染、腦出血、糖尿病、外傷等。(四）氯化物測定正常:腦脊液氯化物比血液高約20%（Donnanbalance）

參考范圍：120-130mmol/L方法：離子選擇電極

臨床意義（1）降低：化腦、結(jié)腦、腦脊液氯化物含量降低，結(jié)腦尤為明顯；低氯血癥。（2）增高：尿毒癥、呼吸性堿中毒、心力衰竭。（五）酶類檢查1.LDH（乳酸脫氫酶）鑒別細菌性感染↑↑↑與病毒性感染（正?；蜉p度↑）其他：腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、腫瘤、脫髓鞘病。2.腺苷脫氨酶（ADA）

結(jié)腦患者腦脊液中ADA明顯高于其他腦膜炎

3.溶菌酶：結(jié)腦患者溶菌酶增高程度高于其他腦炎，且增減程度與病情好壞正相關(guān)（三）顯微鏡檢查(一)白細胞計數(shù)及分類計數(shù)方法：改良牛鮑計數(shù)盤（池深0.1mm，總?cè)莘e0.9ul）或血細胞計數(shù)儀直接計數(shù)。

改良牛鮑

計數(shù)盤正常

無紅細胞；少量白細胞；參考值：兒童0～15×106/L

成人0～8×106/L

分類1.方法：直接分類（多核與單個核細胞比例）；染色分類2.參考值：主要為淋巴及單核細胞（7：3）1.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾?。夯撔阅X膜炎：細胞數(shù)顯著升高，以中性粒細胞主；結(jié)核性腦膜炎：中度升高，早期以中性粒為主，數(shù)天后以淋巴為主；病毒性腦膜炎、腦炎，新型隱球菌性腦膜炎：輕度升高，以淋巴為主。臨床意義4.腦膜白血病：分類中可見相應(yīng)的白血病細胞5.腦寄生蟲?。嚎刹橐娛人嵝粤＜毎c漿細胞。2.蛛網(wǎng)膜下腔出血：大量紅細胞和中性粒細胞。

3.中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤：以淋巴細胞為主。

（四）細菌學(xué)檢測1.直接涂片：普通細菌：革命蘭染色。新型隱球菌—墨汁染色；結(jié)核菌-抗酸染色2.細菌培養(yǎng)：⑴常見菌：腦膜炎奈瑟菌、鏈球菌、葡萄球菌、大腸艾希菌、厭氧菌等⑵常用平板：血平板、巧克力平板⑶注意：正常無菌，應(yīng)防止污染，重視真菌和厭氧菌的培養(yǎng)。結(jié)核分枝桿菌?。杭t色、細長、直或彎曲、有時著色不均而成顆粒狀排列的桿菌新生隱球菌（印度墨汁負染）（五）分子生物學(xué)檢測熒光定量PCR常見疾病CSF變化

壓力mmH2O外觀蛋白定性蛋白定量g/L葡萄糖mmol/L氯化物mmol/L細胞計數(shù)及分類

×106/L細菌正常成人90-180透明（-）0.2-0.452.5-4.5120-1300-8,多為淋巴細胞無化腦顯著增高混濁,膿性++以上顯著增加明顯減少或消失稍低顯著增加,數(shù)千,以中性粒細胞為主可發(fā)現(xiàn)病原菌