致病性微生物的實驗診斷學(xué)基礎(chǔ)

致病性微生物的實驗診斷學(xué)根底浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院何浙生1一、常見細(xì)菌性傳染病的病原學(xué)及血清學(xué)診斷根底法定細(xì)菌性傳染病種類：甲類傳染?。菏笠摺⒒魜y；乙類傳染?。杭?xì)菌性痢疾、傷寒和副傷寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性腦脊髓膜炎、猩紅熱、鉤端螺旋體病、布魯氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹傷寒；丙類傳染?。悍谓Y(jié)核、麻風(fēng)病、感染性腹瀉。2采樣本卷須知：時間性針對性防護(hù)與消毒無菌操作標(biāo)志昆蟲、動物標(biāo)本3臨床與尸解取材參考表病人取樣解剖取樣————————————————————————————待診血尿便痰唾咽腦腺局肝脾肺腸淋骨腦病種液洗脊穿部巴髓液液液穿結(jié)刺——————————————————————————————————斑疹傷寒+++鼠疫+++++++++++++++霍亂

+++炭疽+++

+++++++++++++布病+++++++++傷寒、副傷寒+++++++痢疾

++肉毒毒素中毒+鉤體病++++———————————————————————————————————注:++代表一定要取樣，+代表亦應(yīng)取樣4樣品保管：冷藏保管保管液保管5標(biāo)本運(yùn)送：嚴(yán)厲包裝，外表消毒，編號，登記，貼標(biāo)簽，嚴(yán)防容器破碎、滴漏，防止活標(biāo)本逃逸等；附送檢單，填明稱號、數(shù)量、地點、時間等；專人護(hù)送，不要委托攜帶，盡快到達(dá)目的地；妥善保管，運(yùn)送途中防止高溫、日光、過度震動等。6非污染資料檢驗程序動物非污染樣品保管一部分(以備再查)血清學(xué)檢查鏡檢細(xì)菌培育查Ag查Ab染色及非染色免疫熒光鏡檢鑒定鏡檢分菌血清學(xué)檢驗G染色及其他染色免疫熒光G染色及其他染色免疫熒光鏡檢鑒定查抗原查抗體7被污染資料檢驗程序樣品處置污染樣品保管一部分(以備再查)上清或濾過液(病毒)沉淀物或濾阻物(經(jīng)一定稀釋)接種小鼠︹查肉毒毒素︺接種幼貓︹查葡萄球菌腸毒素︺乳鼠.雞胚.組織培育︹病毒、立克次體等︺細(xì)菌培育查抗原CFT協(xié)同SAT反向HATHAIT等鏡檢動物細(xì)菌培育G染色及其它染色I(xiàn)FT查抗原查抗體分菌鏡檢鑒定8細(xì)菌病原學(xué)診斷檢樣處置普通樣品處置：包括洗脫、提取、濃縮和抗雜菌等；節(jié)肢動物標(biāo)本處置蚤類：制造標(biāo)本時擠出前胃，涂片，分菌時可用單體也可用群體，研碎后接種培育。蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。蠅：用選擇性增菌液洗，培育洗液。蚊：對細(xì)菌性傳染病意義不大，主要時對病毒性傳染病意義較大9病原鑒定菌屬確實定細(xì)菌種型確實定細(xì)菌染色細(xì)菌生化反響實驗糖代謝實驗有機(jī)酸、銨鹽反響蛋白、氨基酸、含氮化合物呼吸酶類實驗毒性酶類實驗?zāi)懼材扄}〕溶菌實驗10血清學(xué)診斷根底知識〔1〕

抗原、抗體和補(bǔ)體抗原:完全Ag、半Ag、構(gòu)成Ag條件，醫(yī)學(xué)上主要Ag類別、共同Ag與異嗜性Ag；抗體:根本構(gòu)造、特點、功能、類別等；補(bǔ)體:概念、組成、功能11血清學(xué)診斷根底知識〔2〕抗原、抗體結(jié)合原理12血清學(xué)診斷根底知識〔3〕

抗原、抗體反響特點特異性階段性比例性可逆性13血清學(xué)診斷根底知識〔4〕

抗原、抗體反響影響要素AgAb電解質(zhì)溫度pH14血清學(xué)診斷根本方法：玻片凝集實驗試管凝集實驗抗球蛋白凝集實驗補(bǔ)體結(jié)合實驗ELISA實驗瓊脂分散實驗免疫熒光實驗15二、常見病毒性傳染病的實驗診斷學(xué)根底法定病毒性傳染病種類：〔甲類傳染病〕乙類傳染病：病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、流行性出血質(zhì)熱、狂犬病、流行性乙型腦炎。丙類傳染病：流行性感冒、流行性腮腺炎、風(fēng)疹驪、急性出血性結(jié)膜炎。16臨床診斷血清學(xué)診斷實驗室診斷病毒學(xué)診斷分子病毒學(xué)診斷病毒性疾病確實診臨床診斷＋實驗室診斷病毒病的診斷17采樣標(biāo)本血液腦脊液糞便咽分泌物〔咽拭子〕尿皰疹液結(jié)膜拭子痰、鼻分泌物尸檢：腦、肝、肺、腎、心、胃、淋巴結(jié)等器官活檢：病變器官18根本方法：雞胚病毒培育與分別動物細(xì)胞細(xì)胞陽性的判別尿液中抗原陽性雞胚絨毛尿囊膜的病變死亡動物發(fā)病與死亡培育液PH變化細(xì)胞干擾實驗CPE鑒定病毒加規(guī)范血清后的中和實驗含抗原資料的抗原性檢測電子顯微鏡病毒檢測病毒學(xué)檢診191、查抗體IgG——早期及恢復(fù)期；IgM——4周內(nèi)；IgA——2～8周。根本方法：血凝抑制實驗〔例如流感、麻疹等〕間接血凝抑制實驗對流電泳瓊脂分散實驗補(bǔ)體結(jié)合實驗酶標(biāo)抗體染色實驗ELISA實驗免疫螢光實驗中和實驗等血清學(xué)檢診20根本方法：血凝實驗間接血凝實驗