交叉配血知識(shí)

12024/1/23交叉配血知識(shí)講座整理課件22024/1/23RBC外表有豐富唾液酸，在中性環(huán)境中帶負(fù)電荷，互相別離?？赏ㄟ^縮短細(xì)胞間距，以及在致敏細(xì)胞上的抗體之間搭橋使RBC凝集。凝集一般為二個(gè)步驟抗體吸附于RBC抗原上成為致敏狀態(tài)

致敏RBC凝集形成塊狀?????????????????????????整理課件32024/1/23標(biāo)本的采集及要求一血型二不規(guī)則抗體的篩選

三交叉配血四一二三四整理課件42024/1/23標(biāo)本的采集與要求整理課件52024/1/231.標(biāo)本要新鮮:前三個(gè)月內(nèi)輸血或妊娠:配血試驗(yàn)標(biāo)本抽取<48h,防止因回憶反響產(chǎn)生的抗體漏檢。新近的輸血或妊娠：可引起意外抗體迅速出現(xiàn),如果對(duì)病人的輸血史或人身史不明,使用的標(biāo)本必須是輸血前48h內(nèi)抽取的。血量約為5ml。2.使用右旋糖酐、pvp等：治療前抽取標(biāo)本備用,防止RBC緡錢狀凝集的干擾標(biāo)本要具有代表性，能代表患者目前狀況整理課件62024/1/233.24小時(shí)內(nèi)輸了12u血后：

可輸注未經(jīng)交叉配血的ABO、RH同型的血液,因?yàn)樵冀徊媾溲玫难逡巡荒艽砘颊哐宓那闆r。4.防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生：溶血標(biāo)本一般不使用,因?yàn)檠逯杏坞x血紅蛋白可掩蓋在輸血前實(shí)驗(yàn)中抗體反映引起的溶血5.標(biāo)本標(biāo)識(shí)：唯一性標(biāo)識(shí)無誤、與輸血申請(qǐng)單一致6.使用血漿標(biāo)本：應(yīng)排除纖維蛋白原的干擾7.輸血后標(biāo)本保存：2-8℃,至少一周。整理課件72024/1/23血型1.紅細(xì)胞懸液的配制2.離心力的標(biāo)準(zhǔn)3.離心后結(jié)果觀察4.鹽水試驗(yàn)5.正反定型結(jié)果不一致原因及處理整理課件82024/1/231.紅細(xì)胞懸液的配制洗滌洗滌目的:去除RBC外表物質(zhì)少量的血漿蛋白已溶解紅細(xì)胞的基質(zhì)〔有競(jìng)爭(zhēng)抗體的作用〕抗凝劑〔有抗補(bǔ)體的作用〕至少要用大量生理鹽水洗一次濃度2%：一般用于抗體效價(jià)的測(cè)定5%：一般用于血型鑒定、配血試驗(yàn)、抗球蛋白試驗(yàn)等大多數(shù)血型血清學(xué)試驗(yàn)10%：一般用于測(cè)定抗體的親和力試驗(yàn)整理課件92024/1/232.離心力的標(biāo)準(zhǔn)不同規(guī)格離心機(jī)，力矩不同，統(tǒng)一離心轉(zhuǎn)速，但沒有統(tǒng)一離心力。離心轉(zhuǎn)速換算公式：RCF=1.118×10-5×(rpm)2×R(cm)3.離心后結(jié)果觀察本卷須知將試管成30-45℃角拿在手上，細(xì)胞扣朝上，手腕輕輕用力，用液體去沖細(xì)胞扣。切不可用力使勁搖試管，那樣凝集顆粒會(huì)被搖散，弱凝集那么會(huì)誤判為陰性。整理課件102024/1/23整理課件112024/1/23

4.鹽水試驗(yàn)多采用立即離心法正確的操作是：RBC懸液加到血清后立即離心并觀察結(jié)果整理課件122024/1/23加樣時(shí)先加血清再加紅細(xì)胞，以防止漏加；抗體和抗原的比例一般為2：1。必須要做正反定型實(shí)驗(yàn)才能確定血型。正定型試驗(yàn)有條件可加做抗AB〔檢測(cè)弱A、弱B〕反定型一定要加做O細(xì)胞,〔發(fā)現(xiàn)不規(guī)那么抗體〕整理課件132024/1/235.正反定型結(jié)果不一致原因：技術(shù)、受檢紅細(xì)胞或血清本身〔1〕技術(shù)和管理錯(cuò)誤器材不潔——假陽(yáng)試劑污染或缺乏——假陽(yáng)標(biāo)本和試劑搞錯(cuò)——假陽(yáng)、假陰離心過度或缺乏——假陽(yáng)、假陰結(jié)果記錄或判斷錯(cuò)誤——假陽(yáng)、假陰漏加試劑——假陰陽(yáng)性反響產(chǎn)生溶血現(xiàn)象未能識(shí)別——假陰整理課件142024/1/23〔2〕標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)。如抗A血清效價(jià)不高，可將A亞型誤定為O型，AB型誤定為B型?！?〕紅細(xì)胞懸液過濃或過淡，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反響不明顯，誤判為陰性反響。〔4〕血清異常華通膠或血清蛋白異常引起串錢狀形成，影響反定性結(jié)果〔5〕紅細(xì)胞致敏在含高蛋白介質(zhì)試劑中可發(fā)生凝集，產(chǎn)生假陽(yáng)性〔6〕近期曾異型輸血，病人血液標(biāo)本成為不同型別的紅細(xì)胞混合物，定型時(shí)顯示“混合外觀凝集〞現(xiàn)象?！?〕疾病因素導(dǎo)致抗原減弱某些白血病病人ABO血型抗原可受到抑制，檢出困難?！?〕紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象RBC因遺傳或獲得性的外表異常，發(fā)生多凝集現(xiàn)象。整理課件152024/1/23〔9〕獲得性類B由于G-桿菌作用，RBC可獲得“類B〞活性〔10〕異常血漿蛋白病人血漿中異常的白蛋白、球蛋白比例異常和高濃度的FIB等能導(dǎo)致緡錢狀形成，造成假凝集現(xiàn)象〔11〕近期內(nèi)進(jìn)行大量的血漿置換治療，影響抗體效價(jià)，造成反定型困難?！?2〕不規(guī)那么抗體的產(chǎn)生受檢者血漿中，含有ABO血型抗體以外的不規(guī)那么抗體，如自身抗I，與試劑A、B細(xì)胞上的相應(yīng)抗原起反響?！?3〕低丙種球蛋白血癥可能會(huì)因免疫球蛋白水平全面下降使血清定型時(shí)不見凝集或僅見弱凝集反響?！?4〕藥物等因素藥物、右旋糖酐等靜脈注射某些造影劑可引起紅細(xì)胞聚集而類似凝集?！?5〕年齡因素如新生兒、老年人等。整理課件162024/1/23

正反定型不一致的處理方法

首先要重做試驗(yàn)一次。嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，使用質(zhì)量合格的試劑以及細(xì)心觀察結(jié)果，可解決明顯的問題.

對(duì)一些疑難問題需進(jìn)一步檢查?？沙醪讲扇∫韵麓胧?)重新抽樣，糾正因污染或搞錯(cuò)標(biāo)本造成的不符。2)將紅細(xì)胞洗滌數(shù)次，配成5%鹽水細(xì)胞懸液，用抗A、抗B、抗A+B做實(shí)驗(yàn)，可得到其他有用信息。有條件加做抗H試驗(yàn)

3)對(duì)受檢者作直接抗人球蛋白試驗(yàn)，看RBC有沒有被致敏4)如疑為A抗原或B抗原減弱，可將受檢紅細(xì)胞與抗A或抗B血清作吸收放散試驗(yàn)。5)如試驗(yàn)結(jié)果紅細(xì)胞成緡錢狀排列，加等滲鹽水1滴混勻，往往可使緡錢現(xiàn)象消失。6)做反定型試驗(yàn)時(shí)需要加做O細(xì)胞。整理課件172024/1/23疑難血型病例1.白血病血型變異2.血漿蛋白紊亂3.類B4.多/全凝集5.冷凝集6.ABO亞型整理課件182024/1/23三、不規(guī)那么抗體的篩選篩選目的篩選步驟不規(guī)那么抗體篩選與交叉配血結(jié)果分析整理課件192024/1/23定義：抗A、抗B以外的血型抗體，多為ＩｇＧ抗體。主要是經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生。血型抗體是體內(nèi)免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的針對(duì)血型抗原發(fā)生特異性反響的一類免疫球蛋白類物質(zhì)。人類血清中有5種類型：G、M、A、D、E，其中IgM、G是最重要的2種抗體。RBC血型抗體分為：完全抗體：能在鹽水中凝集相應(yīng)RBC，又稱鹽水抗體。主要是分子量較大的IgM不完全抗體：能結(jié)合RBC上抗原致敏RBC，但在鹽水中不能使之凝集。主要是分子量小的IgG，需用抗球蛋白???????整理課件202024/1/231.篩選目的：發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)那么抗體，以確保平安有效用血。最好獻(xiàn)血者血清也作不規(guī)那么抗體的篩選，如有發(fā)現(xiàn)不規(guī)那么抗體，鑒定此抗體，找出能與其相配合的血液，不可隨便用于輸血。不規(guī)那么抗體多為IgG抗體，鹽水介質(zhì)中不能凝集，只能致敏相應(yīng)抗原的RBC,必須通過特殊介質(zhì)(酶、抗人球蛋白、poly等)才能使致敏RBC出現(xiàn)凝集反響，這些方法的選擇可按抗體的血清學(xué)行為和試驗(yàn)的具體條件來確定。臨床上通常所稱的“同型血〞是指ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)相同,其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng)未必相同。如果交叉配血不仔細(xì),或只用鹽水介質(zhì)配血,那么可能檢查不出ABO血型系統(tǒng)之外的不規(guī)那么抗體,而此抗體與相應(yīng)抗原發(fā)生免疫反響,可導(dǎo)致溶血性輸血反響的發(fā)生。整理課件212024/1/232.篩選細(xì)胞：通常是由2-3個(gè)單人份的O型紅細(xì)胞組成一套篩選細(xì)胞試劑，包括以下常見的抗原：Rh系統(tǒng)、MNSs系統(tǒng)、P系統(tǒng)、Lewis系統(tǒng)、Duffy系統(tǒng)等。3.抗體篩選試驗(yàn)局限性：不一定能檢出所有有臨床意義的不規(guī)那么抗體。一些抗低頻率抗原的抗體那么可能漏檢。整理課件222024/1/23不規(guī)那么抗體篩選的操作步驟被檢血清+抗體篩選細(xì)胞→鹽水介質(zhì)或非鹽水介質(zhì)〔凝聚胺、抗球蛋白、酶〕病人血清病人血清病人血清病人血清篩選細(xì)胞I篩選II篩選III病人紅細(xì)胞血清+病人紅細(xì)胞血清

+篩選細(xì)胞IPolyGram100ulLIM600ul血清

+篩選細(xì)胞II血清

+篩選細(xì)胞IIIResuspending100ul非特異性凝集無凝集那么重做特異性凝集低離子介質(zhì)中孵育，促進(jìn)抗體與RBC結(jié)合凝聚胺含多價(jià)陽(yáng)離子，中和RBC外表負(fù)電荷，減少RBC間距離枸櫞酸鈉重懸液，為負(fù)電荷，中和凝聚胺正電荷，使正常RBC凝集解散1.2.3.4.對(duì)Kell系統(tǒng)抗體不理想，陰性結(jié)果需做抗球。中國(guó)人群幾乎100%為kk型，具有K抗原的幾乎為0，至今未發(fā)現(xiàn)Kell系統(tǒng)抗體整理課件232024/1/23④抗篩陽(yáng)性，交叉配血相容自身抗-H抗-Lebh抗篩陽(yáng)性，但獻(xiàn)血者紅細(xì)胞可能正好不含與相應(yīng)的抗原，因此配血可以相合。⑤抗篩陽(yáng)性，交叉配血不相容同種異體抗體存在，自身對(duì)照成陰性同種異體抗體存在，自身對(duì)照成陽(yáng)性冷反響自身抗體能引起難以確定的陽(yáng)性溫反響自身抗體能引起難以確定的陽(yáng)性“錢串狀〞紅細(xì)胞形成引起非真實(shí)的陽(yáng)性結(jié)果③抗篩陰性，酶試驗(yàn)、抗球蛋白交叉配血試驗(yàn)等不相容獻(xiàn)血者紅細(xì)胞DAT試驗(yàn)為陽(yáng)性受血者血清抗體活性很弱，那么抗篩試驗(yàn)成陰性抗體與低頻率抗原反響②抗篩陰性，鹽水直接離心交叉配血不相容獻(xiàn)血者紅細(xì)胞是ABO血型不相容存在在室溫反響的同種異體抗體獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞是多凝集紅細(xì)胞4.抗篩和交叉配血結(jié)果分析整理課件242024/1/23整理課件252024/1/23交叉配血試驗(yàn)也稱配合性試驗(yàn)，實(shí)際上是檢查不配合性，使病人，獻(xiàn)血者血液之間沒有相對(duì)應(yīng)的抗原、抗體成分〔如：患者體內(nèi)有抗A抗體，獻(xiàn)血者RBC上就不能有A抗原〕試驗(yàn)應(yīng)在37℃下進(jìn)行。

四、交叉配血整理課件262024/1/23整理課件272024/1/23整理課件282024/1/23交叉配血試驗(yàn)通常包括：主側(cè)〔受者血清+供者RBC〕：測(cè)對(duì)供者RBC反響的抗體次側(cè)〔受者RBC+供者血清〕：測(cè)對(duì)受者RBC反響的抗體自身對(duì)照〔受者RBC+受者血清〕：顯示自身抗體、DAT陽(yáng)性、RBC緡錢狀假陽(yáng)性的存在除作鹽水介質(zhì)外，至少還要做聚凝胺法，有條件加做抗球、酶法等。在配血的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血或凝集獻(xiàn)血者的血液才能給病人輸注整理課件292024/1/23實(shí)際當(dāng)中難免有抗篩陰性，但交叉配血不合的情況，應(yīng)依據(jù)實(shí)際情況合理解釋：緡錢狀形成：血清在室溫和37℃中，使RBC假凝集。常見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、霍奇金病、其他表現(xiàn)為血沉加快的病例。交叉配血不相容，顯示有未撿明的同種抗體存在室溫反響中顯示有自身抗體AGT試驗(yàn)中顯示有自身抗體抗篩陰性，交叉配血陽(yáng)性，提示可能有未檢明的抗體存在離心力不當(dāng)，造成假陰性水浴箱溫度不正確，造成錯(cuò)誤結(jié)果RBC不正確的洗滌和懸浮，使AGT試驗(yàn)假陰性血清中如含有溶血性抗體，那么相應(yīng)RBC被溶解而不是凝集，交叉配血應(yīng)為陽(yáng)性。此時(shí)應(yīng)滅活血清再做試驗(yàn)。整理課件302024/1/23整理課件312024/1/23謝謝！整理課件322024/1/23疑難配血病例1.患冷凝集素綜合征,有自身冷凝集抗體,“O〞,病人3+血清自身抗體4+.采用抗人球蛋白法配血可消除此現(xiàn)象,輸“O〞洗滌紅細(xì)胞.2.輸血前:“A〞,輸A型紅細(xì)胞4u,無明顯反響,僅見少許Hb尿,很快