實(shí)驗(yàn)05DNA的粗提取與鑒定

專題05DNA的粗提取與鑒定一、實(shí)驗(yàn)原理1．提取DNA的原理利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精。(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。2．鑒定DNA的原理在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。二、方法步驟1．稱取約30g洋蔥，切碎，然后放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨。2．去除濾液中的雜質(zhì)方案一在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過(guò)濾到燒杯中，在4℃冰箱中放置幾分鐘后，再取上清液方案二直接將研磨液倒入塑料離心管中，在1500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，再取上清液3．DNA的析出方案一在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%)，靜置2～3min，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分方案二將溶液倒入塑料離心管中，在10000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，棄上清液，將管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA的鑒定取兩支20mL的試管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCl溶液中，再向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。三、操作提示1．以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，每100mL血液中需要加入3g檸檬酸鈉，防止血液凝固。2．加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。四、關(guān)鍵點(diǎn)撥1．利用動(dòng)物細(xì)胞提取DNA時(shí)，破碎細(xì)胞的方法：動(dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁，可直接使其吸水漲破。2．不能選用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核。3．提純DNA時(shí)，選用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精的原因：體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精提純效果更佳。DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)成功關(guān)鍵點(diǎn)（1）本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核(無(wú)DNA)，可選用雞血細(xì)胞作材料。(2)二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會(huì)影響鑒定的效果。(3)提取植物細(xì)胞的DNA，在研磨時(shí)加入NaCl的目的是溶解DNA。(4)在DNA進(jìn)一步提純時(shí)，選用預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的作用是溶解雜質(zhì)和析出DNA。1．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．裂解：使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B．分離：可去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等C．沉淀：可反復(fù)多次以提高DNA的純度D．鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】D【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。【詳解】A、裂解是加蒸餾水讓細(xì)胞吸水漲破，釋放出DNA等物質(zhì)，A正確；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，將溶液過(guò)濾，即可將混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等與DNA分離，B正確；C、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以反復(fù)多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA純度，C正確；D、將DNA溶解于NaCl，加入二苯胺試劑，沸水浴五分鐘，待冷卻后，能呈現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選D。2．（2023·江蘇·統(tǒng)考高考真題）某生物社團(tuán)利用洋蔥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮可代替半透膜探究質(zhì)膜的透性B．洋蔥勻漿中加入新配制的斐林試劑，溶液即呈磚紅色C．制作根尖有絲分裂裝片時(shí)，解離、漂洗、按壓蓋玻片都能更好地將細(xì)胞分散開D．粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后顯藍(lán)色【答案】A【分析】觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成，目的是使細(xì)胞分散開來(lái)）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過(guò)程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）。【詳解】A、洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮的原生質(zhì)層具有選擇透過(guò)性，可代替半透膜探究質(zhì)膜的透性，A正確；B、洋蔥勻漿中加入新配制的斐林試劑，需要水浴加熱才可能出現(xiàn)磚紅色沉淀，若出現(xiàn)磚紅色，則可說(shuō)明洋蔥勻漿中含有還原糖，B錯(cuò)誤；C、制作根尖有絲分裂裝片時(shí)，解離、按壓蓋玻片得目的都是為了獲得單層細(xì)胞，即這些操作均能更好地將細(xì)胞分散開，C錯(cuò)誤；D、粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后經(jīng)過(guò)水浴加熱可顯藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選A。3．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B．微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D．可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌【答案】D【分析】使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過(guò)程?！驹斀狻緼、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無(wú)菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；C、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；D、可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。故選D。4．（2022·山東·高考真題）關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解B．離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C．在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色D．粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)【答案】B【分析】DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斀狻緼、低溫時(shí)DNA酶的活性較低，過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解，A正確；B、離心研磨液是為了使細(xì)胞碎片沉淀，B錯(cuò)誤；C、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色，C正確；D、細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，可能有蛋白質(zhì)不溶于酒精，在95%的冷酒精中與DNA一塊兒析出，故粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)，D正確。故選B。5．（2021·天津·統(tǒng)考高考真題）孟德爾說(shuō)：“任何實(shí)驗(yàn)的價(jià)值和效用，取決于所使用材料對(duì)于實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡倪m合性?！毕铝袑?shí)驗(yàn)材料選擇不適合的是（

）A．用洋蔥鱗片葉表皮觀察細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象B．用洋蔥根尖分生區(qū)觀察細(xì)胞有絲分裂C．用洋蔥鱗片葉提取和分離葉綠體中的色素D．用洋蔥鱗片葉粗提取DNA【答案】C【分析】洋蔥是比較好的實(shí)驗(yàn)材料：①洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞觀察植物細(xì)胞的有絲分裂；②洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞，色素含量較多，用于觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原；③洋蔥的綠葉做葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，葉肉細(xì)胞做細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)實(shí)驗(yàn)。④洋蔥的內(nèi)表皮細(xì)胞顏色淺、由單層細(xì)胞構(gòu)成，適合觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布狀況?！驹斀狻緼、洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的液泡為紫色，便于觀察細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原現(xiàn)象，A正確；B、洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞分裂旺盛，可以用來(lái)觀察細(xì)胞有絲分裂，B正確；C、洋蔥鱗片葉不含葉綠體，不能用來(lái)提取和分離葉綠體中的色素，C錯(cuò)誤；D、洋蔥鱗片葉細(xì)胞有細(xì)胞核且顏色淺，可以用來(lái)粗提取DNA，D正確。故選C。6．（2021·北京·統(tǒng)考高考真題）關(guān)于物質(zhì)提取、分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，敘述錯(cuò)誤的是（）A．研磨肝臟以破碎細(xì)胞用于獲取含過(guò)氧化氫酶的粗提液B．利用不同物質(zhì)在酒精溶液中溶解性的差異粗提DNAC．依據(jù)吸收光譜的差異對(duì)光合色素進(jìn)行紙層析分離D．利用與雙縮脲試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來(lái)鑒定蛋白質(zhì)【答案】C【分析】綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)，提取色素時(shí)需要加入無(wú)水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）；分離色素時(shí)采用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴(kuò)散的速度不同，最后的結(jié)果是觀察到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素（橙黃色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍(lán)綠色）、葉綠素b（黃綠色）?！驹斀狻緼、肝臟細(xì)胞中存在過(guò)氧化氫酶，故需要破碎細(xì)胞制成肝臟研磨液來(lái)獲得過(guò)氧化氫酶的粗提液，A正確；B、不同物質(zhì)在酒精溶液中的溶解度不同，故可粗提取DNA，B正確；C、依據(jù)光合色素在層析液中的溶解度不同，對(duì)光合色素進(jìn)行紙層析分離，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑會(huì)發(fā)生紫色反應(yīng)，可以利用與雙縮脲試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來(lái)鑒定蛋白質(zhì)，D正確。故選C。7．（2021·山東·統(tǒng)考高考真題）粗提取DNA時(shí)，向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過(guò)濾，在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是（

）A．加入適量的木瓜蛋白酶B．37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘C．加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精D．加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0．14mol/L【答案】A【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，由于酶具有專一性，不能水解DNA，過(guò)濾后在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物，A正確；B、37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘不能去除濾液中的雜質(zhì)，應(yīng)該放在60~75℃的水浴箱中保溫10～15分鐘，使蛋白質(zhì)變性析出，B錯(cuò)誤；C、向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后在得到的濾液中加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精，此時(shí)DNA析出，不會(huì)進(jìn)入濾液中，C錯(cuò)誤；D、加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0．14mol/L，DNA在0．14mol/L的NaCl溶液中溶解度小，DNA析出，不會(huì)進(jìn)入濾液中，D錯(cuò)誤。故選A。8．（2014·江蘇·高考真題）下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯(cuò)誤的是A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?可見玻璃棒上有白色絮狀物D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)【答案】C【詳解】A、酵母菌和菜花含有DNA，可作為提取DNA的材料，A正確；B、DNA溶于2mol/L的NaCl溶液，也可溶于蒸餾水，B正確；C、向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，雞血細(xì)胞吸水漲破，獲得雞血細(xì)胞液，DNA溶于蒸餾水，觀察不到白色絮狀物，C錯(cuò)誤；D、DNA與二苯胺沸水浴加熱呈藍(lán)色，D正確。故選C。1．下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A．用蒸餾水使家兔的紅細(xì)胞漲破，可獲取富含DNA的濾液B．植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水漲破，釋放DNAC．DNA不溶于95%的冷酒精，但可溶于2mol/L的NaCl溶液D．鑒定DNA時(shí)，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴【答案】C【分析】1、DNA的溶解性：(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的；(2)DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性；洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、兔屬于哺乳動(dòng)物，哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，不能用于DNA的粗提取，A錯(cuò)誤；B、洗滌劑是去掉植物材料的細(xì)胞膜，不是細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；C、DNA不溶于95％的冷酒精和0.14mol/L的NaCl溶液，而溶于2mol/L的NaCl溶液，C正確；D、將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺試劑，沸水浴冷卻后呈藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選C。2．下列有關(guān)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是（

）A．將粗提取出的DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)B．在紫色洋蔥鱗片葉外表皮的不同部位觀察到的質(zhì)壁分離程度可能不同C．用顯微鏡觀察洋蔥根尖裝片時(shí)，需保持細(xì)胞活性以觀察有絲分裂過(guò)程D．檢測(cè)酵母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)物時(shí)，加入酸性重鉻酸鉀溶液出現(xiàn)灰綠色，說(shuō)明一定有酒精產(chǎn)生【答案】B【分析】1、植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的條件有：①必須是活細(xì)胞；②細(xì)胞液與外界溶液必須有濃度差；③植物細(xì)胞必須有大的液泡（成熟的植物細(xì)胞），且液泡最好有顏色便于觀察。2、DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、將組織中提取的DNA絲狀物溶解于2mol/L的氯化鈉溶液中，與二苯胺試劑混合，沸水浴后冷卻變藍(lán)，不能直接放入二苯胺試劑中，A錯(cuò)誤；B、紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位細(xì)胞的細(xì)胞液的濃度可能不同，因此用紫色洋蔥鱗片葉外表皮不同部位觀察到的質(zhì)壁分離程度可能不同，B正確；C、在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，解離步驟時(shí)細(xì)胞已經(jīng)被殺死，C錯(cuò)誤；D、由于酒精和葡萄糖都能與酸性重鉻酸鉀溶液發(fā)生相同顏色反應(yīng)，所以向A瓶的濾液中加入酸性重鉻酸鉀溶液，溶液若變?yōu)榛揖G色，還不能說(shuō)明一定有酒精產(chǎn)生，D錯(cuò)誤。故選B。3．關(guān)于“DNA的粗提取及鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA不溶于酒精而蛋白質(zhì)溶于酒精B．鑒定提取物中有DNA的原理是在常溫下，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色C．在提取白色絲狀物時(shí)單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNAD．往洋蔥研磨液經(jīng)離心后的上清液中加入冷酒精的目的是獲得含雜質(zhì)少的DNA【答案】B【分析】DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。【詳解】A、初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA不溶于酒精而蛋白質(zhì)溶于酒精，A正確；B、鑒定提取物中有DNA的原理是在水浴加熱條件下，DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色，B錯(cuò)誤；C、在提取白色絲狀物時(shí)單向攪拌比雙向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNA，C正確；D、往洋蔥研磨液經(jīng)離心后的上清液中加入冷酒精的目的是獲得含雜質(zhì)少的DNA，D正確。故選B。4．某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．取材時(shí)可選用雞血、洋蔥、菜花等富含DNA的材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)B．破碎植物細(xì)胞時(shí)，加入洗滌劑以加速細(xì)胞壁瓦解C．DNA的釋放和溶解是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵，調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度利于DNA釋放D．鑒定時(shí)，需將DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中，再加入二苯胺試劑即可出現(xiàn)藍(lán)色【答案】A【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、雞血、洋蔥、菜花等材料富含DNA，可以用來(lái)進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，A正確；B、破碎植物細(xì)胞時(shí)，加入洗滌劑以加速細(xì)胞膜瓦解，B錯(cuò)誤；C、用蒸餾水處理動(dòng)物細(xì)胞即可促進(jìn)細(xì)胞破裂，釋放內(nèi)容物，有利于DNA的釋放；調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度利于DNA的溶解或析出，C錯(cuò)誤；D、用二苯胺試劑鑒定提取的DNA時(shí)，沸水浴加熱冷卻后會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選A。5．下圖表示“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本流程，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）①取材→②破碎細(xì)胞→③獲得濾液→④去除雜質(zhì)→⑤進(jìn)一步提純→⑥D(zhuǎn)NA鑒定A．本實(shí)驗(yàn)使用的酒精的濃度與“低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目的變化”實(shí)驗(yàn)中的相同B．步驟①中可以使用豬的肝細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料C．步驟①中可以使用紗布對(duì)研磨液進(jìn)行過(guò)濾，并獲取上清液D．步驟⑥向試管中加入二苯胺試劑后靜置5min后即可呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】D【分析】DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法對(duì)它們進(jìn)行提取。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、本實(shí)驗(yàn)和“低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目的變化”實(shí)驗(yàn)所用的酒精濃度相同，都是體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精，A正確；B、豬的肝細(xì)胞中含有DNA，所以，步驟①中可以使用豬的肝細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，B正確；C、步驟①中可以使用紗布對(duì)研磨液進(jìn)行過(guò)濾，并獲取上清液，C正確；D、步驟⑥中DNA鑒定時(shí)向試管中加入二苯胺試劑后，應(yīng)將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后可觀察到藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選D。6．如圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的部分操作示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析，下列相關(guān)敘述中，正確的是（

）A．該實(shí)驗(yàn)的正確操作順序是③→①→②→④→⑤B．用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近C．⑤表示要鑒定步驟①中所得到的白色絲狀物主要成分為DNA，可使用二苯胺試劑來(lái)鑒定，沸水浴冷卻后，出現(xiàn)藍(lán)色的試管組別是對(duì)照組D．步驟①的目的是初步分離DNA與蛋白質(zhì)，析出并獲得DNA；步驟④中在2mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度較大【答案】D【分析】DNA的粗提取和鑒定的原理是：(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。(2)DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶液酒精。(3)DNA和蛋白質(zhì)對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。(4)DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色?！驹斀狻緼、DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水，破碎細(xì)胞→過(guò)濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定，因此圖中表示正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③→②→①→④→⑤，A錯(cuò)誤；B、豬血紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核，提取不到DNA，用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量不相同，B錯(cuò)誤；C、⑤表示要鑒定步驟①中所得到的白色絲狀物主要成分為DNA，可使用二苯胺試劑來(lái)鑒定，沸水浴冷卻后，出現(xiàn)藍(lán)色的試管組別是實(shí)驗(yàn)組，C錯(cuò)誤；D、步驟①的目的是析出并獲得DNA，步驟④中在2mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度較大，D正確。故選D。7．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．羊的成熟紅細(xì)胞可作為提取DNA的材料B．提取植物細(xì)胞的DNA時(shí)，需要加入一定量食鹽C．預(yù)冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解D．在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】A【分析】1、DNA粗提取與鑒定的原理（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的；（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離；2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響；3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、羊的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核，因此不可作為提取DNA的材料，A錯(cuò)誤；B、提取植物細(xì)胞的DNA時(shí)，需要加入一定量的洗滌劑和食鹽，洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜，而食鹽的作用是提高DNA的溶解度，B正確；C、預(yù)冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解，同時(shí)根據(jù)蛋白質(zhì)溶于酒精，而DNA不溶于酒精的特性將其析出，C正確；D、在沸水浴條件下，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色，據(jù)此鑒定DNA的存在，D正確。故選A。8．下列關(guān)于“DNA粗提取”的相關(guān)操作，錯(cuò)誤的是（

）A．應(yīng)選用DNA含量相對(duì)較高的材料，如雞血、洋蔥、菜花、香蕉、菠菜B．可利用DNA和蛋白質(zhì)在不同濃度NaCl溶液中溶解度的不同，將兩者分開C．研磨材料得到的濾液應(yīng)在4℃冰箱中靜置或離心，取沉淀進(jìn)行后續(xù)操作D．向經(jīng)酒精處理得到的白色絲狀物中加入蛋白酶，可提高DNA的相對(duì)含量【答案】C【分析】DNA的粗提取和鑒定的原理：DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離DNA和蛋白質(zhì)。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2的NaCl溶液中。在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斀狻緼、雞血、洋蔥、菜花、香蕉、菠菜等材料中DNA含量較高，可作為該實(shí)驗(yàn)材料，A正確；B、在不同濃度的NaCl溶液中，DNA和蛋白質(zhì)的溶解度不同，如DNA可溶于2mol/LNaCl溶液中，蛋白質(zhì)則不能，B正確；C、為防止DNA斷裂，應(yīng)將研磨液在4℃冰箱中靜置或離心，但要取濾液進(jìn)行后續(xù)操作，C錯(cuò)誤；D、經(jīng)酒精處理得到的白色絲狀物中含有一定的蛋白質(zhì)雜質(zhì)，可加入蛋白酶，去除蛋白質(zhì)雜質(zhì)，提高DNA的相對(duì)含量，D正確。故選C。9．下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．新鮮的洋蔥、菜花、香蕉、豬肝等可作為提取DNA的材料B．DNA析出過(guò)程中，攪拌操作要輕柔并沿一個(gè)方向攪拌以防DNA斷裂C．預(yù)冷的酒精溶液可用來(lái)進(jìn)一步純化粗提取的DNAD．將白色絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺試劑，混勻后呈藍(lán)色【答案】D【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。【詳解】A、新鮮的洋蔥、菜花、香蕉、豬肝等都含有DNA，能夠作為提取DNA的材料，A正確；B、DNA分子從細(xì)胞中被釋放出來(lái)且除去蛋白后是非常容易斷裂的，如果太過(guò)劇烈的攪拌，DNA鏈可能會(huì)被破壞，因此輕柔攪拌的目的是為了獲得較完整的DNA分子，B正確；C、在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大，可用來(lái)進(jìn)一步純化粗提取的DNA，C正確；D、將白色絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑，混勻后，在沸水浴條件下，呈藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選D。10．葉綠體DNA（cpDNA）大多為環(huán)狀雙鏈，其基因組序列高度保守，目前已在分子標(biāo)記、核質(zhì)互作、葉綠體基因工程等方面開展了廣泛研究。下列為提取cpDNA的相關(guān)步驟。其中，SDS使膜瓦解，苯酚使蛋白質(zhì)變性析出，氯仿與苯酚互溶，易于除去苯酚。(1)葉綠體的分離：①勻漿使細(xì)胞破碎：將葉片于4℃冰箱黑暗饑餓處理12~24h后，剪成1cm長(zhǎng)度，放入勻漿機(jī)，倒入緩沖液，先低速勻漿2次，再高速勻漿3次，每次5~10s。勻漿前黑暗饑餓處理的目的是，有利于cpDNA的提取。②離心得到葉綠體粗提物：將勻漿液過(guò)濾后離心，棄沉淀去除細(xì)胞殘?。粚⒌玫降纳锨逡涸俅坞x心，棄上清，即得葉綠體粗提物，第二次離心的速度比第一次。此過(guò)程中，線粒體分布在中，從而避免了線粒體DNA對(duì)cpDNA的污染。(2)去除核DNA：向葉綠體粗提物中加入、緩沖液，37℃靜置15min后，離心取沉淀，從而去除吸附在葉綠體外膜上的核DNA．(3)葉綠體的裂解和cpDNA的粗提：將純化的葉綠體加入緩沖液、SDS、蛋白酶K，55℃水浴3h，使葉綠體裂解，釋放出cpDNA，離心取上清液。在上清液中加入苯酚和氯仿，離心后的液體包括上層水相、中層變性蛋白和下層有機(jī)溶劑，cpDNA分布于中，小心用移液槍吸取該層液體。(4)獲得cpDNA：向粗提溶液中加入醋酸鈉及預(yù)冷的，離心取。(5)電泳檢測(cè)cpDNA：圖1、2是某品種茶樹用上述方法提取到的cpDNA凝膠電泳結(jié)果，其中M是。2組無(wú)條帶，表明提取不成功，其可能的原因之一是操作過(guò)程中葉綠體裂解時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，導(dǎo)致。(6)葉綠體基因的遺傳方式屬于遺傳，（填“遵循”或“不遵循”）孟德爾遺傳定律。不會(huì)隨傳給后代，從而可以避免造成基因污