溶菌酶的研究進(jìn)展_第1頁
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溶菌酶的研究進(jìn)展_第5頁
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文檔簡介

溶菌酶的研究進(jìn)展一、本文概述溶菌酶是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的水解酶,具有溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的能力,因此在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。本文旨在全面綜述溶菌酶的研究進(jìn)展,包括其生物學(xué)特性、生產(chǎn)方法、應(yīng)用領(lǐng)域以及最新的研究進(jìn)展等方面。我們將首先介紹溶菌酶的基本性質(zhì)和生物學(xué)功能,然后重點討論其在各個領(lǐng)域的應(yīng)用現(xiàn)狀,并探討溶菌酶研究的發(fā)展趨勢和前景。通過本文的闡述,我們期望能夠為讀者提供一個關(guān)于溶菌酶研究進(jìn)展的全面而深入的視角,為未來的研究和應(yīng)用提供有益的參考。二、溶菌酶的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)溶菌酶是一種具有廣泛生物活性的水解酶,其結(jié)構(gòu)與性質(zhì)對于理解其生物功能和應(yīng)用潛力至關(guān)重要。溶菌酶的主要結(jié)構(gòu)特點表現(xiàn)為其緊湊的球形結(jié)構(gòu),這種結(jié)構(gòu)賦予了它出色的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性。溶菌酶分子內(nèi)部含有多個活性位點,這些位點是酶發(fā)揮其催化作用的關(guān)鍵。溶菌酶具有高度的底物特異性,主要作用于細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu),通過水解N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之間的β-1,4糖苷鍵,導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞壁的裂解。這種特性使得溶菌酶成為一種有效的抗菌劑,對于治療某些細(xì)菌感染具有重要價值。溶菌酶還表現(xiàn)出對其他生物分子的非特異性相互作用,如與DNA、RNA和蛋白質(zhì)的結(jié)合。這些相互作用可能影響溶菌酶在細(xì)胞內(nèi)的分布和功能,進(jìn)一步揭示了溶菌酶在生物體內(nèi)的復(fù)雜作用機制。在生物化學(xué)性質(zhì)方面,溶菌酶表現(xiàn)出對pH和溫度的敏感性。其最適pH通常在0-0之間,而在高溫下,溶菌酶的活性會顯著降低。這些性質(zhì)對于溶菌酶的應(yīng)用條件選擇具有重要意義。隨著對溶菌酶結(jié)構(gòu)與性質(zhì)研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)了多種具有不同來源和特性的溶菌酶。這些溶菌酶在結(jié)構(gòu)、催化活性、穩(wěn)定性等方面存在差異,為溶菌酶的應(yīng)用提供了更多的選擇。例如,來自不同物種的溶菌酶在抗菌活性、底物特異性等方面可能存在差異,這為開發(fā)新型抗菌藥物提供了理論基礎(chǔ)。對溶菌酶結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的研究不僅有助于深入了解其生物功能和應(yīng)用潛力,還為開發(fā)新型抗菌藥物和治療策略提供了重要依據(jù)。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信人們對溶菌酶的認(rèn)識和利用會更加深入和廣泛。三、溶菌酶的來源與制備溶菌酶作為一種具有廣泛應(yīng)用價值的生物活性物質(zhì),其來源與制備方法一直是科研工作者關(guān)注的焦點。溶菌酶的來源主要包括天然來源和人工合成兩大類。天然來源的溶菌酶主要存在于動植物及微生物體內(nèi),其中動物來源的溶菌酶多見于鳥類、爬行類及哺乳動物的體液中,如唾液、眼淚、血漿等。鳥類蛋清中的溶菌酶含量豐富,提取工藝成熟,是溶菌酶的重要天然來源之一。微生物來源的溶菌酶則多見于細(xì)菌、真菌等微生物的發(fā)酵產(chǎn)物中,其中細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)溶菌酶具有產(chǎn)量高、易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點,成為當(dāng)前研究的熱點。人工合成溶菌酶則主要通過基因工程技術(shù)實現(xiàn)。利用基因工程技術(shù),可以在體外構(gòu)建溶菌酶基因的表達(dá)系統(tǒng),通過誘導(dǎo)表達(dá)獲得大量的溶菌酶蛋白。這種方法的優(yōu)點在于可以根據(jù)需要對溶菌酶進(jìn)行基因改造,從而獲得具有特殊功能的溶菌酶變體。同時,基因工程技術(shù)的發(fā)展也為溶菌酶的規(guī)?;a(chǎn)提供了可能。溶菌酶的制備方法則主要包括提取法和發(fā)酵法兩種。提取法是從天然來源中提取溶菌酶,常用的提取方法有鹽析法、有機溶劑提取法、離子交換法等。這些方法操作簡便,但提取效率較低,且提取的溶菌酶純度不高,需要進(jìn)一步純化。發(fā)酵法則是利用微生物發(fā)酵產(chǎn)生溶菌酶,通過優(yōu)化發(fā)酵條件、篩選高產(chǎn)菌株等手段提高溶菌酶的產(chǎn)量。發(fā)酵法具有產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點,是當(dāng)前溶菌酶制備的主要方法。隨著科技的進(jìn)步和研究的深入,溶菌酶的來源與制備方法將不斷得到優(yōu)化和改進(jìn)。未來,我們期待通過基因工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)的結(jié)合,實現(xiàn)溶菌酶的高效、綠色、可持續(xù)生產(chǎn),為溶菌酶在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的應(yīng)用提供更為堅實的基礎(chǔ)。四、溶菌酶的應(yīng)用研究溶菌酶,作為一種具有廣泛生物活性的酶,其應(yīng)用研究近年來取得了顯著的進(jìn)展。由于其獨特的溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的能力,溶菌酶在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)、環(huán)保等多個領(lǐng)域均展現(xiàn)出了廣闊的應(yīng)用前景。在醫(yī)藥領(lǐng)域,溶菌酶因其抗菌、抗病毒和抗炎作用,被廣泛用于口腔清潔劑、眼藥水、創(chuàng)傷愈合劑等藥物中。研究還發(fā)現(xiàn)溶菌酶對某些癌癥細(xì)胞具有抑制作用,為癌癥治療提供了新的思路。在食品工業(yè)中,溶菌酶被用作天然防腐劑,可以有效地延長食品的保質(zhì)期。同時,它還可以用于制作無糖食品,改善食品的口感和營養(yǎng)價值。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,溶菌酶作為一種生物農(nóng)藥,對多種植物病原菌具有抑制作用,且對環(huán)境友好,不會對農(nóng)作物產(chǎn)生藥害。溶菌酶還可用于制備生物肥料,提高農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。在環(huán)保領(lǐng)域,溶菌酶可以降解某些難以降解的有機污染物,減輕環(huán)境污染。溶菌酶還可以用于污水處理,提高污水處理的效率。未來,隨著對溶菌酶結(jié)構(gòu)和功能的深入研究,以及新的應(yīng)用領(lǐng)域的不斷拓展,溶菌酶的應(yīng)用研究將取得更加顯著的成果。也需要關(guān)注溶菌酶在應(yīng)用過程中可能產(chǎn)生的安全性問題,以確保其在實際應(yīng)用中的安全和有效。五、溶菌酶的研究進(jìn)展溶菌酶,作為一種具有廣泛生物活性的水解酶,近年來在科研領(lǐng)域取得了顯著的研究進(jìn)展。這些進(jìn)展不僅深入揭示了溶菌酶的生物化學(xué)特性,還進(jìn)一步拓展了其在醫(yī)學(xué)、生物工程和農(nóng)業(yè)等多個領(lǐng)域的應(yīng)用。在結(jié)構(gòu)生物學(xué)方面,科學(xué)家們通過射線晶體學(xué)、核磁共振等技術(shù)手段,對溶菌酶的三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行了高分辨率的解析,從而詳細(xì)闡明了其催化機制。這些結(jié)構(gòu)信息為后續(xù)的蛋白質(zhì)工程改造提供了重要的理論基礎(chǔ)。在功能研究方面,溶菌酶作為一種具有抗菌活性的酶,其在免疫系統(tǒng)中的作用日益受到關(guān)注。研究表明,溶菌酶能夠破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁,從而達(dá)到殺菌的目的。溶菌酶還具有抗炎、抗病毒等活性,為開發(fā)新型抗菌藥物提供了候選分子。在應(yīng)用研究方面,溶菌酶在醫(yī)學(xué)、生物工程和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的應(yīng)用取得了顯著進(jìn)展。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,溶菌酶被用于治療口腔潰瘍、皮膚感染等疾病,其抗菌效果得到了廣泛認(rèn)可。在生物工程領(lǐng)域,溶菌酶被用于構(gòu)建生物傳感器、藥物載體等,為生物醫(yī)學(xué)工程的發(fā)展提供了有力支持。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,溶菌酶作為一種環(huán)保型生物農(nóng)藥,對防治植物病害具有顯著效果,為綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新途徑。未來,隨著對溶菌酶研究的不斷深入,相信其在生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)和生物工程等領(lǐng)域的應(yīng)用將會更加廣泛。隨著基因編輯、蛋白質(zhì)工程等技術(shù)的不斷發(fā)展,溶菌酶的改造和優(yōu)化也將成為研究的熱點,有望為藥物研發(fā)、疾病治療等領(lǐng)域帶來革命性的突破。六、溶菌酶的未來發(fā)展趨勢與挑戰(zhàn)隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展和人類對溶菌酶認(rèn)識的深入,溶菌酶作為一種重要的生物酶,在未來的科學(xué)研究與應(yīng)用中將展現(xiàn)出更為廣闊的前景。然而,挑戰(zhàn)與機遇并存,溶菌酶領(lǐng)域的研究者需要面對一系列的問題和困難,同時也將迎來更多的創(chuàng)新機會。溶菌酶作為一種具有廣泛應(yīng)用價值的生物酶,其在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、食品、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用前景廣闊。例如,在醫(yī)藥領(lǐng)域,溶菌酶可以作為抗菌藥物,用于治療由細(xì)菌引起的各種感染疾病;在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,溶菌酶可以作為生物農(nóng)藥,用于防治農(nóng)作物病害;在食品領(lǐng)域,溶菌酶可以作為食品添加劑,用于提高食品的質(zhì)量和安全性;在環(huán)保領(lǐng)域,溶菌酶可以作為生物降解劑,用于處理有機廢棄物和廢水等。然而,要實現(xiàn)溶菌酶在各個領(lǐng)域的應(yīng)用,還需要解決一些關(guān)鍵的技術(shù)問題。溶菌酶的穩(wěn)定性問題。溶菌酶在不同的環(huán)境條件下容易失去活性,這限制了其在某些領(lǐng)域的應(yīng)用。因此,如何提高溶菌酶的穩(wěn)定性,是當(dāng)前研究的一個重要方向。溶菌酶的生產(chǎn)成本問題。目前,溶菌酶的生產(chǎn)主要依賴于微生物發(fā)酵和動植物提取等方法,這些方法存在成本高、產(chǎn)量低等問題。因此,開發(fā)新的、高效的溶菌酶生產(chǎn)方法,是降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)量的關(guān)鍵。隨著溶菌酶應(yīng)用的不斷拓展,其對于生態(tài)環(huán)境和人類健康的影響也需要引起關(guān)注。例如,溶菌酶在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用可能會對土壤微生物群落產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響到農(nóng)作物的生長和產(chǎn)量;在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用可能會對人體內(nèi)的微生物平衡產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響到人體健康。因此,如何在保證溶菌酶應(yīng)用效果的減少其對生態(tài)環(huán)境和人類健康的影響,也是未來研究的一個重要方向。溶菌酶作為一種重要的生物酶,在未來的科學(xué)研究與應(yīng)用中將面臨更多的機遇和挑戰(zhàn)。只有不斷創(chuàng)新、解決關(guān)鍵技術(shù)問題、關(guān)注生態(tài)環(huán)境和人類健康的影響,才能更好地推動溶菌酶領(lǐng)域的發(fā)展,為人類的生產(chǎn)和生活帶來更多的福祉。七、結(jié)論隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,溶菌酶作為一種重要的生物活性物質(zhì),其研究進(jìn)展日益受到廣泛關(guān)注。本文綜述了溶菌酶在多個領(lǐng)域的研究進(jìn)展,包括其來源、提取純化技術(shù)、結(jié)構(gòu)與功能、生物活性、應(yīng)用以及未來的發(fā)展趨勢。在溶菌酶的來源方面,已經(jīng)從傳統(tǒng)的動物、植物和微生物擴展到基因工程菌、轉(zhuǎn)基因動植物等新型生物反應(yīng)器。提取純化技術(shù)的不斷完善使得溶菌酶的純度不斷提高,為研究其結(jié)構(gòu)與功能提供了高質(zhì)量的樣品。溶菌酶獨特的結(jié)構(gòu)特征使其具有多種生物活性,如抗菌、抗病毒、抗腫瘤等,因此在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等多個領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。隨著研究的深入,溶菌酶的應(yīng)用領(lǐng)域也在不斷擴展。在醫(yī)藥領(lǐng)域,溶菌酶已被用于治療某些細(xì)菌感染、病毒感染和腫瘤等疾病。在食品工業(yè)中,溶菌酶可以作為防腐劑添加到食品中,延長食品的保質(zhì)期。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,溶菌酶可以作為生物農(nóng)藥使用,減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量,保護(hù)環(huán)境。未來,隨著基因工程、蛋白質(zhì)工程等生物技術(shù)的不斷發(fā)展,溶菌酶的研究將更加深入。通過基因改造和蛋白質(zhì)修飾等手段,可以進(jìn)一步提高溶菌酶的活性、穩(wěn)定性和安全性,拓寬其應(yīng)用領(lǐng)域。對溶菌酶的作用機制和生物活性進(jìn)行深入研究,有望為新型藥物和生物防治產(chǎn)品的研發(fā)提供有力支持。溶菌酶作為一種具有多種生物活性的生物活性物質(zhì),在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和研究的不斷深入,溶菌酶的應(yīng)用領(lǐng)域?qū)⒉粩鄶U大,為人類健康和環(huán)境保護(hù)做出更大的貢獻(xiàn)。參考資料:溶菌酶是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的天然酶,具有抗菌、抗炎、抗病毒等多種生物活性。近年來,隨著人們對溶菌酶的深入了解和應(yīng)用,其在醫(yī)學(xué)、食品和生物技術(shù)等領(lǐng)域的應(yīng)用價值不斷被挖掘。本文將綜述溶菌酶的研究進(jìn)展,以期為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供參考。溶菌酶是一種專門作用于微生物細(xì)胞壁的酶,它能分解細(xì)菌、真菌等微生物的細(xì)胞壁,導(dǎo)致微生物細(xì)胞溶解。溶菌酶具有抗菌、抗炎、抗病毒等多種生物活性,且對人體無毒副作用。其作用機理主要是通過水解微生物細(xì)胞壁的肽聚糖,使其失去保護(hù)作用,進(jìn)而引起微生物細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)泄漏,最終導(dǎo)致微生物死亡。溶菌酶根據(jù)其來源可分為兩類:天然溶菌酶和重組溶菌酶。天然溶菌酶主要從動物、植物和微生物中提取,而重組溶菌酶則通過基因工程技術(shù)制備。目前,越來越多的研究集中在重組溶菌酶的制備上,因為它可以大規(guī)模生產(chǎn)且具有更高的生產(chǎn)效率。溶菌酶具有廣譜的抗菌活性,能夠分解多種微生物的細(xì)胞壁。溶菌酶還具有抗炎、抗病毒等作用,因此在醫(yī)學(xué)和食品等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值。近年來,研究者們對溶菌酶的穩(wěn)定性、活性影響因素等方面進(jìn)行了深入研究,為其應(yīng)用提供了理論依據(jù)。溶菌酶在醫(yī)學(xué)、食品和生物技術(shù)等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。在醫(yī)學(xué)方面,溶菌酶可以用于治療口腔潰瘍、鼻炎等疾病,也可以用于外科手術(shù)中的消毒殺菌。在食品方面,溶菌酶可以用于制作保健食品、添加劑等,還可以用于食品保鮮和加工過程中的殺菌消毒。在生物技術(shù)方面,溶菌酶可以用于生物工程、基因工程等領(lǐng)域的細(xì)胞培養(yǎng)過程中,作為細(xì)胞破壁劑和雜質(zhì)去除劑。傳統(tǒng)的研究方法主要是通過對溶菌酶的來源、性質(zhì)、作用機理等方面進(jìn)行深入研究,進(jìn)而探討其在醫(yī)學(xué)、食品和生物技術(shù)等領(lǐng)域的應(yīng)用。這些方法包括微生物分離、發(fā)酵培養(yǎng)、蛋白質(zhì)純化、活性測定等。隨著科技的不斷進(jìn)步,最新的研究方法如基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)等被應(yīng)用于溶菌酶的研究。這些方法可以幫助研究者更深入地了解溶菌酶的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系,為改良溶菌酶的性能和開發(fā)新的應(yīng)用提供理論支持。近年來,溶菌酶的研究取得了顯著的成果。在溶菌酶的制備方面,研究者們通過基因工程技術(shù)成功地制備出了重組溶菌酶,并實現(xiàn)了大規(guī)模生產(chǎn)。在溶菌酶的特性研究方面,研究者們深入探討了其作用機理、穩(wěn)定性、活性影響因素等,為其應(yīng)用提供了理論依據(jù)。溶菌酶在醫(yī)學(xué)、食品和生物技術(shù)等領(lǐng)域的應(yīng)用也取得了不少進(jìn)展,如在口腔潰瘍、鼻炎等疾病的治療和食品保鮮等方面的應(yīng)用。溶菌酶作為一種具有抗菌、抗炎、抗病毒等多種生物活性的天然酶,在醫(yī)學(xué)、食品和生物技術(shù)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。雖然溶菌酶的研究取得了一定的進(jìn)展,但仍存在許多不足和需要進(jìn)一步探討的問題。例如,溶菌酶的作用機理尚不完全清楚,重組溶菌酶的制備和優(yōu)化仍需進(jìn)一步研究,其在醫(yī)學(xué)和食品等領(lǐng)域的應(yīng)用也需要進(jìn)一步拓展。因此,未來需要加強溶菌酶的基礎(chǔ)研究,不斷優(yōu)化其制備工藝和應(yīng)用條件,以更好地發(fā)揮其在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用價值。溶菌酶是一種廣泛存在于人體、動物、植物中的天然生物活性物質(zhì),具有抗菌、抗炎、抗病毒等作用。在各種來源的溶菌酶中,動物源溶菌酶因其獨特的生物學(xué)特性而備受。本文將對動物源溶菌酶的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。溶菌酶是一種能水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖的堿性蛋白酶。在動物體內(nèi),溶菌酶主要分布在眼淚、唾液、呼吸道和消化道等黏膜表面。動物體內(nèi)的某些組織和器官,如乳腺、子宮、尿液等也含有溶菌酶。根據(jù)來源不同,動物源溶菌酶可分為以下幾類:血清溶菌酶(LYSOzyme)主要存在于哺乳動物的血清中。它的分子量為15kDa,最適pH值為中性至弱堿性。血清溶菌酶具有廣譜的抗菌活性,能水解多種革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌的肽聚糖。組織溶菌酶主要存在于動物的各種組織和器官中,如乳腺、子宮等。這些組織和器官中的溶菌酶可能具有特殊的生物學(xué)作用,如參與免疫防御、調(diào)節(jié)局部炎癥等。分泌型溶菌酶主要分布在動物的體液(如眼淚、唾液、呼吸道分泌物等)和乳汁中。它們在維持機體黏膜屏障功能、參與機體免疫反應(yīng)等方面發(fā)揮重要作用。分泌型溶菌酶通常具有較低的分子量(<30kDa),具有廣泛的抗菌活性。溶菌酶的抗菌活性是其最重要的生物學(xué)特性之一。動物源溶菌酶對多種革蘭氏陽性菌(如金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌等)和部分革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌、志賀氏桿菌等)具有明顯的抗菌作用。溶菌酶還可以激活補體、促進(jìn)白細(xì)胞吞噬等非特異性免疫防御反應(yīng),從而提高機體對病原微生物的抵抗力。除了抗菌活性外,部分動物源溶菌酶還具有抗病毒活性。它們可以抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制和傳播,從而減輕病毒感染引起的癥狀。例如,豬血清溶菌酶可以抑制流感病毒、新城疫病毒等的復(fù)制;雞唾液溶菌酶可以抑制禽流感病毒的傳播。動物源溶菌酶還具有抗炎活性。它們可以抑制炎癥介質(zhì)(如組胺、5-羥色胺等)的釋放,減輕炎癥反應(yīng)引起的組織損傷。例如,豬血清溶菌酶可以抑制炎癥介質(zhì)釋放,緩解關(guān)節(jié)炎等炎癥反應(yīng)。動物源溶菌酶作為一種天然生物活性物質(zhì),具有抗菌、抗炎、抗病毒等多種生物學(xué)特性,因此在醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。在醫(yī)藥領(lǐng)域,動物源溶菌酶可以用于治療細(xì)菌感染引起的疾病,如肺炎、支氣管炎等。它們還可以用于制備疫苗佐劑,提高疫苗的免疫效果。例如,豬血清溶菌酶可以作為佐劑用于制備流感疫苗,提高疫苗的免疫保護(hù)效果。在食品領(lǐng)域,動物源溶菌酶可以用于制作功能性食品和保健品。例如,將溶菌酶添加到乳制品中可以提高其抗菌效果,延長保質(zhì)期;將溶菌酶添加到肉類制品中可以提高其風(fēng)味和營養(yǎng)價值;將溶菌酶添加到飼料中可以改善動物的腸道健康和提高其抗病能力。溶菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一種能水解細(xì)菌中黏多糖的堿性酶。溶菌酶主要通過破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)合體,使病毒失活。該酶廣泛存在于人體多種組織中,鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、乳汁等液體,以及微生物也含此酶,其中以蛋清含量最為豐富。其中根據(jù)其來源的不同,可以將其分為四類,分別是植物溶菌酶、動物溶菌酶、微生物溶菌酶以及蛋清溶菌酶。中文同義詞:脆壁質(zhì)酶;雞蛋白;胞壁質(zhì)酶(N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶);溶菌酶(雞蛋清)英文同義詞:muramidase;bacteriolyticenzyme溶菌酶純品呈白色、微黃或黃色的結(jié)晶體或無定形粉末,無異味,微甜,易溶于水,不溶于丙酮、乙醚。溶菌酶遇堿易被破壞,但在酸性環(huán)境下,溶菌酶對熱的穩(wěn)定性很強,在pH值為4-7時,100℃處理1min,仍能較好地保持活力:pH值為3時,能耐100℃加熱處理45min。溶菌酶化學(xué)性質(zhì)非常穩(wěn)定,當(dāng)pH值在一定范圍內(nèi)劇烈變化時,其結(jié)構(gòu)幾乎不變。溶菌酶不可逆變性的臨界點是77℃,隨溶劑的變化,不可逆變性臨界點也發(fā)生變化,當(dāng)溶菌酶所處溶液pH值小于1時,不可逆變性臨界點降低到43℃。溶菌酶最適pH為3~4,可用于低酸性食品防腐;溶菌酶作為防腐劑安全性高,可被冷凍或干燥處理,且活力穩(wěn)定。溶菌酶對幾種變性劑的敏感程度為:二惡烷>二甲基乙酰胺>二甲基甲酰胺>丙酮,并且隨溶劑用量的增加而直線下降。溶菌酶能有效地水解細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖,其水解位點是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子間的β-4糖苷鍵。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成份,它是由NAM、NAG和肽“尾”(由4個氨基酸殘基)組成,NAM與NAG通過β-4糖苷鍵相連,肽“尾”則是通過D-乳酰羧基連在NAM的第3位碳原子上,肽尾之間通過肽“橋”(肽鍵或少數(shù)幾個氨基酸)連接,NAM、NAG、肽“尾”與肽“橋”共同組成了肽聚糖的多層網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),作為細(xì)胞壁的骨架,上述結(jié)構(gòu)中的任何化學(xué)鍵斷裂,皆能導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞壁的損傷。對于革蘭氏陽性菌(G+),如藤黃微球菌、枯草桿菌或溶壁微球菌等,與革蘭氏陰性菌(G-),如大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿菌等,其細(xì)胞壁中肽聚糖含量不同,G+細(xì)菌細(xì)胞壁幾乎全部由肽聚糖組成,而G-細(xì)菌只有內(nèi)壁層為肽聚糖,因此,溶菌酶對于破壞G+細(xì)菌的細(xì)胞壁較G-細(xì)菌強。目前溶菌酶可以以雞蛋清和蛋殼膜為材料提取制得,常用的方法有親和層析法、離子交換樹脂法、直接結(jié)晶法和聚丙烯酸沉淀法等。親和層析法是利用蛋白質(zhì)和酶的生物學(xué)特異性,即蛋白質(zhì)或酶與其配體之間所具有的專一性親和力而設(shè)計的色譜技術(shù)。酶一底物復(fù)合物形成之后,在一定的條件下分離復(fù)合物便得到純凈的酶。常常使用的吸附劑為幾丁質(zhì)及其衍生物,如:幾丁質(zhì)粉、羧甲基幾丁質(zhì)、幾丁質(zhì)包埋纖維素、脫氨幾丁質(zhì)粉、N-?;瘹ぞ厶?、脫氨再生幾丁質(zhì)凝膠。離子交換法是利用離子交換劑與溶液中的離子之間所生的交換反應(yīng)來進(jìn)行分離的,分離的效果較好,廣泛用于微量組分的富集。一般流程為:鮮蛋一預(yù)處理一攪拌吸附一上柱洗脫一等電點沉淀一透析一噴霧干燥一成品。溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內(nèi),分子帶正電荷,可吸附于弱酸性陽離子交換樹脂上,洗脫后鹽析,可得溶菌酶沉淀,再進(jìn)行精制可得成品。蛋清吸附724樹脂,洗滌緩沖液洗脫,硫酸銨溶液鹽析透析,用NaOH去堿性蛋白,凍干溶菌酶,凍干粉沉淀干燥得到溶菌酶。在5—10℃下,將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg724樹脂中,攪拌吸附6h,在0—5℃靜置過夜。傾出上層蛋清,樹脂離心甩干,用蒸餾水反復(fù)洗去黏附的卵蛋白,然后將樹脂裝入柱內(nèi),用15mol/L、pH=5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂,再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫,收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨,使最終含硫酸銨量為40%,有白色沉淀生成,冷處放置過夜。虹吸上層清液,沉淀吸濾抽干,再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀,然后裝入透析袋,在約5℃的條件下,對蒸餾水透析24h左右,中間換水2—3次。離心去除沉淀,沉淀再用少量水洗一次,洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液,同時不斷攪拌,使pH值上升到0—0,如有白色沉淀,即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調(diào)pH=0,冷凍干燥,即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調(diào)pH=5,在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉,在約5℃的溫度下靜置48h,離心,沉淀用0℃丙酮洗滌,干燥,即得溶菌酶。在蛋清中加入一定量的碘化物或碳酸鹽等鹽類,并調(diào)pH值至5—0,溶菌酶會以結(jié)晶形式慢慢析出,而大多數(shù)蛋白質(zhì)仍然在溶液。在超濾濃縮脫鹽后,為獲得較純產(chǎn)品,采用結(jié)晶純化酶液經(jīng)超濾處理后,用NaOH調(diào)整pH5,離心去除。上清液在緩緩攪拌下,加NaCl至5%,靜置一周,得粗結(jié)晶。結(jié)晶溶于pH6醋酸水中,分去不溶物后,進(jìn)行重結(jié)晶,結(jié)晶的最終得率為60%左右。即每公斤蛋清中可得重結(jié)晶品近3g,活力測定為8000U/mg。聚丙烯酸沉淀法為將提取過濾后含酶洗脫液,首先經(jīng)過吸附步驟,即將過濾后的澄清溶液用20%的NaOH溶液調(diào)pH至0,在調(diào)pH值的過程中不停的攪拌。有少量的乳白色沉淀析出,然后加入15%聚丙烯酸,立即有白色沉淀析出,加至pH值為0為止,靜置17個小時進(jìn)行靜析,得到粘附于底部的乳白色膠狀物。第二步解離,將前步得到的溶菌酶聚丙烯酸凝聚物。加入少量蒸餾水并用5mol/L的碳酸鈉,將其溶解,轉(zhuǎn)移后,將pH值調(diào)到5。加入5%CaCl2溶液將溶菌酶聚丙烯酸解離,至無沉淀析出,然后過濾,得到澄清溶液。第三步鹽析,將所得澄清溶液加入5%的NaCI溶液攪拌均勻。放入冰箱調(diào)溫度為0℃。待有晶體析出后,用無水乙醇洗滌數(shù)次,置恒溫培養(yǎng)箱中40℃條件下干燥稱重。貯藏過久或貯藏條件不利,會使酶活不同程度的降低;如溫度濕度過高,則需要在使用時適當(dāng)?shù)脑黾邮褂昧???勺鳛橐环N具有殺菌作用的天然抗感染物質(zhì)。有抗菌、抗病毒、止血、消腫止痛及加快組織恢復(fù)功能等作用。溶菌酶含片用于急慢性咽炎、口腔潰瘍等。它對革蘭氏陽性菌、喜氧性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣型芽孢桿菌等都有抗菌作用,而對沒有細(xì)胞壁的人體細(xì)胞不會產(chǎn)生不利影響。因此,適合于各種食品的防腐。另外,該酶還能殺死腸道腐敗球菌,增加腸道抗感染力,同時還能促進(jìn)嬰兒腸道雙歧乳酸桿菌增殖,促進(jìn)乳酪蛋白凝乳利于消化,所以又是嬰兒食品、飲料的良好添加劑。溶菌酶專性水解細(xì)菌細(xì)胞壁的特點,有助于了解細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造:將細(xì)胞壁分解后制備成的原生質(zhì)體,可用于微生物分類以及微生物育種等學(xué)術(shù)研究。近年來,溶菌酶已成為細(xì)胞工程和基因工程必不可少的工具酶,用來提取和制造酶、核酸和活性多肽等。溶菌酶來自單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞,是一種能溶解某些細(xì)菌的酶類??山徒飧锾m氏陽性球菌壁上的乙酰氨基多糖成分,使細(xì)胞壁破裂。其

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