細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講培訓(xùn)課件

細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講2細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講3細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講一、外膜孔蛋白減少或丟失細(xì)胞內(nèi)抗生素濃度降低膜孔蛋白(OprD):

4細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講細(xì)胞外膜上的某些特殊蛋白是一種非特異性的、跨越細(xì)胞膜的水溶性物質(zhì)擴(kuò)散通道。膜孔蛋白5細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞膜6細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講某些細(xì)菌本身存在的膜孔蛋白較少或蛋白通道較小，使一些抗菌藥物不能進(jìn)入菌體內(nèi)部，稱(chēng)為“內(nèi)在性耐藥”或“固有性耐藥”（intrinsicallyresistant），即這種耐藥并非是由于任何染色體的突變或是耐藥質(zhì)粒的獲得所致。如銅綠假單胞菌的細(xì)胞外膜上沒(méi)有大多數(shù)革蘭陰性細(xì)菌所具有的典型的高滲透性孔蛋白，它的孔蛋白通道對(duì)小分子物質(zhì)的滲透速度僅為典型孔蛋白通道的1%。

“先天不足”7細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講一些具有高滲透性外膜且對(duì)抗菌藥物敏感的細(xì)菌可以通過(guò)降低外膜的滲透性而發(fā)展成為耐藥菌，即原有的孔蛋白通道由于細(xì)菌發(fā)生突變而使該孔蛋白通道關(guān)閉或消失，則細(xì)菌就會(huì)對(duì)該抗菌藥物產(chǎn)生很高的耐藥性。亞胺培南是一種非典型的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物，主要是通過(guò)一個(gè)特殊的孔蛋白通道OprD2的擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)菌的，一旦這一孔蛋白通道消失，則產(chǎn)生耐藥性。“后天獲得”8細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講產(chǎn)氣腸桿菌從亞胺培能敏感株變?yōu)槟退幹?細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講亞胺培南敏感及耐藥的產(chǎn)氣腸桿菌PFGE圖C1C2:亞胺培南敏感C3C4:亞胺培南耐藥10細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講亞胺培南敏感及耐藥的產(chǎn)氣腸桿菌SDS圖C1C2:亞胺培南敏感C3C4:亞胺培南耐藥11細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講PCR擴(kuò)增Omp36全長(zhǎng)及序列分析IS90398%（約1000bp)12細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講插入序列引起OprD2缺失（銅綠）ISPa1328約2000bpOprD213細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講細(xì)菌產(chǎn)生一種或多種水解酶或鈍化酶來(lái)水解或修飾進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的抗菌藥物，使之到達(dá)靶位之前失去活性細(xì)菌產(chǎn)生的滅活酶主要有：

β-內(nèi)酰胺酶氨基糖苷類(lèi)鈍化酶氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶

MLS鈍化酶二、產(chǎn)生滅活酶14細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講超廣譜-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）高產(chǎn)AmpC酶碳青霉烯酶最主要的耐藥因素對(duì)

-內(nèi)酰胺抗生素造成威脅

-內(nèi)酰胺酶臨床上最重要的-內(nèi)酰胺酶15細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講是質(zhì)粒介導(dǎo)的能夠水解頭孢他啶、頭孢噻肟等亞氨基β-內(nèi)酰胺類(lèi)及氨曲南等單環(huán)酰胺類(lèi)抗生素，并可被克拉維酸等β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制的一類(lèi)β-內(nèi)酰胺酶。ESBLs在分子生物學(xué)分類(lèi)中屬于A類(lèi)酶，在Bush分類(lèi)中屬于2be類(lèi)酶。超廣譜

-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum

-lactamases，ESBLs）16細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講ESBLs的分類(lèi)根據(jù)基因同源性不同分為：TEM型80SHV型46CTX-M型37OXA型18其它型20/studies/webt.htm.CTX-M-1組CTX-M-2組CTX-M-8組CTX-M-9組17細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講中國(guó)400株大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分布18細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講32家醫(yī)院1994-2003年

大腸桿菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs百分率19細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講頭孢菌素酶

大部分腸桿菌科細(xì)菌如腸桿菌屬菌種、弗勞地枸櫞酸桿菌、摩根摩根菌、普魯菲登菌屬菌種粘質(zhì)沙雷菌等都能產(chǎn)生染色體介導(dǎo)的AmpC酶。20細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講

陰溝腸桿菌21細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講ACT-1,DHA-1,CMY(Peking)DHA-1,CIT,ACT-1(Shanghai)

DHA-1(Zhejiang)DHA-1,ACT-1(GuangZhou)DHA-1isThePredominantTypeinChinaMapofChina22細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講克隆片段PCR產(chǎn)物1100bp共6432bp

ORF1ORF2ORF3ORF4ORF5ORF6IS26orf-1

DHA-1ampRqacE⊿1sul15232bp23細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講指所有能明顯水解亞胺培南或美羅培南等碳青霉烯類(lèi)抗生素的一類(lèi)β內(nèi)酰胺酶分別屬于Ambler分子分類(lèi)中的A類(lèi)、B類(lèi)、D類(lèi)酶。碳青霉烯酶

24細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講天然來(lái)源碳青霉烯酶嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的L1酶獲得性碳青霉烯酶（Ambler分子分類(lèi)）B類(lèi)酶（金屬酶）：IMP、VIM類(lèi)及SPM-1A類(lèi)酶：NMC-A、KPC-1、GES-2等D類(lèi)酶：OXA-23至OXA-27、40、48、54碳青霉烯酶按其來(lái)源可分為25細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講金屬酶染色體編碼的金屬酶：BCⅡ，L1,TUS-1,MUS-1,Sfh-1,Mbl1b，大多來(lái)源于環(huán)境寄生菌。獲得性金屬酶：IMPVIMSPMGIM-1SIM-1，位于可轉(zhuǎn)移的基因元件上，造成區(qū)域性傳播。26細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講IMP型金屬酶IMP型金屬酶GenBank上已公布21種，比較它們相互之間的序列表明：IMP型金屬酶大致可以分為兩組：1）IMP-1、IMP3-7、IMP9－11、IMP-162）IMP-2和IMP-8、12、13、19、2027細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講中國(guó)IMP-42001年香港鮑曼2001年廣州楊格枸櫞酸桿菌、銅綠IMP-12004年12月江蘇無(wú)錫銅綠IMP-82001臺(tái)灣銅綠28細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講VIM型金屬酶VIM型金屬酶與IMP類(lèi)金屬酶同源性

40％，但兩類(lèi)金屬酶的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)相似，編碼基因都位于整合子上。目前VIM型金屬酶GenBank上已公布12種，比較它們相互之間的序列可將VIM金屬酶大致分為三組：1）VIM-1、4、5、11a2）VIM-2、3、6、8、9、10、11b3）VIM-729細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講VIM型金屬酶分布VIM-11999年意大利

銅綠氧化木糖產(chǎn)堿桿菌惡臭假單胞

2003－2004希臘

大腸肺克

法國(guó)肺克VIM-22000法國(guó)

銅綠

意大利希臘日本韓國(guó)葡萄牙西班牙波蘭克羅地亞智利阿根廷美國(guó)中國(guó)VIM-32001年臺(tái)灣地區(qū)

銅綠VIM-42002年希臘

銅綠

2003瑞典

銅綠2004意大利

肺克陰溝

2004波蘭銅綠30細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講VIM-52004土耳其肺克銅綠VIM-62004新加坡惡臭假單胞VIM-72004美國(guó)銅綠VIM-8哥倫比亞銅綠VIM-9，10英國(guó)VIM-11阿根廷意大利VIM型金屬酶分布31細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講亞胺培南耐藥銅綠假單胞菌金屬酶檢測(cè)結(jié)果北京（27）上海（32）杭州（27）廣州（32）成都（22）金屬酶表型陽(yáng)性菌株數(shù)35310百分率11.1％15.6％11.1％3.1％0.0％金屬酶基因型陽(yáng)性菌株數(shù)36410百分率11.1％18.8％14.8％3.1％0.0％32細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講

VIM-2基因整合子結(jié)構(gòu)圖A：B2，B3，B28，H19，H26，H54，G4結(jié)構(gòu)同In72B：S5，S9，S10，S11，S12（S15、H22除外）

intI1attI1aacA459-bVIM-259-beaadB59-be3’-CS

intI1attI1aacA459-beVIM-259-be3’-CSAB33細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講H22H26g4s5s9s10s11s12s15b2b3b28w19w54Marker50kbABH22H26g4s5s9s10s11s12s15b2b3b28w19w54MarkerPFGE譜分析結(jié)果：共有七種類(lèi)型，來(lái)自上海的六株為同一類(lèi)型，來(lái)自北京的三株分兩個(gè)類(lèi)型，來(lái)自杭州的四株同樣也分兩個(gè)類(lèi)型。各地區(qū)之間的類(lèi)型各不相同。反復(fù)嘗試通過(guò)接合試驗(yàn)及質(zhì)粒抽提物電轉(zhuǎn)化傳遞金屬酶基因均未獲成功。經(jīng)XbaI內(nèi)切酶消化的染色體PFGE與VIM-2探針雜交顯示其中10株銅綠假單胞菌50-kb大小的酶切片段雜交陽(yáng)性，而其余3株（H22、H26、B2）沒(méi)有陽(yáng)性片段。34細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講Ａ類(lèi)酶包括陰溝腸桿菌、粘質(zhì)沙雷菌中由染色體介導(dǎo)的NMC-A、Sme-1～Sme-3、IMI-1酶，以及肺炎克雷伯菌中質(zhì)粒介導(dǎo)的KPC-1-4酶、銅綠假單胞菌中質(zhì)粒介導(dǎo)的GES-2酶。碳青霉烯類(lèi)抗生素水解酶35細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講二株產(chǎn)IMI-1陰溝腸桿菌PFGE結(jié)果36細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講AntibioticsMIC(mg/l)EcloacaeEC600

E.coliC600E8

E.coliDH5

E.colipT103Imipenem≥320.38≥320.25≥32Ciprofloxacin0.0640.250.250.006008Amikacin4220.250.38Cefepime20.0640.0640.1250.047Ceftazidime160.50.380.50.25Cefotaxime120.050.1250.0940.047Cefoperazone≥2560.51.50.0474Cefoperazone/Sulbactam1280.25262Piperacillin/Tazobactam≥2562424Ticarcilliin/ClavulanicAcid≥2561232432Ampicillin/Sulbactam≥2568641.5NDEcloacae8,EC600,E.coliC600E8，E.colipT103和E.coliDH5

對(duì)抗菌藥物的體外抗菌活性37細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講陰溝腸桿菌、接合菌質(zhì)粒電泳圖譜

M1ABM2

54kb15kb38細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講SchematicrepresentationoftheclonedE.coRⅠfragment

IS903IMI-2Imi-2RIS903IS2903bp921bp882bp876bp921bp10629bp(GenBankaccessionnumber:AY780889)Imi-R與ImiR同源性為97%。IMI-2與IMI-1同源性99%，僅在37位由天冬氨酸→天冬酰胺，106位由組氨酸→酪氨酸

39細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講抗菌藥物肺炎克雷伯菌亞胺培南>32亞胺培南/克拉維酸16美羅培南>32美羅培南/克拉維酸16厄他培南>256頭孢他啶>256頭孢他啶/克拉維酸>256頭孢噻肟>256頭孢噻肟/克拉維酸>256頭孢吡肟>256頭孢曲松>256頭孢西丁>256氨曲南>256頭孢哌酮/舒巴坦>256哌拉西林/三唑巴坦>256環(huán)丙沙星>32阿米卡星>256多重耐藥肺炎克雷伯菌40細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講轉(zhuǎn)化試驗(yàn)抽提亞胺培南耐藥的肺炎克雷伯菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH5α，在含1

g/ml的亞胺培南的MH平板上篩選成功篩選到亞胺培南耐藥的轉(zhuǎn)化菌（轉(zhuǎn)化質(zhì)粒約60kb）染色體帶61kb41細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講PCRPCR篩選β內(nèi)酰胺酶耐藥基因包括TEM-1、SHV、CTX-M-1、CTX-M-9、OXA-48、VIM、OXA-10和KPC-1以肺炎克雷伯菌質(zhì)粒DNA為模板PCR陽(yáng)性為T(mén)EM、SHV和KPC轉(zhuǎn)化菌和克隆菌只有KPC陽(yáng)性PCR產(chǎn)物測(cè)序分別為T(mén)EM-1、SHV-12和KPC-242細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講轉(zhuǎn)化菌質(zhì)粒（亞胺培南耐藥基因克?。〦coR?,HindⅢ，Nhe?等酶切Nhe?pTeasyVectorpTeasyVector1.5kb在含亞胺培南1

g/mlMH平板篩選43細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講克隆片段測(cè)序?qū)χ亟M質(zhì)粒的插入片段進(jìn)行步移測(cè)序，獲得1554bp核苷酸DNAssist軟件分析，1個(gè)開(kāi)放讀碼框(ORF)經(jīng)GenBankBlast程序分析，該ORF與KPC-2(

GenBank注冊(cè)號(hào):AY210886)

的核苷酸序列同源性為100%44細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講D類(lèi)酶（OXA酶）在Bush分群中屬于2d類(lèi)，對(duì)苯唑西林的水解活性很強(qiáng)。OXA型碳青霉烯酶對(duì)亞胺培南的水解活性較低，對(duì)頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南水解活性也很弱。除OXA-23外，其它酶能被三唑巴坦、克拉維酸抑制。OXA型碳青霉烯酶編碼基因可位于質(zhì)?；蛉旧w上，或定位在I型整合子基因盒中，具備向其他菌種轉(zhuǎn)移的能力碳青霉烯類(lèi)抗生素水解酶45細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講blaOXA-23-like,blaOXA-51-like是我國(guó)鮑曼不動(dòng)桿菌最主要的碳青霉烯酶，

ISAba1與OXA基因的表達(dá)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)342株亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中339株檢測(cè)到至少一種OXA基因，303株檢測(cè)到OXA-23-like和OXA-51-like基因，22株只檢測(cè)到OXA-23-like基因，17株只檢測(cè)到OXA-51-like基因；其中在313株菌株的OXA-23-like基因上游34bp處檢測(cè)到ISAba1，在13株菌株的OXA-51-like基因上游7bp處檢測(cè)到ISAba1。46細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講氨基糖苷類(lèi)鈍化酶分為：磷酸轉(zhuǎn)移酶（APH）

乙酰轉(zhuǎn)移酶（AAC）

核苷轉(zhuǎn)移酶（ANT）氨基糖苷類(lèi)鈍化酶作用機(jī)制：

三者分別使抗生素的羥基磷酸化、氨基乙?；土u基核苷化，使之不能再與細(xì)菌核糖體結(jié)合。氨基糖苷類(lèi)耐藥47細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講慶大霉素高水平耐藥（HLGR）主要的耐藥機(jī)制

氨基糖苷類(lèi)修飾酶耐藥基因百分率

AAC(6’)-Ie-APH(2’)-Iaaac(6’)-Ie-aph(2’)-Ia

＞90%

APH(2’)-Icaph(2’)-Ic

APH(2’)-Idaph(2’)-IdAPH(2’)-Ibaph(2’)-Ib＜10%氨基糖苷類(lèi)耐藥48細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講8,724bpORF1ORF2ORF4

ORF35’3’ISEcp1(tnpA)

aph-Ie

repD

str部分序列

一種新的質(zhì)粒介導(dǎo)的腸球菌氨基糖苷類(lèi)耐藥基因aph(2”)-Ie49細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講三、靶位改變50細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講主要抗菌藥物作用靶位-內(nèi)酰胺類(lèi)青霉素結(jié)合蛋白（PBP）氨基糖苷類(lèi)核糖體30S亞基大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)核糖體50S亞基氟喹諾酮類(lèi)DNA旋轉(zhuǎn)酶（拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ）、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ糖肽類(lèi)D-丙氨酰D-丙氨酸四環(huán)素類(lèi)核糖體50S亞基

51細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講PBP2a的作用PBP2a與β-內(nèi)酰胺抗生素親和力低，替代正常PBP功能

87Kda——PBP1——80——PBP2——

78——PBP2a75——PBP3’——70——PBP3——41——PBP4——52細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講53細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講54細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講DRIRIRDRSCCmecccrAccrBmecImecR1mecAorfXJ1J3J2SCCmec55細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講56細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講I－V型57細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講VSHA-MRSACA-MRSA

高耐藥性較低

陰性

PVL陽(yáng)性I、II、IIISCCmecIV、V58細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講金葡菌耐藥性的發(fā)展歷程S.aureusPenicillin-resistantS.aureusMethicillin-resistantS.aureus(MRSA)PenicillinMethicillinVancomycin-resistantenterococcus(VRE)Vancomycin(glycopeptide)-Intermediate-ResistantS.Aureus（VISA、GISA）Vancomycin-ResistantS.Aureus（VRSA）Vancomycin[1940][1960s][1990s][1996]Superbugs[2002]59細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講氟喹喏酮的耐藥機(jī)理拓?fù)洚悩?gòu)酶IV(parC,parE)拓?fù)洚悩?gòu)酶II(gyrA,gyrB)左氧氟沙星氟喹喏酮60細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講糖肽類(lèi)抗生素包括萬(wàn)古霉素、替考拉寧等，是高分子量的疏水性化合物。主要耐藥機(jī)制：VRE的細(xì)胞壁肽糖前體末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸發(fā)生了改變，萬(wàn)古霉素不能與之相結(jié)合，因此不能抑制VRE的細(xì)胞壁合成。耐萬(wàn)古霉素的腸球菌（VRE）61細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講transposaseresolvasevanRvanSvanHvanAvanX6590bp(ZY02,HS3)表示PCR擴(kuò)增vanYvanZ10Kb（ZY01）轉(zhuǎn)座功能（轉(zhuǎn)座酶transposase基因和解離酶revolsase基因，分別編碼產(chǎn)生轉(zhuǎn)座酶和解離酶在轉(zhuǎn)座過(guò)程中發(fā)揮作用）調(diào)控耐藥基因（VanR和VanS）產(chǎn)生耐糖肽類(lèi)的縮肽（VanH脫氫酶、VanA連接酶和VanX二肽酶）輔助蛋白（VanY和VanZ）含VanA基因簇的轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座入各種質(zhì)粒，或通過(guò)接合轉(zhuǎn)座導(dǎo)致VRE耐藥性的傳播

62細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)的耐藥機(jī)制核糖體靶位點(diǎn)的改變:erm編碼，高耐;法國(guó)、西班牙、中國(guó)主動(dòng)外排泵:

mef

編碼，低耐

，加拿大、美國(guó)、修飾酶63細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講16SrRNA甲基化酶氨基糖苷類(lèi)抗生素作用位點(diǎn)：細(xì)菌16SrRNA以往認(rèn)為最重要的氨基糖苷類(lèi)抗生素耐藥機(jī)制：修飾酶，作用位點(diǎn)在藥物，引起一種或幾種藥物耐藥2002最新發(fā)現(xiàn)一類(lèi)新的氨基糖苷類(lèi)抗生素耐藥機(jī)制：16SrRNA甲基化酶，引起藥物作用位點(diǎn)的甲基化，導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)所有氨基糖苷類(lèi)抗生素高水平耐藥，目前發(fā)現(xiàn)4種：armA、rmtA、rmtB、rmtC多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌在我國(guó)各省市廣泛流行，該菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素耐藥率和耐藥水平高16SrRNA甲基化酶是否在介導(dǎo)該菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)抗生素耐藥中發(fā)揮作用需要系統(tǒng)研究64細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講700株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)5種氨基糖苷類(lèi)

抗生素體外抗菌活性·5種氨基糖苷類(lèi)抗生素耐藥率均大于60％；·377株（53.9％）菌株對(duì)5種氨基糖苷類(lèi)抗生素均耐藥；·334株（47.7％）菌株armA陽(yáng)性；·armA陽(yáng)性菌株對(duì)上述所有氨基糖苷類(lèi)抗生素均高水平耐藥,MIC＞256mg/L

·反復(fù)進(jìn)行接合實(shí)驗(yàn)、質(zhì)粒抽提、電轉(zhuǎn)化均未成功·Southern-blot雜交證實(shí)armA基因位于克隆A、B、C約220kb、300kb、220kb大小的染色體ApaI酶切條帶上armA基因定位于鮑曼不動(dòng)桿菌染色體65細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講四、主動(dòng)外運(yùn)

有些抗菌藥物（常見(jiàn)的如四環(huán)素類(lèi)及喹諾酮類(lèi)）能誘導(dǎo)細(xì)菌的主動(dòng)外運(yùn)，抗菌藥物難以在細(xì)菌內(nèi)積累到有效濃度，造成對(duì)抗菌藥物耐藥程度的普遍提高。66細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講外排泵的結(jié)構(gòu)外排系統(tǒng)由3個(gè)部分組成：位于內(nèi)膜的腫瘤耐藥分化家族(resistant—nodulation—divisionfamily，RND)的質(zhì)膜轉(zhuǎn)運(yùn)體內(nèi)外膜之間的膜周連接蛋白或膜融合蛋白(MFP)位于外膜的孔道形成蛋白(0EP)

67細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講

是指細(xì)菌粘附于固體或有機(jī)腔道表面，形成微菌落，并分泌細(xì)胞外多糖蛋白復(fù)合物將自身包裹其中而形成的膜狀物。其生化組成為藻酸鹽多糖和蛋白復(fù)合物。菌膜可阻止巨噬細(xì)胞、抗體、藥物作用于菌體五、細(xì)菌生物被膜（Biofilm）69細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講生物被膜70細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講細(xì)菌形成生物被膜后，往往對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生高度耐藥性，原因有細(xì)菌生物被膜可減少抗菌藥物滲透吸附抗菌藥物鈍化酶，促進(jìn)抗菌藥物水解細(xì)菌生物被膜下細(xì)菌代謝低下，對(duì)抗菌藥物不敏感生物被膜的存在阻止了機(jī)體對(duì)細(xì)菌的免疫力，產(chǎn)生免疫逃逸現(xiàn)象，減弱機(jī)體免疫力與抗菌藥物的協(xié)同殺菌作用71細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講其他耐藥機(jī)制缺乏自溶酶替代途徑酶的過(guò)量產(chǎn)生等靶位保護(hù)機(jī)制72細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講質(zhì)粒介導(dǎo)的喹喏酮耐藥

1998年George.A.Jacoby等從一株肺炎克雷伯菌（UAB1）中發(fā)現(xiàn)能介導(dǎo)多種抗生素耐藥的質(zhì)粒pMG252，經(jīng)接合傳遞后其接合子對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥性增加近30倍(MIC0.008→0.25μg/mL)。

在該質(zhì)粒內(nèi)發(fā)現(xiàn)了喹諾酮耐藥（quinoloneresistance）基因，命名為qnr

(Lancet1998;351:797–99)

73細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講作用機(jī)制保護(hù)DNA旋轉(zhuǎn)酶Qnr通過(guò)與旋轉(zhuǎn)酶特異地結(jié)合從而影響酶的內(nèi)在活性,降低了酶與DNA的結(jié)合,導(dǎo)致喹諾酮類(lèi)藥物的作用靶位數(shù)量減少Q(mào)nr與旋轉(zhuǎn)酶的結(jié)合,改變了藥物結(jié)合區(qū)域的構(gòu)象,從而降低了藥物識(shí)別靶位的效率保護(hù)拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ細(xì)菌對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ的保護(hù)作用與DNA旋轉(zhuǎn)酶類(lèi)似Hegde,S.S.etal.Science308:1480,2005QnrDNA旋轉(zhuǎn)酶74細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講表5株qnrA陽(yáng)性大腸埃希菌及其接合菌的MIC值菌株CIPNOROFXMOXCTXCAZSGENAKAMP63128256643225616212>256Tc631410.5>2564414>256140642566432322888>256Tc1401421162884>256142484162564424>256Tc1420.50.511322882>256Z8161616321284256>256>256>256TcZ80.060.060.1250.06128464>256>256>256Z11326416321284256>256>256>256TcZ110.060.060.1250.0664464>256>256>256J530.0150.1250.1250.030.060.1254112J53為受體菌75細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講表38株qnrA陽(yáng)性肺炎克雷伯菌及其接合菌的MIC值菌株CIPNOROFXMOXCTXCAZSGENAKAMP14-264128＞64128322111>256Tc14-20.250.510.25162221>2562564256643225616422>256Tc2518121284414>256316425612812825616212>256Tc311812>2568412>2569628221282428>256Tc9618122568414>25615181684644428>256Tc1511110.25321212>256152864441282428>256Tc1520.520.50.5641414>25615332128161632>64>256>256>256>256Tc1530.5112161212>2561564821644428>256Tc1562820.25644414>256J530.0150.1250.1250.030.060.125411276細(xì)菌耐藥機(jī)制專(zhuān)題醫(yī)學(xué)知識(shí)宣講質(zhì)粒DNA與PCR產(chǎn)物探針的Sou