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《醫(yī)學免疫學》實驗教學大綱一、課程編號:14050011 適用專業(yè):臨床醫(yī)學課程類別:學科專業(yè)基礎(chǔ)必修開課學期:4實驗學時:16二、開課實驗室:形態(tài)學實驗室三、實驗教材及參考書教材:余平主編,《實驗免疫學》,第1版,湖南科學技術(shù)出版社,2011.2參考書目:[1]沈關(guān)心,周汝麟.現(xiàn)代免疫學實驗技術(shù).第2版.武漢:湖北科學技術(shù)出版社,2002[2]吳雄文,梁智輝.實用免疫學實驗技術(shù).武漢:湖北科學技術(shù)出版社,2002[3]司傳平.醫(yī)學免疫學實驗.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005四、實驗教學目的和要求醫(yī)學免疫學是研究人體免疫系統(tǒng)的組成及功能,免疫應(yīng)答的規(guī)律、特點及其產(chǎn)物,免疫性疾病的發(fā)病機理以及免疫學診斷和防治的一門學科。具有高理論、高技術(shù)、多邊緣、多交叉的特點,廣泛滲透到基礎(chǔ)、臨床醫(yī)學乃至生命科學的各個領(lǐng)域,是發(fā)展最快,應(yīng)用最廣的學科之一。醫(yī)學免疫學是臨床醫(yī)學專業(yè)的重要基礎(chǔ)醫(yī)學課程,其教學任務(wù)是著重使學生掌握本學科的基本理論、基本知識和基本實驗技能,了解本學科新的、重大的研究進展,培養(yǎng)學生分析問題、解決問題的能力,同時培養(yǎng)學生探索和獻身科學的興趣和志向。并為學生學習其它基礎(chǔ)醫(yī)學課程及臨床醫(yī)學課程奠定堅實的基礎(chǔ)。加深和鞏固對課堂內(nèi)容的理解和體會。在掌握系統(tǒng)理論知識的基礎(chǔ)上,理解并掌握醫(yī)學免疫學基本操作技術(shù),樹立科學思維的意識,培養(yǎng)獨立思考、獨立操作和獨立解決問題的能力。通過實驗使學生達到以下要求:1.認識免疫系統(tǒng)的基本形態(tài)學特征,熟悉常用醫(yī)學免疫學檢測技術(shù)。2.加強對理論知識的理解和記憶。五、考核形式要求《醫(yī)學免疫學》是一門應(yīng)用性較強的學科,實驗操作技能的理解在本課程中十分重要。在期末進行實驗理論考核,按百分制記分,實驗考核成績按20%計入該課程總成績,實驗報告及平時成績按10%計入該課程總成績。六、實驗項目及要求(一)實驗項目名稱序號實驗項目名稱實驗類型實驗學時每組人數(shù)實驗要求1固有免疫功能測定綜合420必修2免疫細胞功能測定綜合420必修3凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)驗證420必修4免疫標記技術(shù)綜合220必修5實驗考核綜合220必修(二)目的要求及實驗內(nèi)容1.固有免疫功能測定目的要求:了解非特異性免疫的組成及功能;熟悉溶菌酶的作用;掌握中性粒細胞吞噬功能檢測;掌握補體的生物學作用及其臨床意義、血清總補體活性測定方法。實驗內(nèi)容:①溶菌酶的溶菌試驗(示教);②中性粒細胞吞噬功能檢測(操作);③血清總補體活性測定(AP-CH50)(操作)2.免疫細胞功能測定目的要求:掌握人外周血單個核細胞(PBMC)的分離技術(shù);掌握T淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗形態(tài)學檢測法、E花環(huán)試驗的原理及意義。實驗內(nèi)容:①人外周血中單個核細胞的分離(操作);②T淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗形態(tài)學檢測法(示教);③E花環(huán)試驗(示教);④淋巴細胞亞群和功能檢測(示教)3.凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)目的要求:掌握玻片凝集試驗、試管凝集試驗、間接凝集抑制試驗的原理及臨床意義,熟悉其操作;掌握環(huán)狀沉淀試驗、單(雙)向瓊脂擴散試驗、對流免疫電泳的原理及應(yīng)用,熟悉其操作。實驗內(nèi)容:①玻片凝集試驗(操作);②試管凝集試驗(示教);③間接凝集抑制試驗(操作);④單、雙向瓊脂擴散試驗(示教);⑤對流免疫電泳(操作)4.免疫標記技術(shù)目的要求:掌握免疫熒光技術(shù)、免疫酶技術(shù)、膠體金標記技術(shù)的原理及應(yīng)用,熟悉其操作方法。實驗內(nèi)容:①ELISA(操作);②膠體金標記技術(shù)檢測HCG(操作)七、基本設(shè)備與器材配置序號儀器名稱數(shù)量序號儀器名稱數(shù)量1LD4-2低速水平離心機12BCM-1000生物凈化工作臺13DNP-781電熱恒溫培養(yǎng)箱14海爾冰箱15DHW-600三用電熱恒溫水箱16DYY-4電泳儀17DG3022A酶聯(lián)免疫檢測儀18DNX-9620電腦洗板機19奧林巴斯熒光顯微鏡1101000W電爐111TX-27-3型臺式高壓蒸汽消毒器112CH-MO45-T生物顯微鏡313無菌人血清0.5ml14新鮮抗凝人全血液1ml15EGTA試劑原液5ml16化學純肝素納0.1g17抗凝兔RBC1ml18瑞氏染色液原液5ml1995%酒精10ml20無菌塑料試管5支21300ml酒精燈3盞221.2.5ml刻度吸管各6支23薄玻片6片24中或大號吸球3個2512.15.17各6支26標準株溶壁微球菌1株27比重1.077淋巴細胞分離液3ml285ml無菌注射器2支29無菌Hanks原液2ml30醫(yī)用絡(luò)活碘0.1ml31臺盼蘭染液2ml32無菌棉簽5支331640培養(yǎng)基干粉1瓶340.5ml毛細吸管2支35淋巴母細胞轉(zhuǎn)化教學片3片36無菌小牛血清0.5ml37無菌傷寒、痢疾桿菌抗血清各1ml38E-花環(huán)片教學片3片39傷寒、痢疾桿菌培養(yǎng)物各1個40膠乳妊娠試劑2瓶1套41凍干羊抗人IgG抗體1支42絨促性腺激素化學純1ml/支43高效價兔抗人免疫血清0.5ml44瓊脂粉化學純1g456mm打孔器1支46無菌人血漿0.5ml47定性濾紙1/2張485000ml磨口試劑瓶1個49250ml燒杯1個50傷寒、痢疾桿菌、金黃色葡萄球菌菌種標準株各1株51HBsAg酶標試劑盒1盒520.05mol/Lph8.6巴比妥緩沖液1l53高效價羊
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