21.2直接化學(xué)發(fā)光免疫講解

第二十一章

化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)

教學(xué)目標(biāo)1.掌握：化學(xué)發(fā)光、化學(xué)發(fā)光劑的概念及常用的化學(xué)發(fā)光劑；直接化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理（重難點(diǎn)）；酶促化學(xué)發(fā)光的原理及關(guān)鍵技術(shù)；化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用（重點(diǎn)）。2.熟悉：電化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理（重難點(diǎn)）、三類化學(xué)發(fā)光免疫分析的方法學(xué)評(píng)價(jià)。3.了解：發(fā)光的概念及分類、化學(xué)發(fā)光物的制備。知識(shí)目標(biāo)技能目標(biāo)思政-素質(zhì)目標(biāo)掌握化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的操作流程質(zhì)量控制、生物安全意識(shí)、臨床免疫學(xué)思維1.化學(xué)發(fā)光劑的概念及常用的化學(xué)發(fā)光劑。2.化學(xué)發(fā)光免疫分析的基本原理及其技術(shù)類型。3.化學(xué)發(fā)光酶免疫分析基本原理及其分離技術(shù)。4.電化學(xué)發(fā)光免疫分析基本原理。5.化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用。本章要點(diǎn)一化學(xué)發(fā)光免疫分析二三四化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)的臨床應(yīng)用五目錄化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)概述化學(xué)發(fā)光酶免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析用化學(xué)發(fā)光劑（如吖啶酯）直接標(biāo)記抗體(抗原)，與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)和磁顆粒性的抗體（抗原）發(fā)生免疫反應(yīng)后，通過磁場(chǎng)把結(jié)合狀態(tài)和游離狀態(tài)的化學(xué)發(fā)光劑標(biāo)記物分離開來，這時(shí)只需加入氧化劑（H2O2）和NaOH使成堿性環(huán)境，吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光。由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出待測(cè)抗原(抗體)的含量。

第二節(jié)直接化學(xué)發(fā)光免疫分析一、檢測(cè)原理YYY被測(cè)抗原+抗體+帶吖啶酯標(biāo)記物抗體YYYYYYYYYYY沖洗后（1）加入H2O2（pH<10）（2）加入堿（pH>10）發(fā)光磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫分析雙抗體夾心法原理示意圖1.分離方法

常用磁顆粒分離技術(shù)，即用抗原或抗體包被磁顆粒，與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原及吖啶酯標(biāo)記的抗體或抗原通過一定模式的免疫學(xué)反應(yīng)后,最終通過在磁場(chǎng)中沖洗將結(jié)合到免疫復(fù)合物中的標(biāo)記物和游離標(biāo)記物進(jìn)行分離的技術(shù)。

二、方法類型2.常用的免疫學(xué)反應(yīng)模式

雙抗原夾心法固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法雙抗體夾心法三、