采集標(biāo)本的影響因素及方法

關(guān)于采集標(biāo)本的影響因素及方法臨床檢驗(yàn)標(biāo)本采集與處理的重要性

在臨床檢驗(yàn)的過程當(dāng)中，標(biāo)本來源尤其至關(guān)重要，所以我們臨床科室要把好采集檢驗(yàn)標(biāo)本關(guān)，但因種種原因，導(dǎo)致標(biāo)本不合格。比如：有的尿標(biāo)本因放置時(shí)間過長而長菌，使尿中有形成分和化學(xué)成分破壞；有的大便標(biāo)本因干結(jié)而無法檢驗(yàn)；細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本，不經(jīng)無菌操作留取，造成大量雜菌生長；做血脂檢查，不注意控制高脂飲食；做隱血試驗(yàn)前不吃隱血食等，有的抽血選擇同一靜脈的近心端，甚至使用原來輸液的針頭，直接把血液放入試管，這些因素都會導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果假陰性或假陽性。第2頁,共39頁，2024年2月25日，星期天檢驗(yàn)標(biāo)本采集的要求一、病人準(zhǔn)備二、標(biāo)本采集三、標(biāo)本保存和運(yùn)送第3頁,共39頁，2024年2月25日，星期天一、病人準(zhǔn)備1．病人狀態(tài)

一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本，因運(yùn)動能影響許多項(xiàng)目的測定結(jié)果。活動的影響可分暫時(shí)和持續(xù)性兩類。暫時(shí)性影響如使血漿脂肪酸含量減少；丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響，如激烈運(yùn)動后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高，有些恢復(fù)較慢，如ALT在停止運(yùn)動1h后測定，其值仍可偏高30％～50％。

第4頁,共39頁，2024年2月25日，星期天2．飲食

多數(shù)試驗(yàn)要求在采血前禁食12h，因?yàn)轱嬍持械牟煌煞挚芍苯佑绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果。(1)

餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹達(dá)24h以上，可出現(xiàn)低血糖，血中TG、游離甘油及脂肪酸可增高。(2)

高脂餐后2～4h采血，多數(shù)人ALP含量增高，主要來自腸源性同工酶，且與血型有密切關(guān)系，O型或B型兼為Le+分泌型者增高更為明顯。第5頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(3)

高蛋白質(zhì)餐使血漿尿素、血氨增加，但不影響肌酐含量。(4)

高比例不飽脂肪酸食物，可減低膽固醇含量；香蕉、菠蘿番茄可使尿液5-羥色胺增加數(shù)倍。(5)

含咖啡因飲料，可使血漿游離脂肪酸增加，并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。(6)食物如含有動物血液，可引起糞隱血假陽性。第6頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(7)

飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加，長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高，甚至可以將這三項(xiàng)作為嗜酒者的篩選檢查。

(8)吸煙：癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8％，而不吸煙者含量在1％以下。此外，兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高，血液學(xué)方面亦有變化，白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。第7頁,共39頁，2024年2月25日，星期天3．藥物藥物對檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜，在采樣檢查之前，以暫停各種藥物為宜，如某種藥物不可停用，則應(yīng)了解可能對檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。4．體位

體位影響血液循環(huán)，由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變，則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯，例如由臥位改為站位，血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于體位的因素，在確立參考值時(shí)，應(yīng)考慮門診和住院病人可能存在的結(jié)果差異，故采集標(biāo)本時(shí)要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。第8頁,共39頁，2024年2月25日，星期天5．時(shí)間病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律，特別是激素水平分析，如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān)；膽固醇則在經(jīng)前期最高，排卵時(shí)最低；纖維蛋白原在經(jīng)前期最高，血漿蛋白則在排卵時(shí)減少。生長激素于入睡后會出現(xiàn)短時(shí)高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高；血漿蛋白在夜間降低；血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時(shí)間應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行。第9頁,共39頁，2024年2月25日，星期天二、標(biāo)本采集

標(biāo)本采集是直接關(guān)系檢驗(yàn)結(jié)果的基本要素，如果標(biāo)本采集不當(dāng)，即使最好的儀器設(shè)備也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時(shí)引入的誤差和錯誤?，F(xiàn)將各種標(biāo)本的采集要點(diǎn)分述如下：第10頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(一)

血液標(biāo)本

采血管分普通管、抗凝管和促凝管三類。常用抗凝劑有草酸鉀、草酸鈉、枸櫞酸鈉、EDTA-K2或EDTA-Na2、肝素、氟化物等。根據(jù)不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目，選用合適的抗凝劑十分重要。1．選擇抗凝劑注意事項(xiàng)：(1)

含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測定K+、Na+的標(biāo)本。(2)

EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測定Ca2+的標(biāo)本，因?yàn)镃a2+可與它們形成不溶性物質(zhì)。第11頁,共39頁，2024年2月25日，星期天

(3)

草酸鹽、氟化物不能用于測定酶和用酶法測定的標(biāo)本，因?yàn)樗鼈冇屑せ罨蛞种颇承┟富钚缘淖饔?，如草酸鹽可抑制AMY、ACP、LDH的活性，氟化物則有激活尿素酶、AMY的作用。(4)

草酸鉀：鈣離子螯合劑，常用量為1～2mg/ml血液。草酸鉀雖仍可應(yīng)用，但使紅細(xì)胞縮小，水分從紅細(xì)胞滲入血漿，使血漿成分濃度相應(yīng)偏低。(5)

草酸鉀氟化鈉混合抗凝劑：專供葡萄糖測定用，氟化鈉1g，草酸鉀3g混合，混合劑4mg抗凝1ml血。第12頁,共39頁，2024年2月25日，星期天

(6)

肝素：是一種粘多糖體，可抑制凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，使纖維蛋白原不能轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影響紅細(xì)胞體積，可用于生化及血液學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本，但不可用于篩選DIC的3P和TT試驗(yàn)，因肝素與魚精蛋白作用，發(fā)生沉淀，使3P出現(xiàn)假陽性以及肝素的抗凝血酶作用出現(xiàn)產(chǎn)生干擾。(7)

EDTA：與鈣離子絡(luò)合而抗凝，通常血液學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)應(yīng)用其鉀鹽EDTA-K2或EDTA-K3

。EDTA-Li2

亦可作為抗凝劑，且可用于大多數(shù)生化檢驗(yàn)。第13頁,共39頁，2024年2月25日，星期天使用抗凝劑要注意血與抗凝劑的比如血沉取106mmol/L的枸櫞酸鈉0.4ml，抽1.6ml血；凝血機(jī)制取0.2ml，抽1.8ml血；血常規(guī)用EDTA抗凝管抽1.5ml血；血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。第14頁,共39頁，2024年2月25日，星期天2．標(biāo)本采集注意事項(xiàng)：(1)

末梢采血時(shí)，務(wù)必清潔消毒，待干燥后穿刺，用1次性采血器。嬰兒可取自腳后跟兩側(cè)處，一般不取手指，采血中不可用力擠壓，以免組織液混入血液，使血液易于凝固和稀釋，出現(xiàn)誤差。(2)

采靜脈血時(shí)止血帶結(jié)扎過久，可引起誤差。如以結(jié)扎1min的樣品結(jié)果為基數(shù)，則結(jié)扎3min，可使血漿總蛋白增加5％，膽固醇增加5％，鐵增加6％，膽紅素增加8％，乳酸則不能使用止血帶。(3)

血清標(biāo)本應(yīng)避免溶血，并及時(shí)分離血清，如需隔日檢驗(yàn)，應(yīng)封口后冰箱儲存。

第15頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(4)

采血用針頭過細(xì)會使血K+升高。(5)

要特別注意采血不能在輸液的同側(cè)進(jìn)行，更應(yīng)杜絕在輸液管內(nèi)采血，因輸液成分會影響檢測結(jié)果(使相應(yīng)的結(jié)果偏高，如輸K+、Glu時(shí)，可使所測K+、Glu明顯增高)，或使血液稀釋結(jié)果偏低。(6)血?dú)夂蚿H值測定的血液以動脈血為原則，且不可漏氣。細(xì)胞培養(yǎng)的樣品要采用無菌技術(shù)，防止污染。第16頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(7)

標(biāo)本采集后，必須在試管或容器上帖上檢驗(yàn)申請單號碼、住院病人應(yīng)有床號、姓名，且應(yīng)當(dāng)場核對無誤。第17頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(二)

尿液標(biāo)本

根據(jù)采集時(shí)間可分為清晨空腹尿、隨機(jī)尿、計(jì)時(shí)尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、癥狀典型時(shí)尿等。

(1)

晨尿?yàn)樽≡翰∪肆裟虻闹饕椒?，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常?guī)檢驗(yàn)。

(2)

隨機(jī)尿多為門診就診病人的留尿檢驗(yàn)方法。

(3)

餐后尿?yàn)槭占M(jìn)餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代謝情況，用以篩查隱性糖尿病或輕癥糖尿病。

第18頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(4)

計(jì)時(shí)尿應(yīng)于計(jì)時(shí)開始時(shí)排空尿液，然后于規(guī)定時(shí)間內(nèi)至截止時(shí)間留尿，計(jì)時(shí)尿多用于腎功能和有形成分排出率的評估，亦用于計(jì)算淀粉酶或肌酐的排出率。(5)

24h尿多用于化學(xué)組分的測定，亦用于泌尿道抗酸桿菌的檢查。第19頁,共39頁，2024年2月25日，星期天

尿液原則上以不用防腐劑為好，如需12h或24h尿，首選以冷藏為妥，根據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)康募佑煤线m的防腐劑，例如加40％甲醛1滴于尿液30ml中，適用于細(xì)胞及管型等有形成分的檢查；激素檢驗(yàn)常以鹽酸10ml作為24h尿的防腐劑或硼酸1g加于尿液100ml，麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸桿菌濃集檢查。第20頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(三)

糞便標(biāo)本采集后及時(shí)送檢，如作原蟲阿米巴檢查應(yīng)保持一定的溫度，且立即送檢，立即檢查，如檢查蟯蟲則不必送檢糞樣，而應(yīng)于晨起時(shí)排便前用棉拭擦肛門周圍，可得蟲卵。糞便標(biāo)本應(yīng)不污染容器外表，一般以無濾漏容器留取5～10g即可。第21頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(四)

腦脊液、漿膜腔液、關(guān)節(jié)液

均由臨床醫(yī)師穿刺采樣，檢驗(yàn)科應(yīng)提供專用的各種試管或容器，及時(shí)送送檢。第22頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(五)

骨髓

采樣由臨床醫(yī)師穿刺，抽吸量不得超過0.2ml，涂片送檢。第23頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(六)

胃及十二指腸液

一般均在門診或病房采集后送檢，收樣時(shí)應(yīng)核對標(biāo)本。胃液分基礎(chǔ)胃酸分泌(ABO)、最大胃酸分泌(MAO)等，十二指腸液分甲、乙、丙、丁管。甲管來自總膽管為橙黃色，乙管來自膽囊為黃綠色，丙管來自膽道為檸檬色，丁管來自十二指腸液為灰黃或淡黃色，細(xì)菌培養(yǎng)應(yīng)從乙管取樣接種培養(yǎng)基。第24頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(七)痰液標(biāo)本

采集晨間第一口痰，多用于細(xì)胞學(xué)及微生物學(xué)檢查。采樣前應(yīng)先反復(fù)漱口，經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應(yīng)在抗生素等藥物治療開始之前，如已用藥，則應(yīng)選血液藥物濃度最低水平時(shí)采樣。第25頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(八)

陰道分泌物

由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時(shí)送檢，如不能及時(shí)送檢，可在37℃加溫?cái)?shù)分鐘后檢查，否則影響滴蟲動力，易于漏檢。第26頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(九)

精液和前列腺液

采集精液應(yīng)在禁欲3～5天后進(jìn)行，且于排精后30min內(nèi)保溫送達(dá)檢驗(yàn)科，容器以廣口玻璃小好，不可貯存于避孕套或塑料瓶內(nèi)，收到標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)檢查。前列腺液由醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)取樣，收到標(biāo)本后亦應(yīng)立即檢查。第27頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(十)

其他標(biāo)本

根據(jù)具體檢驗(yàn)項(xiàng)目而定，臨床醫(yī)師在開申請單前，應(yīng)同檢驗(yàn)科相關(guān)部門聯(lián)系并詢問詳細(xì)后，注明檢查要求，再采樣并及時(shí)送檢。

總之，各種檢驗(yàn)標(biāo)本的采集合適與否，直接關(guān)系檢驗(yàn)質(zhì)量，應(yīng)予以重視。第28頁,共39頁，2024年2月25日，星期天三、標(biāo)本保存和運(yùn)送

標(biāo)本保存和運(yùn)送是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。由于采集的標(biāo)本受各種因素的影響，可能使檢驗(yàn)結(jié)果受或大或小的誤差，因此必須正確掌握標(biāo)本保存和運(yùn)送。(1)

采樣后須立即送檢的常規(guī)項(xiàng)目：血氨、血沉、血?dú)夥治觥⑺嵝粤姿崦?、乳酸以及各種細(xì)菌培養(yǎng)，特別是厭氧菌培養(yǎng)(2)

采樣后0.5h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目：血糖、電解質(zhì)、血液細(xì)胞學(xué)、體液細(xì)胞學(xué)、涂片找細(xì)菌、霉菌等。第29頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(3)

采樣后1～2

h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目：各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。(4)

采樣后2

h以上才能送檢者，則常對標(biāo)本采取必要的保存手段。對血糖或乳酸可直接分離血清后冷凍保存，或用NaF作穩(wěn)定劑2～8℃密封保存；K+

必須分離血清后密封2～8℃存放；ACP須加穩(wěn)定劑后分離血清冷凍保存；對其他一般項(xiàng)目，可加蓋密封后直接2～8℃存放，但血沉和細(xì)胞學(xué)檢查不能采用此方法。第30頁,共39頁，2024年2月25日，星期天(5)

標(biāo)本保存1個(gè)月：一般對檢測物分離后，-20℃存放。標(biāo)本需長期保存(3個(gè)月以上者)：對檢測物分離后(包括菌種)

-70℃保存，還應(yīng)避免反復(fù)凍融。第31頁,共39頁，2024年2月25日，星期天怎樣留取檢驗(yàn)標(biāo)本⑴、大便標(biāo)本的留取

大便常規(guī)檢查：用竹簽或木片采取約蠶豆大一塊新鮮糞便，裝入專門留取標(biāo)本的紙盒內(nèi)，寫上姓名，立即送檢。如大便有膿血時(shí)，應(yīng)留取膿血部分，水樣便要用容器留送，檢查寄生蟲時(shí)要在糞便各部分都留一點(diǎn)。大便培養(yǎng)檢查的標(biāo)本：用清潔便器接便，然后用無菌棉簽在大便上面取膿血部分少許，置入試管內(nèi)?；蛴孟久藓炚荷睇}水后插入肛門5－7厘米處，輕輕轉(zhuǎn)動帶出少許大便，置入試管內(nèi)送檢。這項(xiàng)工作一般由醫(yī)生、護(hù)士做。查大便隱血：留標(biāo)本前3天即要禁食肉類、肝、血、大量綠葉及含鐵食物，留取的大便標(biāo)本不能混入尿液，也不能混入其它分泌物、瀉劑、鋇劑和灌腸液。第32頁,共39頁，2024年2月25日，星期天⑵、尿標(biāo)本的留取尿常規(guī)檢查：留清晨第一次尿約100毫升于清潔容器內(nèi)送檢，不能污染上大便，女性月經(jīng)期暫不宜留尿。留24小時(shí)或12小時(shí)尿標(biāo)本：必須在清晨7時(shí)排空小便后開始留尿，將規(guī)定時(shí)間內(nèi)的尿都留在一個(gè)大容器中，直到最后一次尿排完為止，全部送檢。為了防止尿液變質(zhì)，除加入防腐劑外，還應(yīng)將尿放置在陰涼處。尿培養(yǎng)需留中段尿：要用肥皂水清洗會陰(龜頭)，再用清水洗凈，排尿時(shí)，前段尿不要，接取中間尿液于試管中送檢。