3.1實驗用豬管理規(guī)范報批稿

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h\t"標準文件_一級條標題,2,標準文件_附錄一級條標題,2,"前言 II1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術語和定義 14總體要求 24.1基本要求 24.2人員 34.3管理體系文件 35設施與環(huán)境 35.1總體要求 35.2籠具圍欄 35.3料盤 35.4福利用品 36實驗用豬質(zhì)量管理 36.1微生物與寄生蟲學等級 46.2檢測指標和項目 46.3檢測程序 56.4檢測方法 56.5檢測規(guī)則 56.6結果判定 67動物實驗管理 67.1總體要求 67.2遵循福利倫理原則 67.3福利倫理審查 67.4麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜 67.5安樂死 78動物運輸 79廢棄物處理 7附錄A（資料性）實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法 8附錄B（資料性）實驗用豬常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物 10參考文獻 11前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由廣東省科學技術廳提出并組織實施。本文件由廣東省實驗動物標準化技術委員會（GD/TC93）歸口。本文件起草單位：廣東省實驗動物監(jiān)測所、華南農(nóng)業(yè)大學、深圳市藥品檢驗研究院（深圳市醫(yī)療器械檢測中心）、深圳市領先醫(yī)療服務有限公司。本文件主要起草人：潘金春、王衡、王書晗、唐華、魏遠征、賈坤、王爾一、穆盈、陳小曲、王靜、張鈺。實驗用豬管理規(guī)范范圍本文件規(guī)定了實驗用豬的生產(chǎn)和開展動物實驗的總體要求、設施與環(huán)境、實驗用豬質(zhì)量管理、動物實驗管理、動物運輸以及廢棄物處理等管理要求。本文件適用于實驗用豬的生產(chǎn)和使用管理。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB14925實驗動物環(huán)境及設施GB/T27416實驗動物機構質(zhì)量和能力的通用要求GB/T34791實驗動物質(zhì)量控制要求GB/Z34792實驗動物引種技術規(guī)程GB/T35823實驗動物動物實驗通用要求GB/T35892實驗動物福利倫理審查指南GB/T39235豬營養(yǎng)需要量GB/T39760實驗動物安樂死指南GB/T39915動物飼養(yǎng)場防疫準則NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術規(guī)范NY/T3189豬飼養(yǎng)場獸醫(yī)衛(wèi)生規(guī)范RB/T061實驗動物安樂死技術規(guī)范DB44/TXXXX實驗用羊管理規(guī)范術語和定義下列術語和定義適用于本文件。

實驗用豬experimentalpig用于科學研究、教學、檢驗檢測以及其他科學實驗的豬。

實驗用豬生產(chǎn)設施breedingfacilityforexperimentalpig用于實驗用豬生產(chǎn)的建筑物和設備的總和。

實驗用豬實驗設施experimentalfacilityforexperimentalpig以研究、試驗、教學、生物制品和藥品及相關產(chǎn)品生產(chǎn)、檢驗檢測等為目的而進行實驗用豬試驗的建筑物和設備的總和。

普通環(huán)境conventionalenvironment通過人工控制，滿足普通級實驗動物生產(chǎn)或使用要求的各種因素總和。[來源：GB14925—2023,3.4]

屏障環(huán)境barrierenvironment滿足無特定病原體（specificpathogenfree，SPF）級實驗動物生產(chǎn)或使用要求的各種因素總和。[來源：GB14925—2023,3.5]

隔離環(huán)境isolationenvironment滿足無菌（germfree）級實驗動物生產(chǎn)或使用要求的各種因素綜合。[來源：GB14925—2023,3.6]普通級實驗用豬conventional（CV）experimentalpig普通實驗用豬不攜帶所規(guī)定的對動物和（或）人健康造成嚴重危害的人獸共患病原體和動物烈性傳染病病原體的實驗用豬。

無特定病原體級實驗用豬specificpathogenfree（SPF）experimentalpig無特定病原體實驗用豬SPF實驗用豬除普通級實驗用豬應排除的病原體外，不攜帶對動物健康危害大和（或）對科學研究干擾大的病原體的實驗用豬。

無菌級實驗用豬germfree（GF）experimentalpig無菌實驗用豬動物體內(nèi)無可檢出任何生命體的實驗用豬?？傮w要求基本要求實驗用豬生產(chǎn)設施應取得《動物防疫條件合格證》。實驗用豬生產(chǎn)區(qū)與畜牧養(yǎng)殖區(qū)應相互獨立或隔離，并做好實驗用豬生產(chǎn)繁殖記錄，保障遺傳背景明確。實驗用豬生產(chǎn)引種按照GB/Z34792的規(guī)定執(zhí)行。選擇行業(yè)認可的種子中心或種源基地進行引種。生產(chǎn)實驗用豬按照引進豬的品種要求設立豬群結構、飼養(yǎng)密度，開展種公豬、種母豬、仔豬、育成豬的飼養(yǎng)管理。用于開展動物實驗的豬應來源于培育和飼養(yǎng)的動物群體，保障動物質(zhì)量，防止人獸共患病。實驗用豬的獸醫(yī)衛(wèi)生、飼養(yǎng)管理按照NY/T3189執(zhí)行。實驗用豬的營養(yǎng)需要量按照GB/T39235規(guī)定執(zhí)行。飼料在產(chǎn)品保質(zhì)期內(nèi)使用，應清潔干凈、新鮮、無雜質(zhì)、無異味、無霉變、無發(fā)酵、無蟲蛀及鼠咬。飼喂期間，可適當補青綠飼料并對青綠飼料進行質(zhì)量控制。動物飲水應符合GB14925飲水的要求。實驗用豬的防疫應符合GB/T39915規(guī)定。進入屏障環(huán)境和隔離環(huán)境的飼料、墊料、飲水等應經(jīng)消毒滅菌處理。人員人員應符合GB/T27416和GB/T34791規(guī)定。管理體系文件機構宜按照GB/T27416規(guī)定建立管理體系文件。設施與環(huán)境總體要求實驗用豬的環(huán)境分類、環(huán)境指標、工藝布局、設施按照GB14925執(zhí)行?；\具圍欄籠具圍欄應符合實驗用豬的生理、健康及福利要求，滿足GB14925籠具的要求。實驗用豬籠具圍欄尺寸應符合GB14925豬所需居所最小空間要求（單養(yǎng)時），群養(yǎng)實驗用豬時應符合表1的要求。實驗用豬籠具圍欄最小尺寸飼養(yǎng)數(shù)量/頭體重/kg底板面積/（m2/頭）籠內(nèi)高度/m2～5＜250.540.825～500.91.050～1001.81.0100～2003.61.2＞2004.681.2＞5＜250.540.825～500.811.050～1001.621.0100～2003.241.2＞2004.321.2料盤料盤參照DB44/TXXXX執(zhí)行。福利用品應符合GB14925福利用品的要求。實驗用豬質(zhì)量管理微生物與寄生蟲學等級實驗用豬按微生物、寄生蟲學等級分類分為普通級、無特定病原體級和無菌級。檢測指標和項目臨床檢查可根據(jù)需求選擇外觀、血常規(guī)、血生化、影像等檢查方法，實驗用豬臨床檢查應無異常。檢測項目實驗用豬病原微生物及寄生蟲檢測項目按表2的要求。實驗用豬病原微生物及寄生蟲檢測項目動物等級檢測項目檢測要求無菌級無特定病原體級普通級布魯氏菌Brucella●豬鏈球菌2型Streptococcussuisserotype2△鉤端螺旋體Leptospira△紅斑丹毒絲菌Erysipelothrixrhusiopathiae○皮膚病原真菌Pathogenicdermalfungi●口蹄疫病毒Footandmouthdiseasevirus▲豬瘟病毒Classicalswinefevervirus△非洲豬瘟病毒Africanswinefevervirus●豬繁殖與呼吸綜合征病毒Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus△流行性乙型腦炎病毒Japaneseencephalitisvirus△體外寄生蟲Ectoparasites●弓形蟲Toxoplasmagondii●旋毛蟲Trichinella○豬囊尾蚴Cysticercus○沙門氏菌Salmonellaspp.○胸膜肺炎放線桿菌Actinobacilluspleuropneumoniae●豬肺炎支原體Mycoplasmahyopneumoniae●副豬嗜血桿菌Haemophilusparasuis○多殺性巴氏桿菌Pasteurellamultocida

●支氣管敗血波氏桿菌Bordetellabronchiseptica●豬痢疾短螺旋體Brachyspirahyodysenteriae●豬圓環(huán)病毒2型Porcinecircovirustype2○表2實驗用豬病原微生物及寄生蟲檢測項目（續(xù)）動物等級檢測項目檢測要求無菌級無特定病原體級豬細小病毒Porcineparvovirus●豬水泡病病毒Swinevesiculardiseasevirus○豬流行性腹瀉病毒Porcineepidemicdiarrheavirus

●豬傳染性胃腸炎病毒Porcinetransmissiblegastroenteritisvirus●豬流感病毒Influenzavirus○偽狂犬病毒Pseudorabiesvirus●球蟲Coccidian○小袋纖毛蟲Balantidium●賈第蟲Giardia●阿米巴原蟲Amoeba●隱孢子蟲Cryptosporidium●蠕蟲Helminths●無任何可查到的病原微生物及寄生蟲●▲必須檢測，普通級必須免疫，無特定病原體級和無菌級不能免疫。△必須檢測，普通級可以免疫，無特定病原體級和無菌級不能免疫?！癖仨殭z測，要求陰性?！鸨匾獣r檢測。必須檢測項目：指在進行實驗用豬質(zhì)量評價、等級確定時必須檢測的項目。必要時檢測項目：指相關行政部門要求時、本病流行時、進出口時，或特殊實驗要求時需要檢測的項目。檢測程序檢測程序按照DB44/TXXXX執(zhí)行。檢測方法實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法見附錄A。檢測規(guī)則檢測頻率普通級實驗用豬每6個月應至少檢測1次；無特定病原體級實驗用豬每3個月應至少檢測1次；無菌級實驗用豬每年至少檢測1次，每2周～4周檢查一次動物的生活環(huán)境標本和糞便樣本。取樣要求應選擇6月齡以上的實驗用豬。根據(jù)實驗用豬群體大小，取樣數(shù)量見表3。取樣數(shù)量群體大小/頭取樣數(shù)量/頭＜100≥5100～500≥10＞500≥15動物送檢容器應按動物級別要求編號和標識，包裝好，安全送達實驗室，并附送檢單，寫明動物品種品系、等級、數(shù)量和檢測項目。采樣方法應按照NY/T541進行。結果判定結果判定按照DB44/TXXXX執(zhí)行。動物實驗管理通用要求動物實驗管理按照GB/T35823執(zhí)行。遵循福利倫理原則使用實驗用豬應符合“替代、減少、優(yōu)化”原則。使用合格的實驗用豬，保障人和動物的健康。在生產(chǎn)、使用和運輸過程中應當維護實驗用豬福利，關愛實驗用豬不得虐待實驗用豬。采取有效措施，保障實驗用豬處于舒適、健康、快樂等自然生活狀態(tài)的五項自由，包括免于饑渴的自由，免于不適的自由，免于痛苦、傷害和疾病的自由，表達主要天性的自由，免于恐懼和焦慮的自由。在不影響實驗結果判定的情況下，盡可能減少實驗用豬的痛苦或縮短動物承受痛苦的時間。在對實驗用豬進行手術或其他活體操作時，應進行有效的麻醉、鎮(zhèn)靜或止痛；實驗用豬處于手術后、患病等疼痛、痛苦狀態(tài)時應實施有效的治療、止痛；處死實驗用豬時應實施安死術。福利倫理審查按照GB/T35892有關規(guī)定，對使用實驗用豬的必要性、合理性和規(guī)范性進行檢查和審定。麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜應選用藥用級化合物，選用非藥用級化合物的，應通過福利倫理審查。麻醉劑種類分為注射麻醉劑和氣體麻醉劑。注射麻醉劑適用于短期手術，氣體麻醉劑適用于較長時間手術。使用氣體麻醉劑前通常使用注射麻醉劑誘導麻醉，再使用氣體麻醉劑維持麻醉。氣體麻醉不宜作為首選麻醉方式單獨使用。止痛藥一般用于減輕動物疾病或手術后疼痛的嚴重程度和持續(xù)時間。根據(jù)動物疼痛級別、藥物作用等因素綜合確定給藥頻次和時間。鎮(zhèn)靜劑主要用于動物化學保定、手術前期麻醉等過程，可以減少動物焦慮、恐懼和過度活動。鎮(zhèn)靜劑與麻醉劑聯(lián)合使用時，可增強肌肉放松、無意識和鎮(zhèn)痛。常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物見附錄B。安樂死按照GB/T39760、RB/T061規(guī)范執(zhí)行。動物運輸動物運輸參照DB44/TXXXX執(zhí)行。廢棄物處理按照GB14925廢棄物處理規(guī)定執(zhí)行。

（資料性）

實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法見表A.1。實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法病原體推薦檢測標準檢測方法布魯氏菌GB/T18646抗體檢測、病原檢測豬鏈球菌2型GB/T19915.7核酸檢測鉤端螺旋體GB/T14926.46抗體檢測紅斑丹毒絲菌NY/T566抗體檢測、抗原檢測、病原檢測皮膚病原真菌GB/T14926.4病原檢測口蹄疫病毒GB/T18935抗體檢測、核酸檢測、病原檢測豬瘟病毒GB/T16551抗體檢測、核酸檢測非洲豬瘟病毒GB/T18648抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒GB/T18090抗體檢測、病原檢測、核酸檢測流行性乙型腦炎病毒GB/T18638抗體檢測、病原檢測、核酸檢測體外寄生蟲GB/T18448.1肉眼觀察、鏡檢弓形蟲NY/T573抗體檢測、核酸檢測旋毛蟲GB/T18642抗體檢測、鏡檢、核酸檢測豬囊尾蚴GB/T18644抗體檢測、抗原檢測、鏡檢、核酸檢測沙門氏菌NY/T550病原檢測胸膜肺炎放線桿菌NY/T537抗體檢測、核酸檢測豬肺炎支原體NY/T1186抗體檢測、病原檢測、核酸檢測副豬嗜血桿菌GB/T34750核酸檢測、病原檢測多殺性巴氏桿菌NY/T546核酸檢測、病原檢測支氣管敗血波氏桿菌NY/T546核酸檢測、病原檢測、抗體檢測豬痢疾短螺旋體NY/T545核酸檢測、鏡檢豬圓環(huán)病毒2型GB/T35910、GB/T35901、GB/T21674抗體檢測、核酸檢測豬細小病毒NY/T4137抗體檢測、核酸檢測豬水泡病病毒GB/T19200抗體檢測豬流行性腹瀉病毒NY/T544抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測表A.1實驗用豬病原微生物和寄生蟲的檢測方法（續(xù)）病原體推薦檢測標準檢測方法豬傳染性胃腸炎病毒NY/T548抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測豬流感病毒GB/T27521核酸檢測偽狂犬病毒GB/T18641抗體檢測、核酸檢測球蟲GB/T18647鏡檢小袋纖毛蟲GB/T18448.10鏡檢賈第蟲GB/T18448.10鏡檢阿米巴原蟲GB/T18448.9鏡檢隱孢子蟲NY/T1949鏡檢蠕蟲GB/T18448.6鏡檢、肉眼觀察

（資料性）

實驗用豬常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物實驗用豬常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物見表B.1。實驗用豬常用麻醉、止痛和鎮(zhèn)靜藥物類別常用藥品名麻醉劑氣體麻醉劑異氟烷（Isoflurane）、七氟烷（sevoflurane）、恩氟烷（enflurane）和氟烷（halothane）等，其中異氟烷最為常用。注射麻醉劑1.單用：氯胺酮（ketamine）、唑拉西泮（zolazepam）和替來他明（tiletamine）混合物、丙泊酚（propofol）；2.聯(lián)合使用：氯胺酮（ketamine）/賽拉嗪（xylazine）、氯胺酮（ketamine）/乙酰丙嗪（acepromazine）、氯胺酮（ketamine）/賽拉嗪（xylazine）/羥嗎啡酮（oxymorphone）、舒泰（Zoletil，為唑拉西泮（zolazepam）和替來他明（tiletamine）的混合物）/賽拉嗪（xylazine）、舒泰（Zoletil）/賽拉嗪（xylazine）/布托啡烷（butorphanol）、舒泰（Zoletil）/二甲苯胺噻唑（xylenethiazole）/鹽酸二氫埃托菲（dihydroetorphinehydrochloride）。止痛藥阿片類藥物丁丙諾啡（buprenorphine）、布托啡諾（butorphanol）和羥嗎啡酮（oxymorphone）。非甾體抗炎藥卡洛芬（carprofen）、美洛昔康（meloxicam）和酮洛芬（ketoprofen）。鎮(zhèn)靜劑常用鎮(zhèn)靜劑地西泮（diazepam）、咪達唑侖（midazolam)、氮哌酮（azaperone)、乙酰丙嗪（acepromazine）等。止痛鎮(zhèn)靜劑美托咪啶（medetomidine)（拮抗劑為阿替美唑（atipamezole））、塞拉嗪（xylazine）（拮抗劑為育亨賓堿（yohimbine））等。參考文獻[1]GB14922實驗動物微生物、寄生蟲學等級及監(jiān)測[2]GB/T14926.4實驗動物皮膚病原真菌檢測方法[3]GB/T14926.46實驗動物鉤端螺旋體檢測方法[4]GB/T16551豬瘟診斷技術[5]GB/T18090豬繁殖與呼吸綜合征診斷方法[6]GB/T18448.1實驗動物體外寄生蟲檢測方法[7]GB/T18448.6實驗動物蠕蟲檢測方法[8]GB/T18448.9實驗動物腸道溶組織內(nèi)阿米巴檢測方法[9]GB/T18448.10實驗動物腸道鞭毛蟲和纖毛蟲檢測方法[10]