共聚焦激光顯微內鏡在結直腸疾病中的應用進展

檢有出血、穿孔等風險，而共聚焦激光顯微內鏡(confocallaserendomicroscopy,CLE)的出現剛好可以彌補這個缺陷。CLE作為新興的內鏡技術，自2004年推出以來，已經實現1000倍放大和1Hm分辨率的成像[1],具備實時活體組織細胞結構的變化進行實時監(jiān)測[2],即“虛擬活檢”。本文將概述CLE在當前化為電子圖像，最后形成一個灰度圖像，代表著某一個特定的平面。目前CLE分為兩種類型：基于內鏡的CLE(endoscope-based可與白蛋白結合，其余未結合的熒光素進入組織后強烈標記細胞外基質而顯像1.炎癥性腸病(inflammatoryboweldisease,IBD):IBD是一種由多種復雜因素相互作用導致的腸道慢性炎癥性疾病，主要分為潰瘍性結ativecolitis,UC)和克羅恩病(crohndisease,CD)兩種亞型[8]。在正光素滲漏等表現[1]。Quénéhervé等[9]利用CLE對50例IBD患者以及9例對照組患者的14項形態(tài)學及功能學改變進行評估，設計出一種基于計算機的CLE圖像分析方法來診斷IBD以及區(qū)分UC和CD,其中診斷IBD的敏感度和特異度均為100%,鑒別UC與CD的敏感度、特異度分別為92.3%和91.3%。后續(xù)的一項研究進一步證實了CLE能夠可靠地區(qū)分正常及炎癥性腸黏膜，并可以作為IBD診斷的輔助手段[10]。上皮內瘤變和癌變是IBD嚴重的遠期并發(fā)癥，最近一項腫瘤性病變，敏感度為91%,特異度為97%[11]。在另一項研究中，DePlama等[12]利用熒光素偶聯的VRPMPLQ肽作為分子探針，從9例UC患者中切除了11處內鏡下疑似異型增生的病變，用肽噴灑標本并進行CLE檢查，然后將圖像親和力，證實了CLE聯合靶向熒光標記肽在檢測UC相關的異型增生病灶方面具變、微侵蝕等為基礎的CD內鏡下活動評分[13];以小腸及微侵蝕腔熒光素滲漏等為基礎的Watson量表[14-15];以血管直徑>20Hm、隱窩結構不規(guī)則、隱指數[16];以及LI等[17]提腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor,TNF)抗體通過與跨膜型腫瘤壞死因子(membrane-boundtumornecrosisfactor,mTNF)結合可以抑制CD的炎癥反應。在一項臨床試驗中，Atreya等[18]利用CLE評估了25例接受TNF抗體治療的CD患者治療反應，12周后發(fā)現與mTNF細胞數量少的患者相比，具有大量mTNF免疫細胞的患者對治療的反應率要高得多(92%比15%,P<0.001);訪檢查時的黏膜愈合有關。Iacucci等[19]以類似的方式利用CLE對29例接D的療效方面具有重要作用，同時可以指導IBD及其他慢性炎癥性疾病藥物的合內鏡下黏膜愈合評分(endomicroscopicmucosal敏感度(100%)、特異度(93.75%)和準確率(94.44%);此外，eMHs還與組織學評分(Gupta指數)以及內鏡活動評分(Mayo評分)有良好的相關性。在另蛛網型和缺乏型3種黏膜毛細血管血流模式，發(fā)現黏膜局部缺血現象與UC緩解形式，可作為進一步研究黏膜愈合的指標[21]。IBD的復發(fā)是目前疾病診療關注的熱點，Kiesslich等[15]使用CLE來評隙增加和熒光素滲漏與較高的復發(fā)率相關，敏感度為62.5%,特異度為91.2%,特異度和準確率分別為64%、88.9%和74.4%[22],與Kiesslich等[15]的研究結論相當。后續(xù)一些文獻研究進一步證明CLE在預測IBD復發(fā)方面具有重要意義[23-25]。早期鑒別惡變傾向息肉，可以有效預防息肉癌變。因此，在基于pCLE(邁阿密分類)和eCLE(美因茨分類)基礎上建立了結直腸息肉的CLE分類系統(tǒng)[26-2上皮顏色變深伴不規(guī)則增厚以及杯狀細胞減少等表現[26]。最近一項研究還確紊亂，表現為隱窩結構變形(主要表現為隱窩底部擴張，分支或水平延伸)和營養(yǎng)不良性杯狀細胞的存在[28]。杯狀細胞數量減少[29]。Taunk等[30]發(fā)現CLE聯合計算機輔助診斷技術(computer-aideddiagnosis,CAD)可獲得高度準確的息肉組織學結果(敏感度為95%,特異度為94%,準確率為94%),如果使用CAD算法來輔助初級內鏡醫(yī)潛力[31-33]。行早期結直腸癌的診斷，結果顯示非腫瘤組織的BODIPY-FA強度分別比低級別上皮內瘤變、高級別上皮內瘤變和腫瘤組織高出近1.6倍、2倍和2.2倍，提示相較于非腫瘤組織，腫瘤組織對BODIPY-FA攝取減少；研究還發(fā)現，與靜脈應用熒光素鈉相比，BODIPY-FA染色聯合CLE具有更高的一致性(0.68比0.43)和總體有效性(74.65%比55.88%)[34]。Wang等[35]利用類似方法評估CLE聯合熒光標記的荊豆凝集素(ulexeuropaeusagglutinin,UEA)-異硫氰LE鏡下可見UEA-FITC在結直腸癌組織中的熒光強度明顯低于正常組織，研究顯示相較于單獨使用CLE(敏感度為81%~91.4%,特異度為76%~85.7%)[36-37],UEA-FITC聯合CLE對結直腸癌顯示出更為良好的診斷準確性(敏感度為95.6%,特異度為97.7%)。這表明CLE聯合分子成像技術在結直腸癌的診斷方面Liu等[38]在2018年提出利用CLE評估低位直腸癌病變部位遠端切緣性質。該研究前瞻性納入18例低位直腸癌患者，其中11例病變直腸遠端切緣黏膜其敏感度為85.71%,特異度為100%,準確率為94.44%。另一項研究通過CLE來直腸癌的浸潤深度，實時評估的敏感度、特異度和準確率分別為100%、94%和95%[31]。以上結果表明，CLE有助于評估結直腸癌的病變邊緣和浸潤深度，因床完全緩解的患者可以進行密切隨訪而不需要立即手術[39-43]。最近有學者利用pCLE評估晚期直腸腺癌患者在接受新輔助放化療后的反應，研究納入47全緩解的敏感度和準確率均較高(分別為100%和95.7%)[44]。這有助于確定4.腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome,IBS):在傳統(tǒng)內鏡下難以IBS患者結直腸黏膜炎癥發(fā)生率升高[45]。這表明CLE可能是評估IBS患者腸Fritscher-Ravens等[46]利用CLE實時顯示疑似食物不耐受的IBS患者在接受食物刺激后腸黏膜的結構/功能變化，發(fā)現約60%的IBS患者，當他們的最近一項更大規(guī)模的研究中得到了重復和拓展[47],這表明CLE可以對特定食物成分引起的IBS患者腸黏膜結構/功能改變進行可視化診斷，是一個非常有價值的診斷工具，并可以指導IBS患者后續(xù)的治療方案。Turcotte等[48]利用p用仍存在一定的局限性：(1)由于目前大多數CLE研究是由資深的內鏡專家而的不良事件主要與造影劑的過敏特性有關[49],因此未來還需要對有過敏史的[1]BuchnerAM.Confocallaserendomicroflammatoryboweldisease[J].InflammBowelDis,2019,25(8):1302-1DOI:10.1093/ibd/izz021.[2]HurlstoneDP,Brownrativecolitis[J].PostgradMedJ,2007,83(981):451-460.DOI:10.11[3]CommitteeAT.Confocallaserendomicroscopy[J].Gastsc,2014,80(6):928-938.DOI:10.1016/j.gie.2014.02014,26(Suppl1):86-94.DOI:10.1111/den.12152.[5]PilonisND,JanuszewiczW,DiPietroM.Confocallaserpplications[J].TranslGastroenterolHepatol,2022,7:7.DOI:10.210safetyandefficacyndosc,2021,35(5):2091-2103.DOI:10.1007/s00464-020-07607-3.[7]HoffmanA,GoetzM,Vieth1275-1283.DOI:10.1055/s[8]GrahamDB,XavierRJ.Pathwayparadigmsrevealedfromsofinflammatoryboweldisease[J].Nature,2020,578(7796):527-539.[9]QuénéhervéL,DavidG,BourreilleA,etal.Quantilaserendomicroscopyininflammatoryboweldiseases[J].GastroiEndosc,2019,89(3):626-636.DOI:10.1016/j.gie.2018.08.006.rithmfortheconfirmationofedonconfocallaserendomicroscopyiDis,2021,30(1):59-65.DOI:10.15403/jgld-3212.ionininflammatoryboweldisease:asystematicrevisis[J].WorldJGastroenterol,2018,24(10):1167-1180.DOI:10.3748/dysplasiainpatientswithulcerativecolitisusingatargetescentpeptideandconfocallaserendomLoSOne,2017,12(6):e0180509.DOI:10.1371/journal.pone.0180509.[13]NeumannH,ViethM,AtreyaR,etal.Assessmeseactivitybyconfocallase012,18(12):2261-2269.DOI:10.1002/ibd.22907.[14]LimLG,NeumannJ,Hansetifieslossoflocalbarrierfunctioninthed20(5):892-900.DOI:10.1097/MIB.OOOOOO0000000027.[15]KiesslichR,Duckworthunctionidentifiedbyconfocallaserendomicroscopyprininflammatoryboweldisease[J].Gut,2012,61(8):1146-11domicroscopyforinvivoassessmentofhistoltivecolitis:developmentandvalidationoftheErohnsColitis,2021,15(6):994-999.DOI:10.1093/ecco-jcc/jjaa255.[17]LiCQ,XieXJ,YuT,etal.Classificationofinflammationact[18]AtreyaR,NeumannponseinCrohn'sdisease[[19]IacucciM,GrisanE,LabarileN,etal.P397responsetobiologicsinIBDpatientsassessedbycoasedconfocallaserendomicroscopywithmole1ofCrohn'sandcco-jcc/jjab076.521.tionofaconfocallaserendomicroscopy-basedsmentofmucosalhealinginulceraowelDis,2017,24(1):35-44.DOI:10.10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