1.2.2微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修32

微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)-高中生物

目錄實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)原理四

教材分析一

實(shí)驗(yàn)效果與評價六

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五

實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新要點(diǎn)三

實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)與核心素養(yǎng)二選必3第1章第2節(jié)（第2課時）微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)—探究實(shí)踐。本實(shí)驗(yàn)在之前學(xué)習(xí)酵母菌的純培養(yǎng)基礎(chǔ)上，進(jìn)一步使用選擇培養(yǎng)基篩選土壤中能夠分解尿素的微生物，使學(xué)生認(rèn)識到特定微生物具有特定的代謝特點(diǎn)，同時也使得學(xué)生無菌操作和培養(yǎng)微生物的技能得到提升。

教材分析一生命觀念科學(xué)探究科學(xué)思維通過實(shí)驗(yàn)，知道滅菌與消毒的區(qū)別；認(rèn)同各種微生物都有其特定的代謝方式，能適應(yīng)其生活的環(huán)境。根據(jù)微生物的代謝類型，配制選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，總結(jié)分離微生物和鑒別其種類的方法。社會責(zé)任從實(shí)驗(yàn)中認(rèn)同化肥的濫用會污染土壤，影響環(huán)境通過對細(xì)菌進(jìn)行分離和計數(shù)，理解并掌握稀釋涂布平板法；探究土壤中是否有其他方式利用尿素生存的細(xì)菌。

實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)與核心素養(yǎng)二（1）在教材給出的培養(yǎng)基配方的基礎(chǔ)上添加了少量酚紅試劑，將傳統(tǒng)選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基二者相結(jié)合；防止以其他形式利用尿素的脲酶假陽性菌干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新要點(diǎn)三（2）實(shí)驗(yàn)新增不使用化肥的校園土為樣本，分兩組對不同土壤樣本做對照實(shí)驗(yàn)，探究化肥的使用是否會影響土壤微生物的物種組成。

實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新要點(diǎn)三（1）該實(shí)驗(yàn)中用的培養(yǎng)基將尿素唯一氮源的選擇功能和酚紅遇堿變紅的鑒定功能結(jié)合在一起，只要培養(yǎng)基變紅，就可以將菌落判斷為脲酶陽性菌。（2）當(dāng)菌液的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落來源于菌液中的一個細(xì)菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就可計算得出土壤樣品中大約有多少細(xì)菌。

實(shí)驗(yàn)原理四（一）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（1）理論知識準(zhǔn)備：教師設(shè)計導(dǎo)學(xué)案，學(xué)生自主完成課前預(yù)習(xí)內(nèi)容。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五1、儀器用具2、材料3、藥品與試劑電子秤、燒杯、試管、錐形瓶、培養(yǎng)皿、涂布器、酒精燈、移液槍、高壓蒸汽滅菌鍋、水浴加熱箱常年使用化肥的農(nóng)田土壤不使用化肥的校園土壤兩類樣本作為實(shí)驗(yàn)磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、尿素、瓊脂、無菌水、酚紅試劑（2）實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備：（一）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（一）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（3)預(yù)實(shí)驗(yàn)：教師進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，設(shè)計實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（1）配制培養(yǎng)基將1.4g磷酸二氫鉀、2.1g磷酸氫二鈉、0.2g硫酸鎂、10g葡萄糖、4mL0.2%酚紅溶液、15g瓊脂放人燒杯中加水煮沸，溶解后加水定容至1L,倒入錐形瓶中，塞上塞子。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（2）滅菌將培養(yǎng)基、蒸餾水瓶、培養(yǎng)皿、試管用舊報紙包裹起來，移液槍吸頭裝入吸頭盒。將這些器材放人高壓蒸汽滅菌鍋中，在加壓100kPa、121℃的條件下加熱15分鐘滅菌。滅菌結(jié)束后將器材取出，等待冷卻。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（3）倒平板先對雙手和桌面噴灑75%酒精消毒，待酒精揮發(fā)后點(diǎn)燃酒精燈。等培養(yǎng)基冷卻到放在手背上感覺不燙的時候開始倒平板。甲組為不接種的空白對照組，乙組為接種土壤稀釋液的實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組含土壤稀釋1x104、1x105、1x106倍三個梯度，每個梯度至少3個平板。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（4）梯度稀釋將10g土壤樣本加入90mL無菌水中，充分搖勻，制成10倍稀釋液。向5個試管中各加入9mL無菌水，并做好標(biāo)記。用移液槍取1mL10倍土壤稀釋液的上清液加入含9mL無菌水的試管中，混勻制成1x102倍稀釋液，依次等比稀釋直到1x106倍。兩種土壤樣本稀釋操作相同。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（5）涂布平板法接種用移液槍分別吸取0.1mL,1x104、1x105和1x106倍稀釋液，滴加到每組平板上，然后取出浸泡在酒精中的涂布器，在酒精燈上灼燒滅菌。將涂布器靠在培養(yǎng)皿的上蓋內(nèi)側(cè)，使其冷卻，接著把菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基上,每次涂布后都要再次灼燒滅菌。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五（二）實(shí)驗(yàn)操作（6）培養(yǎng)及觀察將培養(yǎng)基倒置培養(yǎng)2-3天。培養(yǎng)結(jié)束后觀察培養(yǎng)基的顏色變化和菌落形態(tài)，記錄在實(shí)驗(yàn)報告上。將兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對比，得出結(jié)論。

教學(xué)設(shè)計與實(shí)驗(yàn)過程五

實(shí)驗(yàn)效果與評價六校園土農(nóng)田土

實(shí)驗(yàn)效果與評價六校園土空白校園土1x104校園土1x105校園土1x106農(nóng)田土空白農(nóng)田土1x104農(nóng)田土1x105農(nóng)田土1x10605/1221/261/11047/22611/363/12/6/1562/591/19/32/1639/322/9/7/1042/370/14/38/17212/355/16校園土分解尿素的細(xì)菌：6x105個/g農(nóng)田土分解尿素的細(xì)菌：3.9x106個/g

實(shí)驗(yàn)效果與評價六兩組土壤實(shí)驗(yàn)都有菌落的生長，且在相同稀釋濃度中農(nóng)田