血糖Glu的測定干擾預試驗及實驗_第1頁
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文檔簡介

關于血糖Glu的測定干擾預試驗及實驗一、干擾原理干擾試驗用于測定某物質(zhì)加到樣品中產(chǎn)生的系統(tǒng)誤差。干擾物濃度一定時,產(chǎn)生的誤差是恒定系統(tǒng)誤差,誤差的實際大小隨干擾物的濃度而變化。干擾試驗即用于檢驗某方法的特異性,也用于檢測干擾物質(zhì)對方法的干擾作用,以評價分析方法的準確性。第2頁,共10頁,2024年2月25日,星期天β-D-葡萄糖+O2+H2OGODD-葡萄糖酸+H2O2

(GOD:葡萄糖氧化酶)H2O2+4-AAP+酚POD2H2+紅色醌類化合物

(4-AAP:4氨基氨替比林)(POD:過氧化物酶)第3頁,共10頁,2024年2月25日,星期天當干擾物的濃度達到一定量時,將對相應的實驗產(chǎn)生干擾,由于vitC、尿酸等物質(zhì)對血糖測定GOD-POD法具有干擾作用,本實驗選用vitC做GOD-POD法測血糖的干擾試驗,vitC與GOD反應生成的H2O2發(fā)生反應,使部分H2O2不能參與第二步POD的偶聯(lián)反應,從而降低顯色強度,產(chǎn)生負的測定誤差。第4頁,共10頁,2024年2月25日,星期天二、樣品制備

干擾樣品血清30mmol/LVitC標準液生理鹽水基礎血清(ml)0.09-0.01樣品Ⅰ(ml)0.090.01-樣品Ⅱ(ml)0.090.0070.003樣品Ⅲ(ml)0.090.0050.005第5頁,共10頁,2024年2月25日,星期天三、測定方法

1、加樣

2、分光光度計測定方法:波長505nm,以空白管調(diào)零,測定標準管和各樣品管吸光度值,按公式計算測定結(jié)果。

試劑校準(S)空白(B)基礎樣品干擾管123

校準液(ml)

0.02—————樣品(ml)

——————蒸餾水(ml)

—0.02————基礎樣品(ml)

——0.02———干擾樣品1(ml)

———0.02——干擾樣品2(ml)

————0.02—干擾樣品3(ml)

—————0.02工作試劑(ml)

2.02.02.02.02.02.0

各管充分混勻置37水浴10分鐘后室溫冷卻。第6頁,共10頁,2024年2月25日,星期天四、計算與數(shù)據(jù)處理⑴計算公式:Glu含量(mmol/L)=×Cs

其中:Cs=5.55mmol/L干擾物加入量=

干擾物濃度:30mmol/L

干擾值(mmol/L)=干擾樣品測定值-基礎樣品測定值干擾率(%)=干擾值/基礎值×100⑵干擾試驗的數(shù)據(jù)處理:

樣品GLU測得值(mmol/L)加入US值(mmol/L)干擾值(mmol/L)干擾率(%)基礎樣品(ml)———干擾樣品1(ml)干擾樣品2(ml)干擾樣品3(ml)

第7頁,共10頁,2024年2月25日,星期天五、參考區(qū)間干擾值即偏差,當偏差<允許誤差,則表明干擾物引起的偏差不會影響測定結(jié)果的臨床應用價值。對于血糖測定而言,當干擾物引起的偏差小于1/4TEa[CLIA88(臨床實驗室修正法規(guī)1988)能力對比試驗的質(zhì)量要求規(guī)定,血糖的TEa為0.33mmol/L或10%],則不會影響測定結(jié)果的臨床應用價值,可以近似地認為當干擾物濃度低于該濃度時不會對血糖測定產(chǎn)生影響。第8頁,共10頁,2024年2月25日,星期天六、評價與思考當干擾物引起的偏差小于1/4TEa時,則不會影響測定結(jié)果的臨床應用價值,可近似地認為當干擾物濃度低于該濃度時不影響測定結(jié)果。干擾物對測

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