2.2微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)（第二課時(shí)）課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

第一章發(fā)酵工程

微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

1973年，科學(xué)家從美國(guó)黃石國(guó)家公園的熱泉中篩選出水生棲熱菌(Thermusaquaticus)，進(jìn)而從這種菌中提取出耐高溫的DNA聚合酶。這種酶目前已被廣泛用于體外擴(kuò)增DNA片段的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)。

這是因?yàn)樗鷹珶峋茉?0~80℃的高溫條件下生存，而絕大多數(shù)微生物在此條件下不能生存。討論1.為什么水生棲熱菌能從熱泉中被篩選出來(lái)呢？2.以上例子給我們?cè)诜蛛x純化微生物帶來(lái)什么啟示？

實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選，也可以應(yīng)用同樣的原理，即人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。一、選擇培養(yǎng)基1.在被石油污染的土壤中可以篩選

微生物2.在冰川凍土層可以篩選

微生物3.漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品是

生活污水嗎？

分解石油耐寒不是現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用選擇培養(yǎng)基的概念

在微生物學(xué)中，將允許

生長(zhǎng)，同時(shí)

或

其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。特定種類的微生物抑制阻止一、選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基的類型類型條件分離得到的菌種改變培養(yǎng)條件70～80℃的高溫添加某種化學(xué)物質(zhì)加入青霉素高濃度食鹽特殊碳、氮源石油是唯一碳源營(yíng)養(yǎng)缺陷不加碳源不加氮源水生棲熱菌酵母菌、霉菌等真菌金黃色葡萄球菌能消除石油污染的微生物自養(yǎng)型微生物固氮菌一、選擇培養(yǎng)基怎樣選擇出抗氨芐（biàn）青霉素能力的細(xì)菌?培養(yǎng)基中加氨芐青霉素具有抗氨芐青霉素能力的菌落沒(méi)有氨芐青霉素抗性的細(xì)菌培養(yǎng)基+氨芐青霉素培養(yǎng)基沒(méi)有抗氨芐青霉素能力的菌落被淘汰一、選擇培養(yǎng)基思考怎么證明一個(gè)選擇培養(yǎng)基具有選擇性呢？

應(yīng)該設(shè)置基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）或完全培養(yǎng)基作為對(duì)照，若基礎(chǔ)培養(yǎng)基或完全培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的菌落數(shù)菌多于該選擇培養(yǎng)基，則該選擇培養(yǎng)基具有選擇性?；A(chǔ)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基一、選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基配方的設(shè)計(jì)

尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中一種重要的氮肥。尿素施入土壤后，會(huì)被土壤中的某些細(xì)菌分解成NH3，再被轉(zhuǎn)化為NO3-、NH4+等被植物吸收。而這些細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕?，脲酶催化尿素分解產(chǎn)生NH3，NH3可以作為細(xì)菌生長(zhǎng)的氮源。

討論：1.如果讓你配制一種培養(yǎng)基，將土壤稀釋液中能分解尿素的細(xì)菌分離出來(lái)，培養(yǎng)基的配方該如何設(shè)計(jì)？2.該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點(diǎn)和不同點(diǎn)？設(shè)計(jì)一種選擇培養(yǎng)基，用尿素作為唯一氮源,可以將分解尿素的細(xì)菌分離出來(lái)。這種培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基相比，只是用尿素作為唯一氮源，培養(yǎng)基的其他營(yíng)養(yǎng)成分基本相同。思考·討論？一、選擇培養(yǎng)基牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g瓊脂20.0g蒸餾水定容到1000ml培養(yǎng)基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g瓊脂15.0g蒸餾水定容到1000ml培養(yǎng)基二2.從用途上來(lái)講，培養(yǎng)基二屬于

培養(yǎng)基，目的是為了獲得

。3.兩種培養(yǎng)基共有的培養(yǎng)基成分有：

。培養(yǎng)基一的碳源為

，氮源為

；培養(yǎng)基二的碳源為

，氮源為

。1.從物理性質(zhì)來(lái)講，兩者屬于_____培養(yǎng)基，判斷依據(jù)是__________________，

。該類培養(yǎng)基的主要用途為

。固體且比例為1.5%~2%添加了凝固劑瓊脂分離、鑒定、計(jì)數(shù)選擇能分解尿素的微生物碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水牛肉膏蛋白胨葡萄糖尿素一、選擇培養(yǎng)基1.為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加入A.較多的氮源物質(zhì)B.較多的碳源物質(zhì) C.青霉素類藥物D.高濃度食鹽2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是A.CO2和N2

B.葡萄糖和N2

C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素CD練習(xí)1g土壤中有多少能分解尿素的細(xì)菌？分離：獲得分解尿素的細(xì)菌的純培養(yǎng)物計(jì)數(shù)：測(cè)定分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量稀釋涂布平板法——將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。注意：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。稀釋涂布平板法系列梯度稀釋涂布平板二、微生物的選擇培養(yǎng)將10g土樣加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。取1mL上清液加入盛有9mL無(wú)菌水的試管中，依次等比稀釋。1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL1×1021×1031×1041×1051×1061×1079mL無(wú)菌水90mL無(wú)菌水10g①鏟取土樣，將樣品裝入紙袋中注意：取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的紙袋在使用前都要滅菌注意：移液管要經(jīng)過(guò)滅菌，并且操作應(yīng)在酒精燈火焰附近完成。二、微生物的選擇培養(yǎng)1.樣品的稀釋：2.涂布平板操作：①取0.1mL菌液滴加到培養(yǎng)基表面1×107移液槍②將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中③將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進(jìn)行涂布④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使涂布均勻二、微生物的選擇培養(yǎng)3.培養(yǎng)并觀察培養(yǎng)基菌落：

待涂布的菌液被

后，將平板

，放入30-37℃

中培養(yǎng)

d，在涂布有

菌液的平板上就可以觀察到分離的

。培養(yǎng)基吸收倒置恒溫培養(yǎng)箱1~2合適濃度單菌落恒溫培養(yǎng)箱細(xì)菌一般選用104、105、106稀釋倍數(shù)的菌液進(jìn)行涂布培養(yǎng)。

二、微生物的選擇培養(yǎng)1個(gè)不接種平板（空白對(duì)照組）三組，每組3個(gè)涂布平板（重復(fù)實(shí)驗(yàn)）

未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)很關(guān)鍵，如果無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明了什么？

未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫一段時(shí)間后，如果無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基制備成功、合格，未受到污染。二、微生物的選擇培養(yǎng)平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較二、微生物的選擇培養(yǎng)平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較二、微生物的選擇培養(yǎng)3、利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落，不可能的原因是 A.培養(yǎng)基制備過(guò)程中被雜菌污染 B.接種過(guò)程中，無(wú)菌操作不符合要求 C.系列稀釋時(shí)，無(wú)菌操作不符合要求 D.使用涂布器時(shí)涂布不均勻D練習(xí)要求:①選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證

獲得菌落數(shù)為30-300、適于計(jì)數(shù)的平板。②同一稀釋度至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求平均值；缺點(diǎn):統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)表示。①分離微生物②統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)計(jì)數(shù)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌?！驹颍寒?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落?！糠治鰧?shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，要考慮重復(fù)組結(jié)果是否接近，如果相差太大，意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。三、微生物的數(shù)量測(cè)定1：稀釋涂布平板法（間接）使用范圍

可以用來(lái)測(cè)定土壤、水、食品等樣品中的細(xì)菌、酵母菌、芽孢和孢子等的數(shù)量，但不適于測(cè)定樣品中的放線菌、絲狀真菌等絲狀體微生物的數(shù)量。三、微生物的數(shù)量測(cè)定1：稀釋涂布平板法（間接）①原理：利用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板：細(xì)菌計(jì)數(shù)板：常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。②缺點(diǎn)：a.不能區(qū)分死菌和活菌→偏大。b.不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。c.需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度。d.個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察。③優(yōu)點(diǎn)：快速、直觀三、微生物的數(shù)量測(cè)定2：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（直接）計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)室1mm0.1mm

每塊計(jì)數(shù)板由H形凹槽分為兩個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。每個(gè)計(jì)數(shù)池分為9個(gè)大方格，其中間的一大方格又稱為計(jì)數(shù)室，微生物的計(jì)數(shù)就在此大方格中進(jìn)行。

每個(gè)計(jì)數(shù)室面積1mm2，液體高度0.1mm，所含液體體積為0.1mm3。(1)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板三、微生物的數(shù)量測(cè)定2：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（直接）對(duì)樣方的計(jì)數(shù)原則是：如何統(tǒng)計(jì)結(jié)果？思考：方格內(nèi)+相鄰兩邊及頂角（取多個(gè)方格求平均值）三、微生物的數(shù)量測(cè)定2：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（直接）16個(gè)中方格25個(gè)中方格16個(gè)小方格25個(gè)小方格酵母菌細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=每個(gè)中方格平均細(xì)胞數(shù)×1610-4×稀釋倍數(shù)25酵母菌細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=每個(gè)小方格平均細(xì)胞數(shù)×40010-4×稀釋倍數(shù)三、微生物的數(shù)量測(cè)定2：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（直接）它們的區(qū)別就是計(jì)數(shù)室的高度不同，細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室的高度是0.02mm。故細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)菌的計(jì)算是：細(xì)菌細(xì)胞個(gè)數(shù)/mL=每個(gè)小方格平均細(xì)胞數(shù)×4002×10-5×稀釋倍數(shù)0.02mm3=0.02×10-3cm3=2×10-5mL血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和細(xì)菌計(jì)數(shù)板三、微生物的數(shù)量測(cè)定2：顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（直接）1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌。（2）統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣的細(xì)菌。2.實(shí)驗(yàn)原理絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分離尿素的細(xì)菌。CO(NH2)2+H2O脲酶2NH3+CO2組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL常見(jiàn)的分解尿素的微生物：芽孢桿菌、小球菌、棒狀桿菌等細(xì)菌，某些真菌和放線菌也能分解尿素。探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程（1）土壤取樣①取樣地點(diǎn)要求：

細(xì)菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長(zhǎng)。②取樣過(guò)程：

鏟去表層土（一般3cm左右）。細(xì)菌絕大部分分布在

距地表3～8cm的土壤層。③注意事項(xiàng)：

取土樣時(shí)用的鐵鏟和取樣袋在使用前都需要滅菌。操作完成后一定要洗手。（2）制備培養(yǎng)基①選擇培養(yǎng)基：以尿素為唯一氮源。組分含量葡萄糖10.0g尿素1.0gKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g瓊脂15.0g蒸餾水1000ml②牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：作為對(duì)照組，來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用。③KH2PO4和Na2HPO4的作用是：

提供無(wú)機(jī)鹽；調(diào)節(jié)pH。探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（3）樣品稀釋與取樣涂布

不同微生物在土壤中含量不同，分離不同的微生物采用不同的稀釋度，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間，適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)細(xì)菌數(shù)：一般用104、105、106稀釋液測(cè)放線菌：一般用103、104、105稀釋液測(cè)真菌數(shù)：一般用102、103、104稀釋液思考在初次實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，怎樣做才能保證從中選擇出菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？

選擇一個(gè)比較寬的范圍，將1×103～1×107倍稀釋的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)，以保證能從中選擇出菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)組別具體組別具體操作作用實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組1涂布接種的選擇培養(yǎng)基三次重復(fù)排除偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，用以分離并計(jì)數(shù)能分解尿素的細(xì)菌。實(shí)驗(yàn)組2涂布接種的選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組3涂布接種的選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組4涂布接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組4與實(shí)驗(yàn)組1、2、3組對(duì)比用以驗(yàn)證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用。對(duì)照組對(duì)照組1不涂布接種的選擇培養(yǎng)基對(duì)照組1與實(shí)驗(yàn)組1、2、3組對(duì)比用以驗(yàn)證選擇培養(yǎng)基中是否含有雜菌。對(duì)照組2不涂布接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基對(duì)照組2與實(shí)驗(yàn)組4對(duì)比用以驗(yàn)證牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中是否含有雜菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)組1、2、3分離得到尿素分解菌的單菌落；第4組得到多種菌落；對(duì)照組正常情況下無(wú)菌落。注意：本實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組設(shè)計(jì)如下：探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（3）樣品稀釋與取樣涂布（4）微生物的培養(yǎng)與觀察①培養(yǎng)條件：

不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。②觀察：

每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。（一般來(lái)說(shuō)，在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，如形狀、大小和顏色等）探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)細(xì)

菌：30～37℃培養(yǎng)1～2d放線菌：25～28℃培養(yǎng)5～7d霉

菌：25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。③計(jì)算公式:M代表稀釋倍數(shù)C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)每g樣品中的菌落數(shù)＝

(C÷V)×M例題.某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106

的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每g樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1mL)A.2.34×108

B.2.34×109

C.234

D.23.4B恰當(dāng)?shù)南♂尪?、涂布是否均勻是成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵。（4）微生物的培養(yǎng)與觀察探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1、結(jié)合對(duì)照組，分析培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落。2、你是否獲得了某一稀釋度下菌落數(shù)為30～300的平板?在這一稀釋度下，是否至少有2個(gè)平板的菌落數(shù)接近?3、你統(tǒng)計(jì)的每克土樣中能分解尿素的細(xì)菌的菌落數(shù)是多少?與其他同學(xué)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果接近嗎?如果差異很大，可能是什么原因引起的?

如果沒(méi)有接種的培養(yǎng)基上沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。如果接種后的完全培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基篩選出了一些尿素分解菌。

如果得到了兩個(gè)或多個(gè)菌落數(shù)為30～300的平板，說(shuō)明稀釋度合適，操作比較成功，能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。

如果是用同一土樣進(jìn)行的操作，數(shù)據(jù)應(yīng)該比較接近。如果差異很大，就需要從操作是否規(guī)范、培養(yǎng)基配制是否合理等方面查找原因。（5）結(jié)果分析與評(píng)價(jià)探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)4、得到的菌落一定是分解尿素的細(xì)菌嗎？不一定，還需要進(jìn)一步的鑒定5、進(jìn)一步探究——分解尿素細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定

本活動(dòng)只是初步篩選了能分解尿素的細(xì)菌,對(duì)分離的菌種進(jìn)行鑒定還需要借助生物化學(xué)的方法。你可以查閱相關(guān)資料,進(jìn)一步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)鑒定自己分離的菌種。需要用“鑒別培養(yǎng)基”探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)分解尿素細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定①原理：

細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷是否發(fā)生了該化學(xué)反應(yīng)，進(jìn)而判斷該菌是否為尿素分解細(xì)菌。CO(NH2)2+H2O2NH3

+CO2

脲酶呈堿性，遇酚紅指示劑呈

色。紅探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品(不影響微生物正常生長(zhǎng))，使微生物的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定指示劑或化學(xué)藥品發(fā)生反應(yīng)。從而達(dá)到鑒定的作用。伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌剛果紅培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌探究·實(shí)踐？土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)項(xiàng)目選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基原理加入不影響甚至促進(jìn)目標(biāo)微生物生長(zhǎng)，而抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的化學(xué)物質(zhì)加入某種指示劑或化學(xué)藥品(不影響微生物正常生長(zhǎng))，使微生物的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定指示劑或化學(xué)藥品發(fā)生反應(yīng)用途培養(yǎng)、分離出目標(biāo)微生物鑒別目標(biāo)微生物舉例培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入青霉素，抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)；利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)可分解尿素的細(xì)菌可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒定飲用水或乳制品中是否含有大腸桿菌(若有，則菌落呈黑紫色，且?guī)в薪饘俟鉂?圖示尿素分解菌大腸桿菌拓展延伸比較選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基練習(xí)4、下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的示意圖,有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)先調(diào)pH值后高壓蒸汽滅菌B.步驟③純化分解尿素的原理是將聚集的細(xì)菌分散,可以獲得單細(xì)胞菌落C.步驟③采用涂布平板法接種,并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D.步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種,比較細(xì)菌分解尿素的能力C5、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。請(qǐng)據(jù)圖分析，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是AA.③號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為103B.④號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)可能為⑤號(hào)試管的10倍C.⑤號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109D.將涂布器在酒精燈火焰上灼燒冷卻后，再進(jìn)行涂布練習(xí)7、某同學(xué)將1mL土壤樣液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58。下列敘述錯(cuò)誤的是A.可得出土壤樣液中活菌大約為5.7×107個(gè)/LB.此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的活菌數(shù)目低C.一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是稀釋液中的活菌數(shù)D6、下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48hD.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D練習(xí)課堂小結(jié)微生物的數(shù)量測(cè)定選擇培養(yǎng)基的作用微生物選擇培養(yǎng)獲取純培養(yǎng)物的方法-稀釋涂布平板法微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)選擇培養(yǎng)基微生物的選擇培養(yǎng)科學(xué)實(shí)例篩選原則選擇培養(yǎng)基的概念及舉例稀釋涂布平板法的操作過(guò)程間接計(jì)數(shù)法—稀釋涂布平板法直接計(jì)數(shù)—計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的制備實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（1）土壤取樣（2）樣品的稀釋（3）稀釋涂布平板法接種（4）微生物的培養(yǎng)與觀察實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)概念檢測(cè)1.研究人員用無(wú)機(jī)鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌。判斷下列相關(guān)表述是否正確。（1）這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基。（2）利用這種石油降解菌可以降解石油。修復(fù)土壤。（3）相對(duì)于未被污染的土壤,從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌。2.用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí)，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中的活菌數(shù),原因是A.菌落中的細(xì)菌數(shù)目是固定的B.平板上的一個(gè)菌落就是一個(gè)細(xì)菌C.通過(guò)此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)與活菌的實(shí)際數(shù)目相同D.平板上的一個(gè)菌落一般來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌√√√D拓展應(yīng)用1.反芻（chú）動(dòng)物，如牛和羊具有特殊的器官一瘤胃。在瘤胃中生活著多種微生物，其中許多微生物能分解尿素。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)從瘤胃中分離出能夠分解尿素的微生物。

反芻動(dòng)物的瘤胃中有大量的微生物，其中就有分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會(huì)死亡，因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基，還應(yīng)該參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。拓展