高考生物二輪復(fù)習(xí)一鼠到底以小鼠為例相關(guān)工程復(fù)習(xí)（動物細胞胚胎工程基因工程蛋白質(zhì)工程）

專題五生物技術(shù)與工程一“鼠”到底背景介紹鼠哺乳動物體型小、易飼養(yǎng)；性成熟早，繁殖力強；對外界環(huán)境反應(yīng)敏感；生理特征、形態(tài)和基因等方面上比較接近人類；

鼠+動物細胞工程&胚胎工程&基因工程人鼠細胞融合實驗、單克隆抗體——動物細胞融合小鼠成纖維細胞誘導(dǎo)iPS細胞孤雌、孤雄小鼠——動物細胞融合&胚胎工程轉(zhuǎn)基因小鼠——基因工程人鼠嵌合抗體——蛋白質(zhì)工程

考點歸納動物細胞工程人鼠細胞融合實驗單克隆抗體；誘導(dǎo)iPS細胞孤雌、孤雄小鼠

原理：細胞膜具有流動性

融合方法？動物細胞工程動物細胞融合技術(shù)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

物理方法：電融合法、離心法

化學(xué)方法：聚乙二醇融合法、

高Ca2+-高pH融合法誘導(dǎo)動物細胞融合

物理方法：電融合法

化學(xué)方法：聚乙二醇（PEG）融合法生物方法：滅活的病毒誘導(dǎo)法滅活：用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞病毒抗原結(jié)構(gòu)。兩親本細胞的細胞核逐漸融合病毒吸附在細胞表面并使細胞凝集兩親本細胞膜上磷脂和蛋白質(zhì)重新排布，細胞膜打開細胞膜連接誘導(dǎo)細胞融合的原理注射特定抗原免疫小鼠培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞骨髓瘤細胞多種細胞多種雜交瘤細胞能分泌所需抗體的雜交瘤細胞選擇培養(yǎng)基篩選克隆化培養(yǎng)抗體檢測注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖體外培養(yǎng)單克隆抗體融合用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選∶在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。動物細胞工程iPS細胞(誘導(dǎo)多能干細胞)的培養(yǎng)和應(yīng)用將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細胞用小分子化合物誘導(dǎo)形成①獲取方法：iPS細胞最初是由小鼠成纖維細胞轉(zhuǎn)化而來的，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細胞。②誘導(dǎo)多能干細胞優(yōu)點：A.誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎。

B.iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細胞動物細胞工程隨堂檢測小鼠減數(shù)分裂過程的特點為：雌性哺乳動物的減數(shù)分裂過程是不連續(xù)的，且多數(shù)動物的第一極體不進行減數(shù)第二次分裂。通常只有受精時才激活次級卵母細胞完成減數(shù)第二次分裂應(yīng)用用來自減數(shù)分裂Ⅱ期兩個不同階段的小鼠卵細胞誘導(dǎo)融合，并促使其分裂，發(fā)育，從得到的胚胎中分離出干細胞（ES細胞）細胞培養(yǎng)+核移植D隨堂檢測C隨堂檢測細胞培養(yǎng)+胚胎工程胚胎工程體外受精早期胚胎發(fā)育受體雌鼠(代孕)精子卵子胚胎移植受精卵早期胚胎鼠卵母細胞的采集和培養(yǎng)精子的采集和獲能3.受精4.早期胚胎培養(yǎng)精子在進行體外受精前需要精子獲能處理采集后的卵母細胞都要在體外經(jīng)過人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精。以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力適當?shù)呐囵B(yǎng)液意義：提高動物繁殖能力的有效措施；還可以為胚胎移植提供可用的胚胎。胚胎工程——體外受精遺傳性狀優(yōu)良供體母鼠健康的體質(zhì)、正常的繁殖能力受體母鼠

多種激素同期發(fā)情處理促性腺激素超數(shù)排卵供體公牛發(fā)情配種或人工授精收集胚胎并檢查胚胎移植妊娠檢查分娩（胚胎移植的犢牛）①該過程中

次使用激素：②該過程中的

次檢查：③胚胎移植成功與否要有兩個條件：第一次對受、供體進行同期發(fā)情處理；第二次用于供體的超數(shù)排卵。第一次對收集的胚胎進行檢查；第二次對受體母牛是否妊娠進行檢查。胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進行。進行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。胚胎工程——胚胎移植概念：采用機械方法將早期胚胎切割成2等份，4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。理論基礎(chǔ)：主要儀器設(shè)備：特點：選擇的胚胎：體視顯微鏡和顯微操作儀發(fā)育良好的，形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。動物胚胎細胞的全能性。胚胎工程——胚胎分割分割針或分割刀。基因工程轉(zhuǎn)基因動物：通過實驗手段將外源基因?qū)氲绞芫鸦蛟缙谂咛ゼ毎凶罱K可以獲得能穩(wěn)定遺傳并表達的動物。目的基因的篩選與獲取基因表達載體的構(gòu)建目的基因的檢測與鑒定將目的基因?qū)胧荏w細胞第一步第二步第三步第四步將目的基因?qū)雱游锛毎@微注射法基因工程藥用蛋白基因乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件基因表達載體顯微注射受精卵泌乳期分泌乳汁轉(zhuǎn)基因動物藥物發(fā)育A.動物泌乳期有間隔B.有些蛋白不能在乳腺里表達C.某些蛋白在乳腺中的修飾可能與天然狀態(tài)不同A.乳腺是天然的高效合成蛋白質(zhì)的器官，

適合于表達高等動物體內(nèi)的復(fù)雜蛋白B.制備乳腺反應(yīng)器的方法成熟C.重組蛋白的提取和純化相對容易膀胱生物反應(yīng)器1．科學(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。下列說法正確的是(

)A．將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,可以用感受態(tài)細胞法B．人的生長激素基因只存在于在小鼠的膀胱上皮細胞中C．進行基因轉(zhuǎn)移時,要將目的基因轉(zhuǎn)入小鼠受精卵中D．采用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否插入了小鼠的基因組C隨堂檢測蛋白質(zhì)工程：以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。

①基礎(chǔ)：___________________________________

②實質(zhì)：___________________________________

③操作對象：_______________________________

④目的：__________________________________

⑤地位：___________________________________

⑥理論和技術(shù)：_____________________________蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系改造或合成基因，定向改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造新的蛋白質(zhì)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足生產(chǎn)生活需求在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程基因分子生物學(xué)、晶體學(xué)和計算機技術(shù)蛋白質(zhì)工程降低人對小鼠單克隆抗體的免疫反應(yīng)

通過_______，將小鼠抗體上______的區(qū)域（即_____）“嫁接”到_______（即_____）上，經(jīng)過這樣改造的抗體__________________________________；改造基因結(jié)合抗原可變