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文檔簡介

實驗七、理化因素對微生物生長的影響實驗目的1、學習和掌握研究理化因素對微生物生長的影響2、學習和掌握利用濁度法測量微生物生長的方法；3、了解不同pH對大腸桿菌生長的影響。研究方法：利用液體培養(yǎng)——定量測定生長量定量測定微生物生長量的常用方法濁度法重量法顯微鏡直接計數(shù)法菌落計數(shù)法濁度法原理：在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細胞濃度與混濁度成正比，即與光吸收值(OD)成正比，菌數(shù)越多，OD越大。因此，借助于分光光度計，在一定波長下測定菌懸液的OD，就可反應出菌液的濃度。測定方法：測定細胞培養(yǎng)物在600nm光吸收優(yōu)缺點適應范圍：單細胞無分支的微生物生長的測定注意事項：特點：快速、簡便；但易受干擾。重量法原理：將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離出來,然后烘干至恒重(干燥溫度可采用105℃、100℃或80℃)、稱重。優(yōu)缺點：快速、簡便；但易受干擾。適應范圍：絲狀微生物生長的測定測定方法干重法濕重法注意事項顯微鏡直接計數(shù)法不足：不能區(qū)分死細胞和活細胞，應用范圍較窄一些小的細胞在顯微鏡下很難看到；樣品中菌液濃度不能低于106個/mL不能用于菌絲體或呈鏈狀而不分散的微生物測定。

優(yōu)點：簡單、快速；重復性高平板菌落計數(shù)法優(yōu)點靈敏度高可以區(qū)分死活細胞應用廣食品、飲料等微生物檢查消毒滅菌效果檢查不足測定的結(jié)果誤差也較大。操作也比較煩瑣需要的時間較長實驗操作步驟配制牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基（每組500mL）分裝于6個三角瓶中（50mL/瓶）將上述培養(yǎng)基中pH分別調(diào)到3、5、7、9、11、13（每種樣品留出10ml以作空白）包扎121度滅菌20分鐘，冷卻接種（0.5ml/瓶大腸桿菌過夜培養(yǎng)物）37度恒溫震蕩培養(yǎng)24小時，測定光吸收值（OD600)實驗報告要求格式：按照正式發(fā)表論文格式題目：環(huán)境中四大類細胞型微生物的分離和生物學性質(zhì)研究作者，學號摘要：主要方法和和主要結(jié)果前言（為什么要進行該實驗，要達到什么目的等）實驗方法（培養(yǎng)基配制、采樣、分離、純化、性質(zhì)研究（菌株形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察、大小測定、生理生化實驗、環(huán)境因素影響等）實驗結(jié)果：分離實驗結(jié)果、形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特征觀察結(jié)果、初步鑒

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