CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細胞中表達的初步研究的開題報告

CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細胞中表達的初步研究的開題報告題目：CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細胞中表達的初步研究背景：干細胞是一類能夠自我更新和分化為多種細胞類型的細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）是一類具有多潛能的成體干細胞，廣泛應用于組織工程、再生醫(yī)學、治療等領域。BMSCs的遷移和定向分化對其應用具有重要意義，而CXCR4基因編碼的CXCR4受體是遷移與分化的重要調(diào)節(jié)因子，對BMSCs的某些特定性狀具有調(diào)節(jié)作用，因此對CXCR4基因在BMSCs中的研究具有重要意義。研究目的：本研究的目的是利用基因合成技術合成CXCR4基因，并將其轉染到兔BMSCs中，探究CXCR4基因在細胞中的表達以及對細胞特性的影響。研究內(nèi)容：1.合成CXCR4基因的序列設計和合成；2.構建CXCR4基因轉染載體并制備合適的細胞培養(yǎng)基；3.將CXCR4基因轉染至兔BMSCs中；4.篩選轉染成功的兔BMSCs細胞株；5.檢測CXCR4基因在BMSCs中的表達情況；6.觀察CXCR4基因?qū)MSCs細胞特性的影響。研究意義：1.本研究可為進一步研究CXCR4基因在BMSCs中作用機制提供實驗基礎；2.CXCR4基因?qū)毎只瓦w移的調(diào)控作用已被廣泛研究，本研究有望為BMSCs的組織工程、再生醫(yī)學、治療等領域的研究提供新思路和方法；3.本研究為治療相關疾病提供了潛在的治療靶點。研究方法：1.PCR技術用于合成CXCR4基因的序列設計與合成；2.質(zhì)粒構建和NucleoplasmidMaxiKit大量提取質(zhì)粒DN；3.選用適當比例的Lipofectamine2000試劑和DNA轉染BMSCs細胞；4.Westernblot和RT-PCR等方法檢測CXCR4基因的表達情況；5.細胞增殖、分化和遷移的初步實驗。預期結果：1.成功合成CXCR4基因，并成功將其轉染至BMSCs細胞中；2.檢測到CXCR4基因在BMSCs中的表達情況；3.CXCR4基因的表達對BMSCs的增殖、分化和遷移產(chǎn)生了影響。研究進度：1.初步設計所需的CXCR4基因序列已完成，正在合成中；2.構建轉染載體的設計已完成，正在制備中；3.BMSCs細胞的培養(yǎng)和轉染已經(jīng)開始，正在篩選轉染成功的細胞株；4.CXCR4基因表達情況的檢測和細胞生物學特征的觀察正在進行中。參考文獻：1.WuQ,YangB,HuK,etal.CXCR4overexpressioningliomas:acriticalroleincellproliferationandinvasion.IntJCancer.2012;131(7):E1031-E1040.2.SalcedoR,ZhangX,YoungHA,etal.AngiogeniceffectsofprostaglandinE2aremediatedbyup-regulationofCXCR4onhumanmicrovascularendothelialcells.Blood.2003;102(5):1966-1977.3.WangZ,DengZ,ZhuG,etal.TargetingMUC1-Cinhibitstheproliferationandstemnessofesop