CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)的初步研究的開(kāi)題報(bào)告

CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)的初步研究的開(kāi)題報(bào)告題目：CXCR4基因合成及其在兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)的初步研究背景：干細(xì)胞是一類能夠自我更新和分化為多種細(xì)胞類型的細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）是一類具有多潛能的成體干細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于組織工程、再生醫(yī)學(xué)、治療等領(lǐng)域。BMSCs的遷移和定向分化對(duì)其應(yīng)用具有重要意義，而CXCR4基因編碼的CXCR4受體是遷移與分化的重要調(diào)節(jié)因子，對(duì)BMSCs的某些特定性狀具有調(diào)節(jié)作用，因此對(duì)CXCR4基因在BMSCs中的研究具有重要意義。研究目的：本研究的目的是利用基因合成技術(shù)合成CXCR4基因，并將其轉(zhuǎn)染到兔BMSCs中，探究CXCR4基因在細(xì)胞中的表達(dá)以及對(duì)細(xì)胞特性的影響。研究?jī)?nèi)容：1.合成CXCR4基因的序列設(shè)計(jì)和合成；2.構(gòu)建CXCR4基因轉(zhuǎn)染載體并制備合適的細(xì)胞培養(yǎng)基；3.將CXCR4基因轉(zhuǎn)染至兔BMSCs中；4.篩選轉(zhuǎn)染成功的兔BMSCs細(xì)胞株；5.檢測(cè)CXCR4基因在BMSCs中的表達(dá)情況；6.觀察CXCR4基因?qū)MSCs細(xì)胞特性的影響。研究意義：1.本研究可為進(jìn)一步研究CXCR4基因在BMSCs中作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)；2.CXCR4基因?qū)?xì)胞分化和遷移的調(diào)控作用已被廣泛研究，本研究有望為BMSCs的組織工程、再生醫(yī)學(xué)、治療等領(lǐng)域的研究提供新思路和方法；3.本研究為治療相關(guān)疾病提供了潛在的治療靶點(diǎn)。研究方法：1.PCR技術(shù)用于合成CXCR4基因的序列設(shè)計(jì)與合成；2.質(zhì)粒構(gòu)建和NucleoplasmidMaxiKit大量提取質(zhì)粒DN；3.選用適當(dāng)比例的Lipofectamine2000試劑和DNA轉(zhuǎn)染BMSCs細(xì)胞；4.Westernblot和RT-PCR等方法檢測(cè)CXCR4基因的表達(dá)情況；5.細(xì)胞增殖、分化和遷移的初步實(shí)驗(yàn)。預(yù)期結(jié)果：1.成功合成CXCR4基因，并成功將其轉(zhuǎn)染至BMSCs細(xì)胞中；2.檢測(cè)到CXCR4基因在BMSCs中的表達(dá)情況；3.CXCR4基因的表達(dá)對(duì)BMSCs的增殖、分化和遷移產(chǎn)生了影響。研究進(jìn)度：1.初步設(shè)計(jì)所需的CXCR4基因序列已完成，正在合成中；2.構(gòu)建轉(zhuǎn)染載體的設(shè)計(jì)已完成，正在制備中；3.BMSCs細(xì)胞的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染已經(jīng)開(kāi)始，正在篩選轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞株；4.CXCR4基因表達(dá)情況的檢測(cè)和細(xì)胞生物學(xué)特征的觀察正在進(jìn)行中。參考文獻(xiàn)：1.WuQ,YangB,HuK,etal.CXCR4overexpressioningliomas:acriticalroleincellproliferationandinvasion.IntJCancer.2012;131(7):E1031-E1040.2.SalcedoR,ZhangX,YoungHA,etal.AngiogeniceffectsofprostaglandinE2aremediatedbyup-regulationofCXCR4onhumanmicrovascularendothelialcells.Blood.2003;102(5):1966-1977.3.WangZ,DengZ,ZhuG,etal.TargetingMUC1-Cinhibitstheproliferationandstemnessofesop