Decoy核酸在LNCaP細胞中作用機制研究的開題報告

Decoy核酸在LNCaP細胞中作用機制研究的開題報告標題：Decoy核酸在LNCaP細胞中作用機制研究背景概述：前列腺癌（PCa）是男性最常見的癌癥之一，而雄激素（如睪酮）在其生長和轉(zhuǎn)移中扮演了重要角色。在激素正常作用下，激素受體（如AR）結(jié)合激素響應(yīng)元件（如ARE）啟動有關(guān)的基因表達，但過度活化的AR和ARE會促進PCa的生長發(fā)展。因此，必須探討一些方法來解決PCa的問題。Decoy核酸作為一種新型的治療方法，其富含ARE序列，它可以結(jié)合活化的AR并抑制其結(jié)合到基因啟動子ARE區(qū)域上，從而去除ARE的活化信號。研究目的：研究Decoy核酸在LNCaP細胞中的作用機制，探究治療PCa的新型治療方法。研究內(nèi)容：1.構(gòu)建Decoy核酸表達載體；2.將載體轉(zhuǎn)化到LNCaP細胞中；3.通過Westernblotting和RT-qPCR技術(shù)檢測AR和其下游基因的表達水平；4.通過轉(zhuǎn)錄因子活性酶報告基因系統(tǒng)檢測AR的轉(zhuǎn)錄因子活性。研究意義：1.Decoy核酸作為新型療法，在治療PCa中具有潛在優(yōu)勢；2.研究LNCaP細胞中Decoy核酸作用機制，將為治療PCa提供理論依據(jù)；3.該研究可為研制PCa的新型治療藥物提供有益信息。研究方法：1.構(gòu)建Decoy核酸表達載體：利用合成DNA并進行PCR擴增得到核酸片段，構(gòu)建進表達載體中；2.將載體轉(zhuǎn)化到LNCaP細胞中：通過轉(zhuǎn)染實現(xiàn)載體的轉(zhuǎn)化；3.通過Westernblotting和RT-qPCR技術(shù)檢測AR和其下游基因的表達水平：檢測細胞中AR和下游基因的蛋白和mRNA表達；4.通過轉(zhuǎn)錄因子活性酶報告基因系統(tǒng)檢測AR的轉(zhuǎn)錄因子活性：采用轉(zhuǎn)錄因子活性酶報告基因系統(tǒng)檢測AR的轉(zhuǎn)錄活性。研究預(yù)期結(jié)果：1.成功構(gòu)建Decoy核酸表達載體；2.成功將載體轉(zhuǎn)化到LNCaP細胞中，并表達Decoy核酸；3.通過Westernblotting和RT-qPCR技術(shù)檢測AR和其下游基因的表達水平，表明Decoy核酸可以抑制AR的活性；4.成功檢測AR的轉(zhuǎn)錄因子活性變化，探究Decoy核酸在LNCaP細胞中的具體作用機制。參考文獻：1.HuangJ,YaoJL,ZhangL,etal.Thesignificanceofinsulin-likegrowthfactor1receptorandmatrixmetalloproteinase9inpatientswithprostatecancer.MolMedRep,2015,12(5):6761-6767.2.ShiotaM,YokomizoA,TakeuchiA,etal.Inhibitionofconstitutivelyactiveformsofmutantandrogenreceptorsbydecoymolecules.UrologicalScience,2016,27(3):181-186.3.ZhangQ,WangJ,ZhangW,etal.RoleofFOXQ1inregulatingandrogenreceptorsig