2.2.(1)動物細胞工程動物細胞培養(yǎng)課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

從社會中來

第一塊人工合成皮膚是由白克和亞諾斯發(fā)明的，這兩位科學(xué)家利用鯊魚軟骨和來自牛皮中的膠原蛋白為原料發(fā)明了一種人造皮膚。在1981年，白克和亞諾斯第一次將其發(fā)明的人造皮膚用于臨床，患者是一位身體一半面積被燒傷的女士。剝離掉燒傷的皮膚之后，白克應(yīng)用了一層人造皮膚，并且，在條件允許的情況下，將患者的未燒傷皮膚移植到燒傷部位。三星期過后，這位女性患者新生皮膚的生長速度驚人，并且顏色與未燒傷皮膚一樣。在此基礎(chǔ)上的改進產(chǎn)品稱為integra人造皮膚，它不僅起著臨時性替代功能，并且可以刺激毛細血管、成纖維細胞和巨噬細胞等逐漸從傷口向人造皮膚內(nèi)生長。從社會中來在治療大面積燒傷時，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植。但對這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且會產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。那么，怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚？能不能用自體皮膚的單個細胞培養(yǎng)出可供移植的皮膚？通過細胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚

可以從病人身上取少量正常、健康的皮膚在體外進行培養(yǎng)、擴增。

目前，科學(xué)家還在研究對皮膚干細胞進行培養(yǎng)，以獲得適合臨床上使用的人造皮膚。動物細胞培養(yǎng)動物細胞核移植動物細胞融合其它動物細胞工程的基礎(chǔ)生產(chǎn)單克隆抗體動物細胞工程常用技術(shù)什么是動物細胞培養(yǎng)？為什么要進行動物細胞培養(yǎng)？怎樣進行動物細胞的培養(yǎng)？第二章細胞工程第2節(jié)動物細胞工程第1課時

動物細胞培養(yǎng)選必三P43授課教師：XXX一、動物細胞培養(yǎng)的條件二、動物細胞培養(yǎng)的過程動物細胞培養(yǎng)1.概念動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成___________，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和_______的技術(shù)。單個細胞增殖2.目的：獲得細胞或細胞產(chǎn)物；不能獲得完整動物個體。3.原理：細胞增殖（有絲分裂）回顧：植物組織培養(yǎng)的原理是：細胞的全能性4.地位：其他動物細胞工程的基礎(chǔ)5.實例：人造皮膚（1）生物制品：酶、生長因子、疫苗、單克隆抗體等（2）進行有毒物質(zhì)和藥物的檢測（3）臨床治療：人工皮膚等（4）生物學(xué)基礎(chǔ)研究：細胞全能性的揭示、細胞周期及調(diào)控、癌變機理及細胞衰老的研究動物細胞培養(yǎng)6.意義一、動物細胞培養(yǎng)的條件動物細胞培養(yǎng)的條件營養(yǎng)條件其他條件無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等一、動物細胞培養(yǎng)的條件1.營養(yǎng)

將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)（糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等）按種類和所需量嚴格配制的培養(yǎng)基。（1）培養(yǎng)基構(gòu)成：合成培養(yǎng)基血清等一些天然成分＋合成培養(yǎng)基：血清等一些天然成分：含有尚未研究清楚的細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)（2）培養(yǎng)基類型：液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）【思考】動物細胞培養(yǎng)為什么需要加血清？血清可提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境，其中還含有必需氨基酸、激素、酶、多種未知的促細胞生長/貼附因子等多種活性物質(zhì)，可促進細胞生長和增殖。一、動物細胞培養(yǎng)的條件2.

無菌、無毒的環(huán)境（1）具體操作：①對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理。②在無菌環(huán)境下進行操作。③培養(yǎng)液需要定期更換：營養(yǎng)物質(zhì)被耗盡；清除代謝物，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。（2）需要無菌、無毒的環(huán)境的原因？一、動物細胞培養(yǎng)的條件3.

溫度、pH和滲透壓（1）適宜的溫度：哺乳動物細胞培養(yǎng)的溫度多以___________為宜；36.5±0.5℃（2）適宜的pH：多數(shù)動物細胞生存的適宜pH為________（3）適宜的滲透壓：目的________________________。維持細胞正常的形態(tài)和功能一、動物細胞培養(yǎng)的條件4.

氣體環(huán)境（1）動物細胞培養(yǎng)所需的主要氣體組成及作用：O2：CO2：細胞代謝所必需維持培養(yǎng)液的pH（2）具體操作：在進行細胞培養(yǎng)時，通常采用_________或_____________。置于含有______空氣和_____CO2的混合氣體的____________中進行培養(yǎng)。培養(yǎng)皿松蓋培養(yǎng)瓶95%5%CO2培養(yǎng)箱二、動物細胞培養(yǎng)的過程閱讀教材44-45頁，思考以下問題:1、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？2、為什么將取出的組織分散成單個細胞？3、如何將組織分散成單個細胞？4、細胞培養(yǎng)用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶可以嗎？5、胰蛋白酶會把細胞消化掉嗎？若不會，為什么？若會，怎么控制？6、大多數(shù)動物細胞的生長特性7、什么是原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)？8、10代以內(nèi)的細胞的遺傳物質(zhì)有何特點？10代以后的？二、動物細胞培養(yǎng)的過程1.

取動物組織（1）取材:一般取材于動物胚胎或幼齡動物的組織、器官。（2）取材原因:細胞分化程度低，增殖能力強，容易培養(yǎng)（1）將組織分散成單個細胞①方法:機械法、用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時間②原因:Ⅰ.從動物體取出的成塊組織中，細胞與細胞靠在一起，彼此限制了生長和增殖；Ⅱ.能使細胞與培養(yǎng)液充分接觸，更易進行物質(zhì)交換。（2）用培養(yǎng)液將細胞制成細胞懸液。2.

制成細胞懸液【P44旁欄思考題】進行動物細胞培養(yǎng)時常用胰蛋白酶分散細胞，這說明細胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？

用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。在細胞培養(yǎng)中使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。處理過度的話，會把細胞消化掉，所以使用時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷?！舅伎肌恳鹊鞍酌笗鸭毎魡?？若不會，為什么？若會，怎么控制？二、動物細胞培養(yǎng)的過程3.

原代培養(yǎng)當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞通常會停止分裂增殖。（1）操作方法：將細胞懸液放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。（2）體外培養(yǎng)的動物細胞類型①懸浮生長類：能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖。會因細胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻。②貼壁生長類：需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖（細胞貼壁），大多數(shù)細胞屬于此類。除受密度、有害代謝物、營養(yǎng)物質(zhì)影響外，還會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。接觸抑制：要求：培養(yǎng)瓶（皿）內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。細胞貼壁：大多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞需要______________________才能生長增殖，這類細胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的_____上，這種現(xiàn)象稱為細胞貼壁.貼附于某些基質(zhì)表面瓶壁資料：動物細胞生長特性癌細胞細胞膜上糖蛋白減少，細胞的黏著性降低，在適宜的條件下可以無限增殖，因此培養(yǎng)的癌細胞無接觸抑制現(xiàn)象，在培養(yǎng)瓶中能夠生長成多層。【思考】根據(jù)癌細胞的特點，思考一下培養(yǎng)的癌細胞有沒有接觸抑制現(xiàn)象？【思考】動物細胞培養(yǎng)過程中有接觸抑制現(xiàn)象，這一現(xiàn)象說明了細胞膜具有什么功能？細胞膜接受信息后，細胞停止分裂又說明了什么？細胞培養(yǎng)過程中的接觸抑制說明了細胞膜能進行細胞間的信息交流。細胞膜接受信息后，細胞停止分裂，說明了細胞膜接受的信息能夠傳遞到細胞核

。接觸抑制：當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖。4.

分瓶、進行傳代培養(yǎng)二、動物細胞培養(yǎng)的過程（1）需分瓶進行傳代培養(yǎng)的原因：

懸浮培養(yǎng)的細胞會因細胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)等因素而分裂受阻，貼壁細胞在生長增殖時，除受上述因素影響外，還會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象（2）方法：①收集細胞a.懸浮生長類：直接用_________收集離心法b.貼壁生長類：重新用_____________等處理，使之分散成單個細胞，然后再用_________收集胰蛋白酶②將收集的細胞制成細胞懸液，分瓶培養(yǎng)離心法通常將__________的細胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)處理后的____________稱為原代培養(yǎng)。（10代內(nèi)）傳代培養(yǎng)：當(dāng)原代培養(yǎng)的細胞生長停止，這時如果要使細胞繼續(xù)生長，就要及時用胰蛋白酶等，使細胞從瓶壁上解離下來，然后加入新的培養(yǎng)液，將細胞分離稀釋，并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)的過程。將_________的細胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。（10代后）重要名詞解釋分瓶前初次培養(yǎng)分瓶后分瓶培養(yǎng)10代細胞50代細胞無限增殖10代內(nèi)：保持細胞正常二倍體核型10-50代：部分細胞核型改變50代后：遺傳物質(zhì)改變突破細胞壽限危機1危機2培養(yǎng)危機：原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)（遺傳物質(zhì)沒改變）（有的細胞遺傳物質(zhì)改變）拓展

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，將這種能傳到40-50代的細胞篩選出來進行傳代培養(yǎng)。這種傳代細胞為細胞株（遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化）。

細胞系：細胞株傳代至40~50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去。這種傳代細胞為細胞系。拓展細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。區(qū)別：

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：傳到40-50代后有部分細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去。細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。拓展細胞懸浮液細胞株10代細胞50代細胞細胞系無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)遺傳物質(zhì)改變原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細胞株、細胞系四者之間的關(guān)系拓展▲注意（1）傳代培養(yǎng)的細胞在傳到50代后，少部分細胞會克服細胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細胞已經(jīng)發(fā)生了突變，正在朝著等同于癌細胞的方向發(fā)展。（2）癌細胞失去了接觸抑制現(xiàn)象，可以在培養(yǎng)瓶中形成多層細胞。（3）目前用于冷凍保存的正常細胞通常為10代以內(nèi)的細胞，以保持細胞正常的二倍體核型(遺傳物質(zhì)沒變)。取動物組織制成細胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)分瓶進行傳代培養(yǎng)取動物組織制成細胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)傳代培養(yǎng)放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細胞貼壁接觸抑制二、動物細胞培養(yǎng)的過程1．幼齡動物的細胞與老齡動物的細胞比較，分化程度低的細胞與分化程度高的細胞比較，哪些細胞更易于培養(yǎng)？為什么？細胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動物的細胞增殖能力強，有絲分裂旺盛，老齡動物的細胞則相反。所以，一般來說，幼齡動物的細胞比老齡動物的細胞生命力更旺盛，易于培養(yǎng)。同樣，分化程度越低的細胞，增殖能力越強，越容易培養(yǎng)。選必三P45思考·討論：有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題2．動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有什么相同和不同之處？可以從培養(yǎng)的原理，所需的營養(yǎng)條件、環(huán)境條件以及培養(yǎng)的過程等方面進行分析比較。植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)前處理取材培養(yǎng)基的物理性質(zhì)培養(yǎng)基的成分特有成分植物細胞的全能性細胞增殖離體用機械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶將組織細胞分散開離體植物器官、組織、細胞動物胚胎或幼齡動物的組織、器官固體液體(又稱培養(yǎng)液)有機營養(yǎng)成分、無機營養(yǎng)成分、植物激素糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)及一些天然成分如血清植物激素血清植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)特殊環(huán)境條件結(jié)果是否體現(xiàn)細胞的全能性過程相同點脫分化避光、再分化需光氣體環(huán)境一般獲得新的植株獲得大量細胞是否①培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂，不涉及減數(shù)分裂；②均需無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件。外植體脫分化愈傷組織再分化芽、根幼苗完整植株移栽成活取動物組織制成細胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)分瓶進行傳代培養(yǎng)▲注意(1)植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個體，體現(xiàn)了細胞的全能性；動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細胞，不形成新個體，故不能體現(xiàn)細胞的全能性。(2)動物細胞培養(yǎng)一般不需經(jīng)過脫分化過程，因為高度分化的動物細胞全能性變小，基本失去發(fā)育成完整個體的能力。要想使培養(yǎng)的動物細胞定向分化，通常定向誘導(dǎo)動物干細胞，使其分化成所需要的組織或器官。隨堂練習(xí)

1.下列屬于動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是()A．動物細胞培養(yǎng)基與植物細胞培養(yǎng)基的成分有所不同B．動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行C．動物細胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能D．植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細胞的全能性A提示：動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分不同，如培養(yǎng)動物細胞的培養(yǎng)基需加入血清，而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基則不需加入血清；動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無菌、人工控制的條件下進行；動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過程中都可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變；植物組織培養(yǎng)最終能夠形成完整的植物體，能體現(xiàn)植物細胞的全能性，動物細胞最終不能被培養(yǎng)成新的動物，不能體現(xiàn)動物細胞的全能性。取動物組織制成細胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液進行原代培養(yǎng)分瓶進行傳代培養(yǎng)動物胚胎、幼齡動物機械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理將組織分散成單個細胞用培養(yǎng)液將細胞制成細胞懸液一類細胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖大多數(shù)需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖直接用離心法收集重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個細胞，然后再用離心法收集回顧動物細胞培養(yǎng)的過程：第二章細胞工程第1節(jié)動物細胞工程第1課時

動物細胞培養(yǎng)選必三P46授課教師：XXX三、干細胞培養(yǎng)以及應(yīng)用1.概念：三、干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用動物和人體內(nèi)仍保留的少數(shù)具有分裂和分化能力的細胞。在一定條件下，干細胞可以分化成其他類型的細胞。2.分布：干細胞存在于____________、_______和_________等多種組織和器官中。早期胚胎骨髓臍帶血3.類型：

存在或來源功能及應(yīng)用胚胎干細胞(ES細胞)成體干細胞誘導(dǎo)多能干細胞(iPS細胞)閱讀P46-47，完成下列表格。早期胚胎能夠分化成為動物體內(nèi)的任何細胞，并進一步形成組織、器官甚至生物個體成體組織或器官，包括骨髓中的造血干細胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細胞和睪丸中的造血干細胞。具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體的潛能。體外誘導(dǎo)體細胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細胞，用于治療疾病。誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎，可避免免疫排斥反應(yīng)。ES細胞在體外分化成心肌細胞、神經(jīng)元細胞和造血干細胞等造血干細胞是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多、應(yīng)用最為成熟的一類成體干細胞，主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中?？茖W(xué)家普遍認為iPS細胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細胞。4.應(yīng)用：三、干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病（如帕金森病、阿爾茨海默病等）治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病有著自我更新能力及分化潛能的干細胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。（1）應(yīng)用原理：（2）應(yīng)用實例：造血干細胞：神經(jīng)干細胞：干細胞將在再生醫(yī)學(xué)、藥物安全性與有效性檢測等領(lǐng)域發(fā)揮大作用。（3）面臨的問題：存在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的風(fēng)險（4）應(yīng)用展望：5.

誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）三、干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用（1）胚胎干細胞的局限性：胚胎干細胞必須從_______中獲取，涉及倫理問題，因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。胚胎倫理問題（2）誘導(dǎo)多能干細胞概念：通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，稱為誘導(dǎo)多能干細胞，簡稱iPS細胞。誘導(dǎo)方法：①將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細胞。②用小分子化合物誘導(dǎo)形成。（3）誘導(dǎo)多能干細胞優(yōu)點：①誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎；②iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。（成纖維細胞以及已分化的T細胞、B細胞、）5.

誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）三、干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用移植取成纖維細胞等iPS細胞轉(zhuǎn)入相關(guān)因子細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化分化胰島細胞神經(jīng)元血細胞腸上皮細胞心肌細胞肝細胞病人iPS細胞用于治療人類疾病示意圖（4）誘導(dǎo)多能干細胞的應(yīng)用：

可治療鐮狀細胞貧血癥，在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進展?！舅伎肌空T導(dǎo)多能干細胞用于治療人類的某些頑癥的原理是什么？誘導(dǎo)多能干細胞類似胚胎干細胞，可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細胞，經(jīng)移植可使壞死或退化部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。【思考】誘導(dǎo)多能干細胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？通過干細胞體外誘導(dǎo)分化，可以培育出人造器官，從而解決供體器官不足的問題。另一方面，由于是自身細胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的，所以無免疫排斥反應(yīng)。隨堂練習(xí)1.判斷對錯(1)制備肝細胞懸液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶處理。()(2)培養(yǎng)動物細胞的第一代(即第一次細胞增殖)被稱為原代培養(yǎng)。()2．實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()A．甲過程需要在無菌條件下進行B．乙過程可用胰蛋白酶處理皮膚組織C．丙過程是原代培養(yǎng)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．丁過程是傳代培養(yǎng)細胞，不出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D隨堂練習(xí)

3．人臍帶間充質(zhì)干細胞在特定誘導(dǎo)條件下，可分化為脂肪、肝、神經(jīng)等多種組織細胞。下圖表示培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細胞的大致過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．人臍帶間充質(zhì)干細胞屬于一種iPS細胞B．通過離心除去上清液可以除去胰蛋白酶C．過程①通常用胰蛋白酶處理D．出現(xiàn)接觸抑制前，培養(yǎng)瓶中的細胞數(shù)量有可能呈“J”形增長A提示：iPS細胞是經(jīng)人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的，臍帶間充質(zhì)干細胞不是誘導(dǎo)多能干細胞。隨堂練習(xí)

4．關(guān)于iPS細胞及應(yīng)用的說法，正確的是()A．iPS細胞是從早期胚胎中獲取的B．造血干細胞是一種iPS細胞C．采用不同的方法可將成纖維細胞誘導(dǎo)產(chǎn)生iPS細胞D．誘導(dǎo)iPS細胞發(fā)生基因突變，可使其分化成各種組織細胞CD×iPS細胞分化成各種組織細胞是基因選擇性表達的過程。隨堂練習(xí)

5．某研究小組進行藥物實驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題。(1)將數(shù)量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數(shù)量比乙細胞數(shù)量_____。(2)在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是_________________________________________。細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是__________________。血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液的pH多隨堂練習(xí)

5．某研究小組進行藥物實驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題。(3)在兩種細胞生長過程中，當(dāng)乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長________。藥物實驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，甲細胞比乙細胞可以傳代的次數(shù)更_____。若用動物的肝臟組織塊制備