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北京DB市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T507—2007玉米品種純度及真實(shí)性SSR分子檢測方法SSR-basedMethodtoAssayPurityandGenuinenessinZeamaysL.2007-11-22發(fā)布2008-02-01實(shí)施北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1存條件為-20℃;TaqDNA聚合酶(5U/μL保存條件為-20℃;SSR引物,保存條件為-20℃;礦物油;2Silane剝離硅烷(RepelSilane無水乙醇;四甲基乙二胺;過硫酸銨;冰醋酸;硝酸銀;甲醛將玻璃板洗凈,用無水乙醇擦洗兩遍,干燥。在長玻璃板上涂0.5%親和硅烷(Bin3送檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品有一對以上(包括一對)引物檢測出差異,判定送檢樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品不屬于4aOH溶液,加熱至完全溶解后,冷卻至室溫,用10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至8.0,加水定容至1000A.2.2SSR引物:用超純水分別配制左引物(L)和右引物(R)終濃度均為40μmol/L的儲存液,等體A.3.5親和硅烷(BindingSilane)緩A.3.60.5%親和硅烷(BindA.4.1固定液:取冰醋酸100mA.4.2染色液:取硝酸銀2gA.4.3顯影液:取氫氧化鈉30g和甲醛5mL,加去離子水定容至100051bnlg4392bnlg1613bnlg125左引物(L):GGGACAAAAGAAG4bnlg1985bnlg2386bnlg2407bnlg1078phi0349phi053phi056右引物(R):CGCACACCACTphi065phi072phi080phi085phi96100左引物(L):AGGAGGACCCCAACumc1061bnlg233umc2084bnlg1450bnlg194061bnlg1252bnlg4393phi0724bnlg1625bnlg1616bnlg19878phi1239phi065umc1040umc1944phi077bnlg240bnlg238phi085bnlg1006bnlg1621phi295450phi0537umc1904phi048phi080phi099phi015phi037bnlg1306bnlg1505bnlg1884umc2105p
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