血細(xì)胞分析儀應(yīng)用心得

血細(xì)胞分析儀應(yīng)用心得主要內(nèi)容——理論部分 一、電阻抗型血細(xì)胞分析儀（1）電阻抗原理（2）紅細(xì)胞與血小板的檢測原理（3）白細(xì)胞的檢測原理（4）血紅蛋白的檢測原理（5）基于檢測原理的常見誤差分析二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查（1）改良牛鮑計數(shù)板（2）總數(shù)的計算（3）性狀描述、定性（4）分類的要點(diǎn)第2頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（1）電阻抗原理電源在電極之間產(chǎn)生微小的電壓細(xì)孔部燒杯外部電極血細(xì)胞血細(xì)胞浮游液內(nèi)部電極電阻穩(wěn)定電流血細(xì)胞檢測原理血細(xì)胞通過小孔血細(xì)胞大脈沖大用等滲電解質(zhì)溶液稀釋全血通過小孔感應(yīng)區(qū)時，電阻增加引起了電壓變化而出現(xiàn)一個脈沖信號細(xì)胞體積越大，引起的電壓變化越大，產(chǎn)生的脈沖振幅越高根據(jù)脈沖信號的大小測定不同大小的細(xì)胞，從而對細(xì)胞進(jìn)行分群第3頁,共25頁，2024年2月25日，星期天要點(diǎn)血細(xì)胞是非傳導(dǎo)性細(xì)胞通過小孔時會引起電阻的變化脈沖振幅的高低反映了細(xì)胞體積的大小脈沖數(shù)量反映了細(xì)胞數(shù)量（1）電阻抗原理RBC：7.2μmPLT：1.5~3μmWBC：6~20μm第4頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（2）紅細(xì)胞及其參數(shù)的檢測原理·含有白細(xì)胞因素，但可忽略。RBC：WBC=750:1MCV：紅細(xì)胞平均體積（脈沖平均高度）HCT=RBC×MCVMCH=HGB÷RBCMCHC=HGB÷HCT誤差分析（1）RBC假性增高（2）RBC假性減低第5頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（2）血小板檢測原理（1）血小板與紅細(xì)胞在同一通道檢測（2）血小板通常在2~30fl（3）大于右側(cè)閾值者考慮為紅細(xì)胞

誤差分析（1）PLT↑：紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞等（2）PLT↓：血小板聚集、巨血小板等第6頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（3）白細(xì)胞計數(shù)及分群的檢測原理WBC計數(shù)：電阻抗原理（1）排除RBC影響：溶血劑（2）排除PLT影響：體積差異淋巴細(xì)胞群單個核細(xì)胞群粒細(xì)胞群分群原理：脈沖高低，細(xì)胞大小Q：中間細(xì)胞群中包括單核細(xì)胞，單核細(xì)胞的體積不一定小于粒細(xì)胞，那為何中間細(xì)胞群位于粒細(xì)胞群之前？第7頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（4）血紅蛋白檢測原理：分光光度比色法檢測物質(zhì)為血紅蛋白衍生物（1）氰化血紅蛋白含有氰化物（2）月桂酰硫酸鈉（SLS）血紅蛋白不含氰化物校正儀器時以氰化高鐵法為準(zhǔn)最大吸收波長為540nm國際血液標(biāo)準(zhǔn)委員會（ICSH）推薦方法誤差分析：影響檢測光路的因素第8頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.1）紅細(xì)胞計數(shù)的誤差分析（1）RBC假性增高：WBC極度增高、嚴(yán)重貧血、巨大血小板？（2）RBC假性減低：紅細(xì)胞凝集（冷凝集、抗凝劑相關(guān)性、自身免疫性）冷凝集解離前測定結(jié)果冷凝集解離后測定結(jié)果冷凝集素綜合征·在31℃以下·自身紅細(xì)胞抗原發(fā)生可逆性凝集常見病·白血病、惡性淋巴瘤或全身性紅斑狼瘡·肺炎支原體屬感染·傳染性單核細(xì)胞增多癥處理方法·37℃水浴第9頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.2）血小板計數(shù)的誤差分析（1）PLT假性增高：紅、白細(xì)胞碎片，小紅細(xì)胞；冷蛋白血癥處理辦法：鏡檢確認(rèn)，手工計數(shù)；光學(xué)法儀器復(fù)查。（2）PLT假性減低：血小板凝集（采血，抗凝劑），血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，巨大血小板處理辦法：鏡檢確認(rèn)，手工計數(shù)；光學(xué)法儀器復(fù)查。EDTA依賴性血小板聚集患者，男性，26歲，呼吸內(nèi)科，發(fā)熱待查PLT9×109/LWBC10.2×109/LRBC4.50×1012/LHGB120.5g/LHCT0.45MCV80flPLT185×109/LWBC9.4×109/L

RBC4.48×1012/LHGB120g/LHCT0.45MCV80fl第10頁,共25頁，2024年2月25日，星期天RBC直方圖現(xiàn)雙群紅細(xì)胞PLT直方圖尾部持續(xù)抬高

可見紅細(xì)胞大小不等、小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片患者，女性，39歲，血液科，血小板增多查因WBC7.50×109/LRBC4.91×1012/LHGB93.00g/LHCT0.3MCV60.6flRBC-CV0.27PLT726×109/L第11頁,共25頁，2024年2月25日，星期天Q:血常規(guī)初診PLT計數(shù)偏低應(yīng)如何處理？（國際復(fù)檢規(guī)則小于100）①查看血樣是否有凝塊有→重抽復(fù)查無→②②復(fù)查正?！藢?shí)，審核不變→③③查看PLT直方圖及提示信息直方圖良好，無提示信息，可考慮結(jié)合臨床審核，最好先閱片直方圖尾部抬起，巨血小板、血小板凝塊→④④鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板聚集抽血不順引起的聚集→重抽，正?！鷮徍薊DTA依賴性的聚集→更換抗凝劑→正?！茛萋?lián)系臨床，了解患者應(yīng)無牙齦出血、皮下瘀斑、紫癜等出血傾向，囑醫(yī)生告知患者今后血常規(guī)應(yīng)采用特殊抗凝劑采血。（通常為枸櫞酸鈉）第12頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.3）白細(xì)胞計數(shù)的誤差分析（1）WBC假性減低：白細(xì)胞凝集（少見）（2）WBC假性增高：血小板凝塊、巨大血小板，冷蛋白，紅細(xì)胞溶血不良，有核紅細(xì)胞

紅細(xì)胞溶血不良（1）脂類代謝異常：紅細(xì)胞膜表面與脂類結(jié)合形成脂質(zhì)顆粒保護(hù)膜（2）紅細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)異常：異常血紅蛋白血癥

常見于（1）肝功能低下（肝硬化、肝癌晚期、膽道阻塞）（2）高脂血癥、高膽固醇制劑輸液治療中（3）異常血紅蛋白癥（Hgb-S癥、Hgb-C癥）處理辦法：人工顯微鏡形態(tài)學(xué)鏡檢第13頁,共25頁，2024年2月25日，星期天

有核紅細(xì)胞的干擾外周血中紅細(xì)胞的數(shù)量是白細(xì)胞的三次方數(shù)量級大多數(shù)NRBC被當(dāng)作WBC，紅細(xì)胞和淋巴細(xì)胞峰低谷上升，出現(xiàn)報警提示第14頁,共25頁，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞計數(shù)結(jié)果必須按如下公式予以校正上式中，X為未校正前白細(xì)胞數(shù)，Y為在白細(xì)胞分類計數(shù)時，計數(shù)100個白細(xì)胞的同時計數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)?！度珖R床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版白細(xì)胞校正數(shù)/L=X×100100+Y第15頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（5.4）血紅蛋白檢測的誤差分析脂血癥異常血漿蛋白嚴(yán)重白細(xì)胞增多膽紅素增高體內(nèi)溶血紅細(xì)胞不溶解第16頁,共25頁，2024年2月25日，星期天患者，男，30歲，燒傷整形外科第17頁,共25頁，2024年2月25日，星期天該圖來源于北京協(xié)和醫(yī)院張時民教授博客第18頁,共25頁，2024年2月25日，星期天第19頁,共25頁，2024年2月25日，星期天患者，男性，30歲，血液內(nèi)科一病區(qū)，臨床診斷為慢性髓細(xì)胞性白血病。急查血常規(guī)：問：為什么HGB與HCT的下降程度不一致？HCT結(jié)果為0.31，對應(yīng)的HGB應(yīng)在100g/L左右，而該結(jié)果HGB僅為49g/L。病例思考題：WBC423.5×109/LRBC1.9×1012/LHGB49.00g/LPLT225×109/LMCV159flHCT0.31第20頁,共25頁，2024年2月25日，星期天自學(xué)內(nèi)容紅細(xì)胞計數(shù)的臨床意義血小板計數(shù)的臨床意義白細(xì)胞計數(shù)及其分類的臨床意義血紅蛋白檢測的臨床意義其他參數(shù)的臨床應(yīng)用及其意義第21頁,共25頁，2024年2月25日，星期天二、腦脊液胸腹水常規(guī)檢查（1）性狀描述、定性（2）改良牛鮑計數(shù)板（3）總數(shù)的計算（4）分類的要點(diǎn)第22頁,共25頁，2024年2月25日，星期天（1）性狀描述、定性試驗(yàn)性狀·透明度·顏色：無色、紅色、黃色、乳白色、淡綠色、褐黑色等定性試驗(yàn)?zāi)X脊液：潘迪試驗(yàn)，球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽沉淀胸腹水：Rivalta試驗(yàn)，0.1%乙酸溶液，使酸性黏蛋白形成白色霧狀沉淀混濁、血性標(biāo)本應(yīng)離心取上清做定性試驗(yàn)第23頁,共25頁，2024年2月25日，星期天3mm三等分每個大格面積為1mm2計數(shù)池高度為0.1mm容積=1mm2×