腫瘤繼承性免疫治療DecJN

腫瘤繼承性免疫治療DecJN全球癌癥趨勢今后20

年全球新患人數(shù)每年1000萬→1500萬死亡人數(shù)每年600萬→1000

萬

18thInternationalCongressonAnti-Treatment,Paris,2007第2頁,共91頁，2024年2月25日，星期天中國癌癥趨勢

2000年發(fā)病約180-200萬死亡140-150萬0～64歲人口中，1/4死于癌癥

中國癌癥預防與控制規(guī)劃綱要（2004-2010）

第3頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療１．手術---破冰船歷史悠久手術本身的兩面性：消除（降低）腫瘤負荷促進轉移的傾向難以清除腫瘤微小轉移灶很多患者就診時已失去手術最佳時機第4頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療２．化療---轟炸機腫瘤內(nèi)科治療的基石對腫瘤細胞的殺傷缺乏選擇性損傷正常組織Goldie-Coldman假說及“一級動力學”理論：化療對數(shù)殺滅細胞，不可能徹底清除腫瘤細胞第5頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥的三大常規(guī)治療1898年發(fā)現(xiàn)鐳鐳用于治療腫瘤放療有效破壞或消滅癌細胞，甚至可以治愈部分腫瘤放療損傷機體正常細胞，降低機體免疫力

3．放療---太陽能第6頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤治療的現(xiàn)狀靶向藥物靶向藥物腫瘤生物治療是進一步提高療效的很有前景的方法第7頁,共91頁，2024年2月25日，星期天目前癌癥療效的總體評估“近20年來，我國癌癥死亡率上升了29%，……癌癥治愈率(5年生存率)仍徘徊在20%-30%左右。其中肺癌僅10%，肝癌3%左右”。

--衛(wèi)生部2006年《中國慢性病報告》“近30年來，晚期轉移腫瘤5年生存率基本上沒有改變。這主要是由我們目前腫瘤治療不當和過度治療造成的。”

--程書鈞院士第8頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥治療的誤區(qū)

注重腫瘤本身，想盡辦法殺死腫瘤細胞體內(nèi)正常細胞被錯殺為什么要長腫瘤？

第9頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥認識的誤區(qū)只有確切了解癌癥，才可能找到治愈的方法

重大突破通常來源于認識上的巨大轉變細菌與感染的聯(lián)系得到證實后，才意識到要治愈此類疾病便必須除去細菌。結果是促使抗生素的誕生，從而控制一系列的傳染病第10頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥治療的困境與未來術后1年復發(fā)率達60%死于腫瘤復發(fā)和轉移的人超過80%徹底消滅癌細胞及體內(nèi)不再產(chǎn)生癌細胞的“根治”任務很可能落在生物治療身上第11頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥治療的生物療法腫瘤生物免疫療法成為最令人矚目、最鼓舞人心的焦點，將成為21世紀人類攻克癌癥具有戰(zhàn)略意義的一個重要方面.

37-39屆美國臨床腫瘤學會（ASCO）

第7屆中國抗癌協(xié)會臨床腫瘤學協(xié)作專業(yè)委員會（CSCO）

第12頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Strength(優(yōu)勢)細胞免疫技術發(fā)展給成功的臨床治療帶來可能性?？茖W家和臨床專家全力發(fā)展此技術衛(wèi)生部醫(yī)政處也大力支持。己批準此臨床技術,并核準收費標準Opportunity(機會)目前各研究所及醫(yī)科大學各自為政地，并且各機構只有少量臨床病例報道，因此給產(chǎn)業(yè)化，系統(tǒng)化發(fā)展帶來可能。腫瘤生物治療現(xiàn)狀

Weakness(劣勢)部分各科臨床醫(yī)師對此技術認知程度偏低廣大病人對此知識一無所知Threat(威脅)各單位技術力量大小不一，并參差不齊，易造成混亂，阻滯此技術的臨床健康發(fā)展。

第13頁,共91頁，2024年2月25日，星期天政府全力支持

----衛(wèi)生部文件國家發(fā)展改革委、衛(wèi)生部、國家中醫(yī)藥管理局關于印發(fā)《全國醫(yī)療服務價格項目規(guī)范》新增和修訂項目（2007年）的通知發(fā)改價格[2007]2193號新增項目

修訂項目

第56條310800024

細胞因子活化殺傷（CIK）細胞輸注治療含藥物加無血清培養(yǎng)基、體外細胞培養(yǎng)；

包括樹突狀細胞治療(DC)次LAK細胞治療酌情加收

第14頁,共91頁，2024年2月25日，星期天政府全力支持

----衛(wèi)生部文件

醫(yī)療技術臨床應用管理辦法

衛(wèi)生部明確國家建立醫(yī)療技術臨床應用準入和管理制度，對醫(yī)療技術實行分類、分級管理。

醫(yī)療技術分三類管理衛(wèi)醫(yī)政發(fā)(2009)18號第15頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥治療的生物療法腫瘤免疫的概念起源于本世紀初1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負責防御微生物侵犯，而且清除機體內(nèi)改變了的宿主成分腫瘤生物免疫療法已成為腫瘤治療基礎和臨床研究的重要領域第16頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥生物治療的分類---操作模式非細胞治療抗體、多肽/蛋白質(zhì)疫苗、基因疫苗、體內(nèi)基因治療等可以規(guī)?；a(chǎn)有嚴格、均一的產(chǎn)品質(zhì)量標準主要由制藥公司開發(fā)細胞治療采集患者自體細胞進行制備，再回輸給患者無法規(guī)模化生產(chǎn)更適于在醫(yī)療機構開展，完成從采集、制備到回輸?shù)娜^程第17頁,共91頁，2024年2月25日，星期天正常機體免疫系統(tǒng)識別和清除突變細胞：免疫監(jiān)視免疫逃逸的機理還不很清楚，但主要的機制與CD8+T細胞不能有效地清除腫瘤細胞有關第18頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤免疫治療的三種新途徑----針對腫瘤免疫逃逸增強免疫應答間接作用如抑制血管生成直接抑制腫瘤生長毒素放射性核素藥物細胞介導免疫治療過繼性免疫細胞治療供體淋巴細胞輸注腫瘤疫苗第19頁,共91頁，2024年2月25日，星期天限制腫瘤免疫應答的因素第20頁,共91頁，2024年2月25日，星期天免疫均衡與免疫逃逸淋巴細胞因素腫瘤細胞因素第21頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤過繼性免疫治療體外分離細胞APC（巨噬細胞、樹突狀細胞）T淋巴細胞自然殺傷（NK）細胞離體培養(yǎng)、擴增、活化細胞因子刺激抗原沖擊基因修飾自體或(同種異體)回輸誘發(fā)機體特異性抗腫瘤免疫第22頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹突狀細胞（DC）共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)自然殺傷細胞型的淋巴細胞(NKT)腫瘤過繼性免疫治療第23頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹狀突細胞（DC）雙克隆免疫細胞(DC-CIK)腫瘤過繼性免疫治療第24頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞

lymphokine-activatedkillercells,LAK1980年，Rosenberg實驗室首報荷瘤小鼠的脾臟淋巴細胞和腫瘤患者外周血淋巴細胞在含有IL-2的條件下，短期培養(yǎng)后可誘導出一種非特異性的殺傷細胞，能殺傷新鮮分離的實體瘤細胞和體外培養(yǎng)的多種腫瘤細胞目前尚未發(fā)現(xiàn)LAK細胞特有的表面標志LAK細胞的前體細胞是NK細胞和T細胞。第25頁,共91頁，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應用1984年Rosenberg研究組首次應用IL-2與LAK協(xié)同治療25例腎細胞癌、黑素瘤、肺癌、肝癌/結腸癌等患者LAK細胞0.6～18.4×1010IL-22.8×105～3.3×106U/kg11例腫瘤縮小超過50％，1例黑色素瘤完全消退第26頁,共91頁，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應用1988年用IL-2與LAK細胞協(xié)同治療222例16例轉移灶完全消退26例腫瘤消退50％以上對轉移性腎細胞癌、黑色素瘤、肝癌、結腸癌和非霍奇金淋巴瘤療效較顯著第27頁,共91頁，2024年2月25日，星期天LAK的臨床應用乳腺癌、膀胱癌局部聯(lián)用IL-2也獲得明顯療效由于IL-2用量大，一些病例出現(xiàn)較大毒副反應第28頁,共91頁，2024年2月25日，星期天異體LAK：采用抗原性較弱的5個月以內(nèi)胎兒的脾細胞、肝細胞和胸腺細胞體外誘導培養(yǎng)后具有很強的LAK細胞活性出現(xiàn)早而持久，不易引起移植排斥反應骨髓細胞用rhIL-2培養(yǎng)后有很強的LAK活性，比外周血來源者強而持久；胎兒臍血細胞經(jīng)IL-2誘導后，LAK活性也明顯強于成人。第29頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹狀突細胞（DC）雙克隆免疫細胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第30頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤浸潤淋巴細胞

tumorinfiltratinglymphocyte,TIL

1986年Rosenberg研究組首先報道從腫瘤局部分離出TIL，加入高劑量IL-2體外培養(yǎng)，殘存的腫瘤細胞7～13天全部死亡。從手術切下的腫瘤組織、腫瘤引流淋巴結、癌性胸腹水中獲得淋巴細胞，加IL-2培養(yǎng)后，其生長、擴增能力強于LAK細胞14例轉移性肺癌等晚期腫瘤患者,其中4例腫瘤縮小50％以上，副作用明顯低于IL-2/LAK療法。第31頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）治療轉移性黑色素瘤2002.Science第32頁,共91頁，2024年2月25日，星期天2007年，法國熱那亞大學細胞與基因治療中心對用TIL+IL-2治療過的Ⅲ期黑色素瘤進行了長期隨訪，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療過的只有一個淋巴結轉移的患者其復發(fā)率明顯低于對照組，總生存期也明顯長于只用IL-2治療的患者。腫瘤侵潤性淋巴細胞第33頁,共91頁，2024年2月25日，星期天

2007年南京大學醫(yī)學院附屬南京市鼓樓醫(yī)院腫瘤中心劉寶瑞等用快速制備自體腫瘤浸潤淋巴細胞方法聯(lián)合白細胞介素2胸腔輸注治療癌性胸腔積液、2001年江西省萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院腫瘤科用TIL/LAK治療惡性漿膜腔積液38例等報道，他們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過TIL治療后，患者生活質(zhì)量明顯提高,體力狀況得到恢復，有效患者隨訪中治療側胸腔未再出現(xiàn)胸腔積液或胸腔積液量增加,治療后除少數(shù)病例短時間內(nèi)出現(xiàn)可耐受的低熱及胸痛外,無一例出現(xiàn)其他不良反應。腫瘤侵潤性淋巴細胞第34頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹狀突細胞（DC）雙克隆免疫細胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第35頁,共91頁，2024年2月25日，星期天細胞因子誘導的殺傷細胞Cytokine-inducedkillercell,CIK由

-IFN、TNFa、CD3單抗、IL-1、IL-2等在體外誘導并大量擴增的具有殺傷腫瘤活性的細胞1991年斯坦福骨髓移植中心首先報道1994年Schmidt-wolf報道了體外大量增殖CIK細胞的方法。是目前國際上廣泛應用的腫瘤免疫治療手段第36頁,共91頁，2024年2月25日，星期天細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)第37頁,共91頁，2024年2月25日，星期天分2-3次靜脈回輸體內(nèi)采集病人外周血單個核細胞加入多種細胞因子培養(yǎng)擴增、活化、誘導成為CIK細胞發(fā)揮抗腫瘤作用到達病變部位直接清除殘存腫瘤細胞調(diào)節(jié)和增強全身免疫機能防止腫瘤復發(fā)及轉移第38頁,共91頁，2024年2月25日，星期天CIK細胞的特點1）高增殖活性：培養(yǎng)第18-22天達頂峰；

CD3+CD56+細胞增加1000-6000倍；

28-30天達平臺期，細胞毒活性亦達峰值2）高細胞毒力

CIK細胞的腫瘤細胞抑制指數(shù)為1.5-3.5，

LAK細胞為0.5-1.5；3）殺瘤譜廣泛：非MHC限制性第39頁,共91頁，2024年2月25日，星期天4）細胞來源豐富正?；蚧颊叩墓撬鑶蝹€核細胞或外周血單個核細胞、干細胞均可誘導獲得CIK細胞；5）對多耐藥性腫瘤細胞同樣敏感6）不受免疫抑制劑CSA、FK506影響7）抵抗腫瘤細胞誘發(fā)的效應細胞Fas-FasL凋亡，細胞內(nèi)表達抗凋亡基因和保護基因8）對正常骨髓前體細胞毒性很小第40頁,共91頁，2024年2月25日，星期天256例各種中晚期腫瘤患者（乳腺癌、肺癌、腸癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4療程CIK治療部分緩解和輕度緩解為207例（80.86%）1年生存期為96.06%2年生存期為92.96%3年生存期為88.38%生存質(zhì)量卡氏評分提高率為88.28%無心、肝、腎不良反應，僅數(shù)例有一過性發(fā)熱，24小時即正常國內(nèi)2003年報道第41頁,共91頁，2024年2月25日，星期天CIK細胞治療癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例顯著減少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例顯著減少有效率84.3%第42頁,共91頁，2024年2月25日，星期天1999年，德國柏林Freie大學Schmidtwolf等人報告用自身CIK細胞治療10例腫瘤腫瘤患者，結果1例完全緩解，3例穩(wěn)定。2005年，美國斯坦福大學醫(yī)學中心LeembuisT等人用自身CIK（1×109-1010）治療9例霍奇金氏淋巴瘤和非霍奇金氏淋巴瘤，結果2例部分緩解，2例穩(wěn)定，5例無反應，無嚴重毒副作用。2007年，意大利卡利亞里骨髓移植中心用供者CIK細胞治療11例惡性血液疾病，結果病人能夠耐受治療，有助于控制疾病復發(fā)。CIK細胞治療第43頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹突狀細胞（DC）雙克隆免疫細胞(DC-CIK)腫瘤過繼性免疫治療第44頁,共91頁，2024年2月25日，星期天樹突狀細胞（dendriticcell,DC）應用負載腫瘤抗原的樹突狀細胞激發(fā)機體產(chǎn)生腫瘤特異性CTL有效地殺傷腫瘤細胞建立持久的抗腫瘤的特異性免疫應答第45頁,共91頁，2024年2月25日，星期天

DC研究歷史美國學者Steinman及Cohn于1973年發(fā)現(xiàn)1992年Steinman建立了應用GM-CSF從小鼠骨髓中大規(guī)模培養(yǎng)制備DC的方法此后建立并完善了多種培養(yǎng)擴增DC的方法DC的研究得以深入第46頁,共91頁，2024年2月25日，星期天2009年，英國伯明翰英國癌癥研究臨床試驗組的Palmer等人用肝癌細胞株溶胞產(chǎn)物致敏DC治療35例晚期肝癌病人部分緩解和病情穩(wěn)定者10例4例AFP明顯下降7例T細胞對AFP有免疫反應DC細胞--近期研究第47頁,共91頁，2024年2月25日，星期天DC細胞的基本特征體內(nèi)功能最強的抗原提呈細胞顯著刺激初始型T細胞增殖機體免疫反應的始動者在免疫應答的誘導中具有獨特的地位第48頁,共91頁，2024年2月25日，星期天DC對抗原的加工處理與提呈DC與T細胞接觸表面的MHC-肽復合物被T細胞識別將抗原信息傳遞給T細胞——抗原提呈第49頁,共91頁，2024年2月25日，星期天樹突狀細胞與T細胞的作用第50頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腦以外的全身各臟器皮膚、肝、脾、骨髓、淋巴器官和外周血中僅占人外周血單個核細胞的1％左右外周血中有很多DC前體細胞，在體外誘導成DCDC的組織分布第51頁,共91頁，2024年2月25日，星期天第52頁,共91頁，2024年2月25日，星期天第53頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤抗原致敏患者自身的樹突狀細胞制備成瘤苗(或細胞懸浮液)回輸患者DC細胞治療腫瘤的方案和途徑第54頁,共91頁，2024年2月25日，星期天樹突狀細胞（DC）治療流程圖

收集患者外周血單個模細胞PBMC抗原致敏的DC體外細胞因子刺激回輸給同一患者相關多肽致敏第55頁,共91頁，2024年2月25日，星期天樹突狀細胞（殺傷性T細胞）殺傷性T細胞機理第56頁,共91頁，2024年2月25日，星期天淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)樹狀突細胞（DC）共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療第57頁,共91頁，2024年2月25日，星期天共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)

共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)

樹突狀細胞(DC)+細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)

DC和CIK是腫瘤免疫治療的兩部分DC識別病原,激活獲得性免疫系統(tǒng)CIK通過發(fā)揮自身細胞毒性與分泌細胞因子殺傷腫瘤細胞二者聯(lián)合確保有效和諧的免疫反應之完成第58頁,共91頁，2024年2月25日，星期天共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)大容量體外CIK細胞擴增技術誘導CIK細胞按一定比例與DC細胞混合培養(yǎng)得到一種新的抗腫瘤免疫活性細胞群DC-CIK療法擁有更強的增殖能力及特異性識別﹑殺傷腫瘤細胞之特性共培養(yǎng)免疫細胞(DC-CIK)

第59頁,共91頁，2024年2月25日，星期天2008年中國科學院生物物理研究所鄧笑偉等用不同來源的CIK和DC聯(lián)合治療21例中晚期肺癌，結果CR2例,PR7例,SD5例,PD7例,有效率為42.9%,臨床獲益率(CR+PR+SD)為66.7%，細胞回輸后主要不良反應為一過性發(fā)熱。CIK-DC共培養(yǎng)細胞治療第60頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Barry等（匹茲堡大學腫瘤研究所2003年）15例轉移性乳腺癌回輸NK細胞4例完全緩解，耐受性良好，無毒副作用NK細胞第61頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Koehl等（德國法蘭克福大學醫(yī)院2004年）3例ALL干細胞移植病人NK細胞+IL-2治療患兒能充分耐受NK細胞第62頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Miller等（明尼阿波利大學腫瘤中心2005年）NK細胞聯(lián)合CTX+Fludarabine治療19例AML5例血液學完全緩解NK細胞第63頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Arai等（芝加哥Risb大學醫(yī)學中心2008年）同種異基因細胞系NK-92治療12例晚期腎癌和黑色素瘤病人1例完全緩解，1例穩(wěn)定，1例為混合反應NK細胞第64頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Kobayashi等（東京女子醫(yī)學大學2007年）自身γδT細胞治療7例進展期肺癌治療后患者γδT細胞明顯增多無明顯毒副作用。γδT

細胞第65頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Bennouna等（2008年，法國）自身γδT細胞（8×109）+IL-210例轉移性腎癌患者6例患者治療后25.7周內(nèi)病情穩(wěn)定僅出現(xiàn)感冒樣癥狀γδT

細胞第66頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Okai等（澳大利亞昆土蘭州醫(yī)學研究所2002年）α半乳糖神經(jīng)酰胺（α-galcer）荷載DC4例癌轉移患者治療后病人NKT細胞明顯增多患者未出現(xiàn)不良反應NKT細胞

第67頁,共91頁，2024年2月25日，星期天Shikawa等（神奈川縣千葉大學醫(yī)院2005年）α-galcer荷載DC9例復發(fā)性非小細胞肺癌治療后5例病情穩(wěn)定未出現(xiàn)不良反應NKT細胞

第68頁,共91頁，2024年2月25日，星期天2008年，千葉大學醫(yī)院α-galcer荷載DC9例頭部腫瘤1例部分緩解4例穩(wěn)定NKT細胞

第69頁,共91頁，2024年2月25日，星期天DC-CIK免疫治療聯(lián)合常規(guī)治療方法治療時機與方案聯(lián)合治療意義術后聯(lián)合DC-CIK1.快速恢復手術造成的免疫損傷；2.特異清除術后殘余腫瘤細胞；防治轉移復發(fā)3.增強放療敏感性，減少放療毒副作用；4.抵抗化療藥物的免疫抑制作用；5.增強對化療藥物敏感性；6.支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放療聯(lián)合DC-CIK化療聯(lián)合DC-CIK常規(guī)治療無效支持療法第70頁,共91頁，2024年2月25日，星期天DC-CIK治療與常規(guī)治療方法比較

治療種類特點DC-CIK免疫治療增強機體免疫功能增強放、化療的敏感性清除微小病灶和殘余腫瘤細胞無明顯毒副作用手術局部快速切除腫瘤組織；見效快；微小病灶或轉移病灶；放療局部減少腫瘤負荷；見效快；不敏感細胞，復發(fā)根源；造成免疫損傷；化療全身減輕腫瘤負荷；見效快；不敏感細胞，復發(fā)根源；毒副作用大，造成免疫損傷；第71頁,共91頁，2024年2月25日，星期天CD3AK細胞：免疫原性較強的腫瘤（具有T細胞受體（TCR）除外）CIK細胞：各種腫瘤，對低表達MHCⅠⅡ分子更有效γδT細胞：各種腫瘤，對呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)以及部分血液惡性疾病療效好樹突狀細胞：成熟DC可與各種細胞聯(lián)合應用，增強抗腫瘤免疫效果樹突狀細胞疫苗：可以預防和治療相應的各種腫瘤NKT細胞：對消化系統(tǒng)尤其是肝癌和呼吸系統(tǒng)腫瘤以及頭頸部腫瘤效果好NK細胞：對不表達MHC分子的腫瘤效果好巨噬細胞：Ⅰ型MФ具有一定的抗腫瘤作用，可一其他免疫細胞聯(lián)合應用免疫細胞和細胞群抗癌譜第72頁,共91頁，2024年2月25日，星期天免疫聯(lián)合治療CIK細胞DC-CIK共培養(yǎng)細胞DC聯(lián)合CIK細胞CD3AK細胞DC疫苗聯(lián)合CIK、CD3AK細胞共刺激T細胞巨噬細胞聯(lián)合CIK細胞腫瘤特異性T細胞聯(lián)合NK、γδT細胞、NKT細胞……第73頁,共91頁，2024年2月25日，星期天細胞培養(yǎng)實驗場所細胞培養(yǎng)場所條件:符合GMP要求按照《品質(zhì)管理架構》之模式管理。

GTP細胞培養(yǎng)/治療流程實驗室管理流程生物安全實驗流程消毒程序與周期流程維護和性能驗證程序

設備3Q品質(zhì)驗證設備清潔和維護保養(yǎng)試劑、耗材的外購品質(zhì)檢測流程最終細胞產(chǎn)品檢測流程:

用常規(guī)方法進行細菌和真菌培養(yǎng)試驗用鱟試劑法進行內(nèi)毒素檢測用功能性殺瘤實驗法進行殺傷活性檢測用流式細胞儀進行表面標記檢測用常規(guī)方法檢測細胞總數(shù)、細胞存活率、特定生物活性效價第74頁,共91頁，2024年2月25日，星期天各種細胞回輸方法培養(yǎng)細胞收集于離心瓶。2500rpm×8min，20℃

進行細胞計數(shù)、檢查內(nèi)毒素、細胞表型，將細胞重懸于自身血漿中，按照不同的細胞選擇不同的回輸方法。留樣封存。0.9％注射用生理鹽水2000rpm×8min×2次，20℃核對好病人姓名、性別、年齡、住院號、細胞數(shù)、無菌結果、病區(qū)及治療項目第75頁,共91頁，2024年2月25日，星期天CIK細胞制備培養(yǎng)

用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血2000g×15min，20℃

75cm2培養(yǎng)瓶CIK培養(yǎng)液（含IFN-γ）第2天加混合細胞因子PMNC層CIK培養(yǎng)隔天擴瓶培養(yǎng)瓶內(nèi)細胞收集、離心、洗滌回輸?shù)?天擴瓶后抽樣送檢（細菌培養(yǎng)和表型分析）第3天擴瓶培養(yǎng)留血漿50ML備用分離出6ml富含白細胞的血液淋巴細胞分離液第76頁,共91頁，2024年2月25日，星期天第10天培養(yǎng)瓶內(nèi)DC細胞收集、離心、洗滌和回輸?shù)?天補充含半量細胞因子的培養(yǎng)基，并加腫瘤抗原第6天補充培養(yǎng)基，加TNF-

，抽樣送檢（細菌培養(yǎng)和表型分析）75cm2培養(yǎng)瓶1640培養(yǎng)液2000g×15min，20℃

留血漿50ML備用分離出6ml富含白細胞的血液淋巴細胞分離液PMNC層用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血細胞貼壁120min貼壁細胞進行DC細胞培養(yǎng)方案懸浮細胞進行CIK培養(yǎng)方案樹突狀細胞制備流程第77頁,共91頁，2024年2月25日，星期天癌癥生物治療的優(yōu)點1）應用范圍廣幾乎可以應用于所有腫瘤患者。

2）對原發(fā)腫瘤轉移腫瘤均有明顯療效

3）對于手術后的惡性腫瘤患者的殘存腫瘤細胞的清除預防腫瘤的復發(fā)有著比化療更明顯的作用。

4）副作用小，目前僅發(fā)現(xiàn)有發(fā)燒類似感冒的副作用。

5）不損傷正常組織并能提高機體免疫力和改善身體狀況的作用。生物治療具有無創(chuàng)傷無痛苦安全無副作用等特點，是未來腫瘤治療的重要發(fā)展方向。特異性強適應癥廣延長生命性強抗復發(fā)性強安全性好(副作用低幾乎沒有)合適的費用第78頁,共91頁，2024年2月25日，星期天適應癥

主要用于惡性黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、膀胱癌、卵巢癌、結腸癌、直腸癌、乳腺癌、宮頸癌、各種肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等實體瘤手術后防止復發(fā)；也可以用于多發(fā)性骨髓瘤、B細胞淋巴瘤和白血病等血液系統(tǒng)惡性腫瘤緩解期進一步預防復發(fā)；還可以用于上述實體瘤緩解期進一步鞏固治療或上述晚期腫瘤配合放化療、介入治療、熱療等方法，達到延長生存期、提高生活質(zhì)量和控制腫瘤進展的目的。第79頁,共91頁，2024年2月25日，星期天適應癥A、適合免疫治療者：①年齡大于16歲；②病理組織學或細胞學確診為腫瘤患者③生活自理，卡氏體力狀況評分標準60分以上；④預計生存期至少大于6個月；⑤簽署知情同意書；⑥放化療結束一個月以上的；⑦如若可以接受手術治療或其它方式能夠獲得一定數(shù)量的腫瘤組織件或細胞的患者最佳。第80頁,共91頁，2024年2月25日，星期天不適合癥不適合免疫治療者：①懷孕或哺乳期婦女；②器官功能衰竭者：心臟：IV級以上；肝臟：達到國內(nèi)肝功能分級C級以上；腎臟：腎功能衰竭及尿毒癥期以上；肺：出現(xiàn)嚴重的呼吸衰竭癥狀，并累及到其他臟器，如肝、腎功能；腦：腦轉移并伴意識障礙者；③臟器移植者；④長期使用免疫抑制藥物或正在使用的自身免疫性疾病患者；⑤精神疾病者，發(fā)生急性肝炎或其他急性感染病活動期；⑥對本治療中所用生物試劑過敏者。治療者中途撤出者：①病情惡化；②患者產(chǎn)生無法忍受的副作用;③患者要求退出治療。第81頁,共91頁，2024年2月25日，星期天禁忌癥:

病人生命體征己出現(xiàn)衰竭的現(xiàn)象病人處于懷孕期和哺乳期病人明確診斷肉瘤(除惡性黑色素瘤)病人明確診斷軟骨瘤病人明確診斷原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤第82頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第83頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第84頁,共91頁，2024年2月25日，星期天腫瘤臨床分期及治療原則:

第85頁,共91