仔豬豬流行性腹瀉病毒與大腸桿菌混合感染的診治

摘要：仔豬腹瀉現(xiàn)象在豬場時常發(fā)生，其主要傳染性因素的病原分為病毒和細(xì)菌兩類。豬流行性腹瀉病毒是最主要的病毒病原，而大腸桿菌則是重要的細(xì)菌病原。當(dāng)豬流行性腹瀉病毒和大腸桿菌混合感染時，會給豬場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。本文通過一例仔豬豬流行性腹瀉病毒和大腸桿菌混合感染的病例，從發(fā)病情況、剖檢變化、實驗室診斷、藥敏試驗、防治等方面進(jìn)行闡述，旨在為臨床上防控這兩種疾病提供參考。關(guān)鍵詞：仔豬；豬流行性腹瀉病毒；大腸桿菌；混合感染；診治引起仔豬腹瀉的傳染性因素有很多，主要分為病毒性病原和細(xì)菌性病原兩類。常見的病毒性病原主要包括豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PRoV）、豬細(xì)小病毒（PPV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）等，尤其腸道病毒感染仔豬后，臨床癥狀表現(xiàn)相似、病理變化差別不大，容易引起誤診，耽誤疾病的及時防治。在這些腸道病毒中，PEDV對哺乳仔豬的危害最重，發(fā)病率可達(dá)100%，病死率30%～80%?；疾∝i是PEDV的主要傳染源，此外，攜帶PEDV的野豬是病毒的儲存宿主，對該病的流行和傳播具有重要作用。2010年起，我國的許多豬場大規(guī)模暴發(fā)PED，初生仔豬死亡率達(dá)90%以上，原來的免疫方式和疫苗不能控制PED發(fā)生，原因在于PEDV發(fā)生了重要變異。2013年5月，美國首次發(fā)現(xiàn)PED，傳播力強，致使美國31個州的商品豬存欄量在18個月內(nèi)損失10%。細(xì)菌性病原主要為大腸桿菌（E.coli），隨著養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模迅速擴大，仔豬黃痢和仔豬白痢在臨床上最常發(fā)生，其發(fā)病率和死亡率在仔豬疾病中占據(jù)首位，極大阻礙了養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。由于E.coli血清型復(fù)雜，易產(chǎn)生耐藥菌株，如何有效地防治該病正面臨著巨大的挑戰(zhàn)。PEDV與E.coli是目前引起仔豬腹瀉最主要的病原，當(dāng)仔豬同時感染PEDV與E.coli時，會給養(yǎng)豬場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失?，F(xiàn)將一例仔豬PEDV與E.coli混合感染的情況報道如下。1發(fā)病情況齊齊哈爾市泰來縣某一體化養(yǎng)豬場共養(yǎng)殖生豬1300多頭，2022年4月下旬，母豬與新生仔豬陸續(xù)發(fā)病，母豬主要表現(xiàn)為嘔吐、噴射狀水樣腹瀉，精神狀態(tài)良好，食欲正常，持續(xù)1周后康復(fù)；哺乳仔豬出生后第2天，開始持續(xù)水樣腹瀉，后變?yōu)榘咨”?，精神沉郁，食欲減退，3～5d后陸續(xù)出現(xiàn)死亡。畜主前期用過頭孢噻呋鈉、慶大霉素、環(huán)丙沙星及補液鹽等藥物，效果不佳，至來就診咨詢時，仔豬已陸續(xù)死亡25頭。2剖檢變化對剛死亡的2頭小豬進(jìn)行剖檢，肝臟局部壞死（見圖1）；腎臟有密密麻麻點狀出血（見圖2）；脾臟邊緣出血、梗死（見圖3）；小腸壁變薄，腸系膜出血，腸內(nèi)充滿黃色液體（見圖4）。

3實驗室診斷3.1病毒檢測1）病料處理取脾臟、腎臟、腦、淋巴結(jié)等組織及腸內(nèi)容物約2.0g，放于研磨中，剪碎，加入1mL生理鹽水研磨，磨碎后放入EP管中，6000rpm離心3min。2）RNA提取取上清液按照相關(guān)說明進(jìn)行DNA和RNA的提取，獲得模板DNA和模板RNA。3）PCR擴增設(shè)計好程序，在PCR擴增儀上進(jìn)行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV的擴增。4）電泳取PCR或RT-PCR產(chǎn)物點樣于瓊脂糖凝膠孔中，以110V電壓于TAE電泳緩沖液中進(jìn)行16min的電泳，在凝膠成像系統(tǒng)上觀察結(jié)果。第2泳道，在508bP左右處出現(xiàn)亮帶，說明豬流行性腹瀉病毒陽性，其余病毒陰性（見圖5）。

3.2細(xì)菌檢測無菌取仔豬的肝臟、脾臟組織接種于瓊脂培養(yǎng)基，通過麥康凱和伊紅美藍(lán)鑒別培養(yǎng)基、革蘭氏染色及菌體形態(tài)，確定從仔豬體內(nèi)分離的菌體為大腸桿菌。4藥敏試驗將分離的菌均勻涂抹到營養(yǎng)瓊脂平板上，選擇6種常用抗菌藥（頭孢噻呋鈉、慶大霉素、環(huán)丙沙星、多西環(huán)素、磺胺間甲氧嘧啶、卡那霉素）均勻放置于平板上，培養(yǎng)過夜。結(jié)果顯示，該菌對卡那霉素中度敏感，對其它抗生素不敏感。5防治5.1消毒與隔離將病豬轉(zhuǎn)至隔離間，豬舍全面消毒，可選擇次氯酸成分的消毒水（84）或者是3%的氫氧化鈉溶液，對分娩舍清掃干凈，用百毒殺進(jìn)行徹底消毒后將臨產(chǎn)母豬趕入待分娩。禁止工作人員來回竄舍，防止交叉?zhèn)鞑ゲ【?.2加強飼養(yǎng)管理不同階段的豬要進(jìn)行分開飼養(yǎng)，哺乳仔豬和妊娠母豬更要進(jìn)行單獨飼養(yǎng)，避免PEDV的傳播和交叉感染，飼喂全價料保障豬的生長發(fā)育，補給微量元素和維生素。5.3藥物治療丁胺卡那霉素肌注，發(fā)病仔豬按10mg/kg體重給藥，1次/d；白細(xì)胞干擾素2000～3000IU，皮下注射，1次/d，同時口服補液鹽，飼喂乳酸桿菌，連用5d；全群用活性炭拌料，每100kg飼料加0.5kg活性炭，連喂3~5d。選用以黃連、黃芩為主藥的多種中藥方劑水煎服用。5.4血清治療用康復(fù)仔豬的血清給發(fā)病仔豬注射，1mL/頭，連用4d。6討論PEDV主要侵染初生仔豬并致病，目前針對仔豬發(fā)病無有效的免疫治療方法，必須依賴母豬初乳獲得被動免疫進(jìn)行疫病防控。因此，需要做好母豬的PED免疫。滅活疫苗免疫母豬可以產(chǎn)生較好的免疫效果，但肌肉或后海穴免疫途徑主要產(chǎn)生執(zhí)行體液免疫功能的IgG，執(zhí)行腸道黏膜保護的IgA產(chǎn)生有限，因此保護不了仔豬感染PEDV，經(jīng)典毒株和經(jīng)典毒株CV777重組容易產(chǎn)生新型變異株，且存在生物安全風(fēng)險；弱毒疫苗相對于滅活苗具有接種量少、抗體產(chǎn)生速度快等優(yōu)勢，但篩選疫苗毒株的周期過長；基因工程疫苗中的重組病毒可能存在過度致弱的問題。因此需要對包括母豬孕期免疫機理和PEDV免疫防控的諸多方面加強研究，為更加完善的PEDV免疫防控提供理論技術(shù)支撐。由于一些豬場濫用抗生素，使得大腸桿菌耐藥質(zhì)粒轉(zhuǎn)移擴散產(chǎn)生了耐藥性，對抗生素的敏感性不斷下降，因此，合理選用抗生素是非常有必要的；在飼料禁抗的大背景下，使用一些益生菌或中藥添加劑可以降低仔豬腹瀉發(fā)病率。飼料中添加益生菌可有效地調(diào)節(jié)腸道菌群。有試驗證明，在仔豬出生后未吮吸母乳前飼喂乳酸桿菌能大幅降低腹瀉死亡率。在生產(chǎn)中，可選擇“小柴胡散+阿莫西林”和“雙黃連+阿莫西林”來驅(qū)除寒濕和熱濕。7d后，筆者電話回訪，主訴豬群基本恢復(fù)正常。隨著集約化養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，仔豬腹瀉現(xiàn)象時常發(fā)生，需要高度重視，及時查明病因，精準(zhǔn)治療，除上面提到的方案外，還可