含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析

第六章

含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析

1含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024第一節(jié)含動(dòng)物藥中藥制劑的分析

牛黃及其制劑分析

麝香及其制劑的分析

熊膽及其制劑分析

蛇膽及其制劑分析

蟾酥及其制劑分析

斑蝥及其制劑分析

2含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024牛黃及其制劑分析

人工牛黃：牛膽汁或豬膽汁經(jīng)人工提取制成的淺棕色或金黃色粉末。人工培育牛黃：在牛的腹部施膽囊手術(shù)，放進(jìn)異物，注入經(jīng)培養(yǎng)的大腸桿菌菌種，人為地造成膽結(jié)石，在牛體內(nèi)埋植一年或更長時(shí)間，將核取出，凝集于核體表面的附著物，即為人工培育牛黃。牛黃的化學(xué)成分：天然牛黃及人工培育牛黃中均含有膽色素、膽汁酸、脂類、肽類、氨基酸和無機(jī)元素。3含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024牛黃及其制劑分析膽汁酸的化學(xué)反應(yīng)Pettenkofer反應(yīng)：利用蔗糖經(jīng)濃硫酸作用生成羥甲基糠醛，可與膽汁酸結(jié)合生成紫色。GregoryPascoe反應(yīng)：此反應(yīng)原理與上述Pettenkofer反應(yīng)相似。此反應(yīng)可作為膽酸的定量反應(yīng)。Hammarsten反應(yīng)：20%鉻酸溶液溶解少量樣品，溫?zé)?，膽酸顯紫色顯色。4含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024膽紅素的化學(xué)反應(yīng)

Gmelin反應(yīng)：將濃硝酸數(shù)滴沿試管壁小心加入含有膽色素的樣品中，接觸處出現(xiàn)的綠、藍(lán)、紫、紅及黃等顏色環(huán)。VandenBergh反應(yīng)（重氮化反應(yīng)）：膽紅素試劑與重氮化對(duì)氨基苯磺酸重氮鹽偶合生成偶氮染料，在強(qiáng)酸中呈藍(lán)紫色，pH2.0～5.5時(shí)呈紅色，pH5.5以上則呈綠色。

5含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024牛黃及其制劑分析定性鑒別

膽汁酸的化學(xué)反應(yīng)

理化鑒別膽紅素的化學(xué)反應(yīng)；

牛黃的顯微鑒別。吸附劑：硅膠G薄層鑒別對(duì)照品：膽酸、去氧膽酸

展開劑：異辛烷-醋酸乙酯-冰醋酸（15∶7∶5）顯色劑：10%硫酸乙醇液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。6含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024牛黃及其制劑分析含量測定

膽酸的含量測定化學(xué)法測總膽酸的含量

比色法測去氧膽酸的含量滴定法測定豬去氧膽酸的含量薄層掃描法測定膽酸的含量

膽紅素的含量測定分光光度法高效液相色譜法7含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024麝香及其制劑的分析

麝香：鹿科動(dòng)物林麝MoschusberezovskiiFlerov、馬麝MoschussifanicusPrzewalski和原麝Moschusmoschiferuslinnaeus成熟雄體臍下腺香囊中干燥分泌物。麝香的化學(xué)成分：天然麝香中的化學(xué)成分極為復(fù)雜；主要有麝香酮等大環(huán)化合物、甾族化合物、膽固醇、酯和蠟、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、無機(jī)鹽及尿囊素、膽酸和膽紅素樣物質(zhì)等其他成分。麝香酮是麝香中有香氣的主要成分，一般含量為2%～4%。8含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024麝香及其制劑的分析

理化鑒別：根據(jù)麝香仁的物理性狀及顯微特征進(jìn)行鑒別；

氣相色譜法：因麝香具揮發(fā)性，故可用GC法進(jìn)行鑒別；定性鑒別紫外光譜法：根據(jù)麝香在不同溶劑中有不同最大吸收波

長進(jìn)行鑒別；

薄層色譜法：采用適當(dāng)薄層條件對(duì)麝香供試品溶液進(jìn)行色

譜分離后，選用麝香中所含多種化學(xué)成分對(duì)其進(jìn)行鑒別。

氣相色譜法：常以麝香酮為對(duì)照品進(jìn)行測定；薄層掃描法：利用高效薄層掃描定量方法可測定麝香中3β，17α-二羥基-5α雄甾烷、3α羥基-5α雄甾烷-17酮等8種含量測定雄甾烷類化合物的含量；高效液相色譜法：利用高效液相色譜法可對(duì)麝香中5α-雄甾烷-3β，17α-二醇、5β-雄甾烷-3α，17α-二醇等8種甾體成分進(jìn)行含量測定。

9含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024熊膽及其制劑分析

熊膽:

熊科動(dòng)物黑熊SelenarctosthibetanusCuvier或棕熊UrsusarctosLinnaeus的干燥膽，是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材。

熊膽的化學(xué)成分：

熊膽中的主要化學(xué)成分為膽汁酸類（約占膽汁中的58～59%）成分，如?；切苋パ跄懰幔═UDCA）等；

膽汁酸通常與?；撬?、甘氨酸結(jié)合，以鈉鹽或鈣鹽的形式存在；

熊膽中含有的膽色素以膽紅素為主，尚有膽黃素，膽褐素；還含有多種氨基酸、膽固醇、脂肪、磷脂及無機(jī)元素。

10含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024熊膽及其制劑分析定性鑒別光譜鑒別：制備膽仁甲醇液，測定紫外吸收光譜，在273±2nm波長處有最大吸收。薄層層析法：薄層板：110℃活化的硅膠G板；展開劑：異辛烷-醋酸乙酯-醋酸（5∶5∶1）；顯色劑；噴30%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱10分鐘顯色；檢視結(jié)果：可檢出游離及結(jié)合的膽酸（黃棕色）、豬去氧膽酸（綠褐色）、熊去氧膽酸（綠褐色）、鵝去氧膽酸（綠褐色）、去氧膽酸（黃棕色）及石膽酸（紫色）。

11含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024熊膽及其制劑分析含量測定

薄層色譜-比色法：取膽酸類樣品的乙醇溶液，經(jīng)色譜分離后，刮取膽酸、去氧膽酸及甘氨膽酸相應(yīng)斑點(diǎn)，提取后在分光光度計(jì)上測定。

薄層掃描法：樣品供試液經(jīng)薄層色譜分離后，以熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸為對(duì)照品，采用薄層掃描儀掃描測定。高效液相色譜法：樣品經(jīng)適當(dāng)處理后，以?；侨パ跄懰岷团；蛆Z去氧膽酸為對(duì)照品，采用高效液相色譜法進(jìn)行測定。氣相色譜法：膽酸樣品制成乙酰基衍生物的甲酯，以膽甾醇己酸酯為內(nèi)標(biāo)物，可測定石膽酸、豬去氧膽酸、熊去氧膽酸、去氧膽酸、鵝去氧膽酸及膽酸的含量。

12含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024蛇膽及其制劑分析

1.蛇膽汁：眼鏡蛇科、游蛇科或蝰蛇科動(dòng)物多種蛇的膽汁。2.蛇膽汁化學(xué)成分：主要化學(xué)成分為膽汁酸類，且多數(shù)以與?；撬峤Y(jié)合的結(jié)合型膽甾酸形式；同時(shí)蛇膽中還有無機(jī)元素。

3.定性鑒別：多以薄層色譜法為主。薄層板：多用硅膠G薄層板；

展開系統(tǒng)：常用的有異戊醇-冰醋酸-水（18∶10∶6）或（9∶3∶1）；甲苯-冰醋酸-水（10∶10∶1）；異辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水（10∶5∶5∶3∶1）等。對(duì)照品：膽酸、去氧膽酸、鵝去氧膽酸、豬去氧膽酸、熊去氧膽酸、石膽酸、膽固醇、甘氨膽酸、甘氨去氧膽酸、牛磺去氧膽酸、?；蛆Z去氧膽酸等。顯色條件：30%硫酸乙醇溶液（V/V），噴后在105℃烘烤10分鐘，置紫外光燈（254nm）下觀察。

4.含量測定：蛇膽中主要成分為膽汁酸類，故其含量測定方法即是膽汁酸類成分分析方法。13含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024蟾酥及其制劑分析

蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍BufobufogargarizansCantor.蟾酥黑眶蟾蜍BufomelanostictusSchneider的干燥分泌物；

具有較強(qiáng)的生理活性；

毒性較大。

化學(xué)成分復(fù)雜；化學(xué)成分主要含有蟾酥甾二烯類（游離型稱蟾毒配基，結(jié)合型多為脂溶性的蟾酥毒素類）、強(qiáng)心甾烯蟾毒類和吲哚堿類。

14含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024蟾酥及其制劑定性鑒別

1.顯色反應(yīng)：利用蟾酥堿，蟾酥甲堿等吲哚基的顯色反應(yīng)進(jìn)行鑒別。2.紙色譜法:蟾酥氯仿提取液點(diǎn)在定性濾紙上固定相：甲酰胺展開劑：苯-氯仿（6∶4）為流動(dòng)相展開，揮干，顯色劑：噴三氯化銻氯仿液，加熱顯色，在日光或紫外光下觀察，檢識(shí)：蟾酥中10個(gè)蟾酥二烯內(nèi)酯成分呈現(xiàn)不同的顏色斑點(diǎn)。15含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024蟾酥及其制劑定性鑒別

3.紅外光譜法蟾蜍二烯內(nèi)酯類成分在1800～1700cm-1間有二個(gè)吸收峰。六元內(nèi)酯環(huán)內(nèi)共軛程度高于五元內(nèi)酯環(huán)，峰位相對(duì)向低波數(shù)移動(dòng)40cm-1。較低波數(shù)的峰是α、β不飽和羰基產(chǎn)生的正常吸收，較高波數(shù)的峰是不正常吸收，其強(qiáng)度在極性溶劑中減弱或消失。4.薄層色譜法：采用多種硅膠薄層板、溶劑系統(tǒng)和顯色方法，通過顏色和Rf值的差異進(jìn)行鑒別。5.紫外光譜法：通過比較其在不同溶劑中有不同最大吸收波長進(jìn)行鑒別。16含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024蟾酥及其制劑含量測定

1.分光光度法：樣品經(jīng)適當(dāng)處理后，采用差示分光光度法或吸收系數(shù)法進(jìn)行含量測定。

2.薄層掃描法

吸附劑：硅膠G；

展開劑：丙酮一氯仿一環(huán)己烷；λs300nm,λR340nm處進(jìn)行反射式鋸齒掃描。

可測定脂蟾毒配基、華蟾毒精、蟾毒靈、蟾毒它靈、遠(yuǎn)華蟾毒精及日蟾毒它靈等多種成分。3.氣相色譜法：樣品提取液經(jīng)柱層析或薄層層析后，采用FID檢測器，內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法定量測定。

4.高效液相色譜法：蟾酥中含有的蟾蜍甾二烯類、強(qiáng)心甾烯蟾毒類和吲哚堿類成分，都具有紫外吸收，可用高效液相色譜法測定。17含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024斑蝥及其制劑分析

1.斑蝥：芫青科昆蟲南方大斑蝥MylabrisphalerataPallas或黃黑小斑蝥MylabriscichoriiLinnaeus的干燥體。

2.化學(xué)成分：含斑蝥素（斑蝥酸酐cantharidin）1%～2%，脂肪12%，樹脂、蟻酸、甲酸、色素、揮發(fā)油、甲殼質(zhì)等。同時(shí)還含有多種無機(jī)元素。

3.定性鑒別

理化鑒別：利用斑蝥素的顯微特征及化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行鑒別。

18含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024斑蝥及其制劑分析

紙色譜法

樣品水提液點(diǎn)于新華層析濾紙上；

展開劑：正丁醇-95%乙醇-冰醋酸-水（4∶1∶1∶2）；105℃烘干后，用0.5%茚三酮溶液噴霧，于105℃加熱10分鐘；可見5個(gè)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)顯淺紅至藍(lán)紫色。

薄層色譜法吸附劑：硅膠G展開劑：氯仿-丙酮（98∶2）顯色劑：0.1%溴甲酚綠乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。19含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024斑蝥及其制劑分析4.含量測定

吸附劑：硅膠G；

薄層掃描法展開劑：氯仿-丙酮（95∶5）；顯色劑：0.04%溴甲酚綠乙醇溶液；λs=445nm,λR=605nm處掃描測定。氣相色譜法：以斑蝥素為對(duì)照品，采用外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行測定。中國藥典2000年版即采用該法測定斑蝥中斑蝥素含量。酸堿滴定法：斑蝥素可溶于氫氧化鈉溶液，據(jù)此可采用適當(dāng)指示劑進(jìn)行酸堿滴定。

20含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024第二節(jié)含礦物藥中藥制劑的分析

1.礦物藥的分類

（1）含砷的礦物藥：如雄黃、雌黃、信石、砒霜等。（2）含汞的礦物藥：如朱砂、靈砂、輕粉、紅粉、白降丹等。（3）含鉛的礦物藥：如紅丹、鉛粉、密陀僧、鉛霜等。（4）含銅的礦物藥：如膽礬、銅綠、綠鹽、扁青、曾青、空青等。（5）含鐵的礦物藥：如赭石、磁石、禹余糧、皂礬、針砂、黃礬等。（6）含鈣的礦物藥：如石膏、鐘乳石、花蕊石、紫石英、寒水石、石灰華等。（7）含硅的礦物藥：如滑石、白石英、陽起石、青礞石、云母石、麥飯石等。（8）含硫的礦物藥：如芒硝、樸硝、玄明粉、硫黃等。（9）含氯的礦物藥：如大青鹽、秋石、紫腦砂、白腦砂等。（10）其他礦物藥：白礬、爐甘石、無名異、鹵堿、硼砂、硝石、琥珀等。

21含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024含礦物藥中藥制劑的分析2.礦物藥的分析方法

(1)試樣分解方法

溶解法將試樣溶解在水、酸或其他溶劑中的分解方法(濕法)通常采用水、稀酸、濃酸、混合酸的順序進(jìn)行處理。

將試樣與固體熔劑混合，然后在高溫下加熱至全熔熔融法或半熔，使欲測組分轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苡谒蛩嶂械幕衔铩?/p>

(干法)堿性熔劑（如碳酸鈉、氫氧化鈉）；熔劑酸性溶劑（如硫酸氫鉀、焦硫酸鉀）；氧化性溶劑（如過氧化鈉、碳酸鈉加硝酸鉀）；還原性溶劑（如碳酸鈉加硫）等。22含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024含礦物藥中藥制劑的分析2.礦物藥的分析方法

(2)含量測定方法化學(xué)分析法容量分析法：常用氧化還原滴定和配位滴定，如中藥密陀僧的含量測定；重量法：常用沉淀重量法，如汞的定量分析?？梢姺止夤舛确ǎ阂恍o機(jī)金屬元素可與某些化合物形成有色配合物，可用分光光度法測定。如砷鹽的檢查等。原子吸收光譜法：該法能測定幾乎全部金屬元素和一些堿金屬元素，廣泛應(yīng)用于中藥原料及其制劑中各種微量元素的分析。

23含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024含砷礦物藥及其制劑分析

雄黃（主要成分為As2S2）1.含砷的礦物藥主要有雌黃（主要成分為As2S3）砒石（主要成分為As2O3）砒霜（As2O3）2.定性鑒別：利用其中所含元素砷或硫的理化性質(zhì)進(jìn)行鑒別。3.含量測定(1)碘量法試樣用硫酸分解，轉(zhuǎn)變成亞砷酸。中和至pH=8，以淀粉直接碘量法作指示劑，用碘標(biāo)準(zhǔn)液滴至藍(lán)色。試樣采用堿熔分解后，以淀粉作指示劑，用碘標(biāo)準(zhǔn)液滴定。間接碘量法：試樣采用過氧化氫分解后，以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉溶液滴定。(2)分光光度法：采用二乙基二硫代氨基甲酸銀法測定樣品中砷含量。

24含動(dòng)物藥、礦物藥的中藥制劑分析5/8/2024含汞礦物藥及其制劑分析

水銀（主要成分Hg）朱砂（主要成分HgS）靈砂（主要成分HgS）含汞的礦物藥主要有銀朱（主要成分HgS）升藥（主要成分HgO）