血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件

血糖與血脂檢測(cè)的

分析前質(zhì)量控制1血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024主要內(nèi)容血糖、胰島素、糖化血紅蛋白、血脂四項(xiàng)的常用檢測(cè)方法和基本原理影響結(jié)果準(zhǔn)確性的分析前因素樣品采集、運(yùn)輸、處理、保存和檢測(cè)過程中的注意事項(xiàng)2血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024一、常用測(cè)定方法與基本原理1.血糖測(cè)定方法葡萄糖氧化酶法已糖激酶葡萄糖脫氫酶法3血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024已糖激酶（HK）法檢測(cè)原理D-葡萄糖+ATPD-6-磷酸葡萄糖+ADPD-6-磷酸葡萄糖+NADP+

6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+4血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024葡萄糖氧化酶（POD）法檢測(cè)原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+H2O+O2

葡萄糖酸+H2O2還原性色原+H2O2

氧化性色原+2H2O5血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024葡萄糖脫氫酶（GlucDH）法檢測(cè)原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+NAD+

D-葡萄糖酸--內(nèi)酯+H+6血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20242.膽固醇氧化酶法測(cè)定膽固醇酯+H2O

游離膽固醇+游離脂肪酸游離膽固醇+O2

4膽甾烯酮+H2O2H2O2+4-AAP+4-氯酚醌亞胺+2H2O7血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20243.甘油三酯測(cè)定方法LPL：脂蛋白脂酶GK：甘油激酶GPO：磷酸甘油氧化酶POD：過氧化物酶8血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20244.HDL-C測(cè)定原理9血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20245.LDL-C測(cè)定原理10血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

6.胰島素測(cè)定（電化學(xué)發(fā)光法）11血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/202412血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/202413血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20247.糖化血紅蛋白（HbA1c）HbA95~97%血紅蛋白AHbA090%非糖化血紅蛋白部分HbA15%~7%糖化血紅蛋白A0（

2

2）-HbA1a果糖1-,6-二磷酸的糖化葡萄糖-6-磷酸的糖化糖化HbA1

鏈-HbA1bHbA1帶有未知反應(yīng)部分-HbA1c75~80%的HbA1，在

鏈-N末端纈氨酸D-葡萄糖糖化HbA2<3%血紅蛋白A（

2

2）HbF<1%血紅蛋白A（

2

2）HbSHbC14血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024糖化血紅蛋白（HbA1c）的檢測(cè)方法陽離子交換色譜法親和層析色譜法免疫分析電泳（等電聚焦）硫代巴比妥酸比色測(cè)定15血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024陽離子交換色譜法的影響因素醛亞胺被部分測(cè)定，乙醛副產(chǎn)品干擾HbF、HbH、HbBart’s使結(jié)果偏高Hb變異體干擾，HbS、HbC使結(jié)果偏低對(duì)溫度和pH敏感肝素抗凝使測(cè)定結(jié)果偏高參考區(qū)間不適用于溶血性貧血患者結(jié)果判斷16血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024HbA1c的質(zhì)量控制對(duì)患者準(zhǔn)備和采樣無特殊要求體外高糖血癥時(shí)，糖化將繼續(xù)進(jìn)行，早測(cè)定長時(shí)間儲(chǔ)存樣本（3~4d）后，RBC產(chǎn)生血紅蛋白相關(guān)的谷胱甘肽加合物（HbA1d/HbA3

）產(chǎn)生干擾溶血產(chǎn)物不如全血穩(wěn)定17血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024患者的準(zhǔn)備：視樣本類型和分析項(xiàng)目而定樣本采集的技術(shù)要求樣本運(yùn)送樣本的儲(chǔ)存和長時(shí)間的儲(chǔ)藏分析前樣本的準(zhǔn)備已知和需考慮的生物因素和干擾因素二、影響結(jié)果準(zhǔn)確性的分析前因素

18血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024分析前影響因素生物因素可變生物因素：營養(yǎng)、禁食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動(dòng)、姿勢(shì)、氣候、身高、作息規(guī)律、治療藥物固定生物因素：性別、年齡、種族、遺傳干擾因素內(nèi)在干擾因素：溶血、脂血、膽紅素血、內(nèi)源性抗凝劑、藥物代謝物、輸注液外在干擾因素：抗凝劑、殘留洗液、細(xì)菌、真菌19血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024食物影響測(cè)定過程吸收到血液中的成分可產(chǎn)生渾濁,

顏色而干擾測(cè)定有些成分可能參與測(cè)定的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生干擾20血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024試驗(yàn)對(duì)食物的特殊要求

葡萄糖耐量試驗(yàn)

前三天要給患者足夠的碳水化合物

肌酐清除率試驗(yàn)

前不能進(jìn)食富含肌酐的食物（如肌肉）血脂測(cè)定至少2周內(nèi)保持一般飲食習(xí)慣和體重穩(wěn)定21血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024CK↑AST↑LDH↑尿酸↑（男性,可能因排泄減少）內(nèi)分泌素↓(卵泡刺激素、黃體生成素、泌乳素、性激素)

（停止運(yùn)動(dòng)后數(shù)日可恢復(fù)正常）

運(yùn)動(dòng)的影響長期運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致：22血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024短時(shí)劇烈運(yùn)動(dòng)后血液試驗(yàn)結(jié)果的改變?cè)囼?yàn)90km滑雪后40km跑步后Cr+40%+45%BUN+46%+31%Hb?33%-Ca2+?5.7%-Mg?10%-HCO3—?12%?17%K

-+23%P-+65%乳酸+113%-23血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024生理節(jié)奏晝夜周期變化舉例：

清晨：皮質(zhì)醇↑、ACTH↑、血清鐵↑、膽紅素↑

入睡時(shí)：生長激素高峰，皮質(zhì)醇最低

午夜：蛋白質(zhì)最低垂體激素：多在入睡1～2小時(shí)開始升高，在睡眠的中段達(dá)高峰24血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024月周期變化

性激素：女性按月經(jīng)周期而變化膽固醇：月經(jīng)前高，排卵時(shí)最低

纖維蛋白原：月經(jīng)前增高長周期影響

維生素D夏天高，冬天低副甲狀腺激素、鈣有輕度的相同變化

25血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

立位：

水和電解質(zhì)從血管逸出，站立5min可使血

脂升高5%，15min可升高16%

坐位：

從立位到坐位，水的再平衡分布需要

15分鐘

臥位：

從坐位到臥位，水和電解質(zhì)回到血管，血漿蛋白及和蛋白結(jié)合的物質(zhì)可降低

10%～15%

體位的影響26血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

從立位到臥位時(shí)血液成分的變化

試驗(yàn)項(xiàng)目下降（%）

Hb4(0～17)Hct6(4～9)K1(0～3)Ca4(2～7)ALT7(4～14)AST9(6～11)ALP9(5～11)IgG7IgA7IgM5

甲狀腺素11

27血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024大靜脈的血流被止血帶壓迫阻塞時(shí)，引起靜脈濾過壓升高液體和低分子量的物質(zhì)通過毛細(xì)血管逸出，使血液相對(duì)濃縮應(yīng)用止血帶的影響液體的丟失28血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

靜脈壓持續(xù)升高，流到組織的新鮮血液減少，但細(xì)胞代謝繼續(xù)進(jìn)行，使靜脈內(nèi)的代謝產(chǎn)物增加，如乳酸堆積會(huì)使鉀從細(xì)胞中漏出，血鉀升高。采血時(shí)令患者握拳、松拳的動(dòng)作也會(huì)增加代謝速率。用止血帶時(shí)緊握拳1分鐘可使血鉀升高1

1.5mmol/L。細(xì)胞內(nèi)含物的漏出29血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024靜脈閉鎖1

3分鐘內(nèi)血清成分改變舉例：

試驗(yàn)

升高（%）

總蛋白鐵總脂質(zhì)

膽固醇

AST

膽紅素

4.96.74.7

5.19.38.430血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

藥物

的影響藥物對(duì)血、尿等成分及試驗(yàn)結(jié)果的影響是一個(gè)極其復(fù)雜的問題影響途徑：

藥理作用對(duì)生理病理過程的影響藥物的毒副作用對(duì)測(cè)定方法的影響

31血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024主要作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)，兒茶酚胺明顯增加

并導(dǎo)致葡萄糖、胰島素的增加

胃泌素增加可高于基線五倍皮質(zhì)醇、5-羥色胺增加

幾種藥物影響舉例咖啡因32血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

兒茶酚胺↑

胃泌素↑

皮質(zhì)醇↑

生長激素↑（可達(dá)正常的10倍）免疫球蛋白↓

維生素B12↓

碳氧血紅蛋白↑WBC↑Hct↑尼古丁33血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

決定于每次的飲酒量和飲酒時(shí)間的長短

葡萄糖↓

甘油三酯↑

（采血前24h內(nèi)勿飲）

γ-GT↑

HDL-C↑（與飲酒量相關(guān)）

ALT、AST↑

乙醇34血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024

雌激素引起：

HDL-C↑

甲狀腺結(jié)合蛋白↑

銅藍(lán)蛋白↑

某些凝血因子↑

黃體酮引起：

HDL-C↓LDL-C↑

口服避孕藥35血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024作好對(duì)患者的解釋工作，消除患者的顧慮指導(dǎo)患者如何進(jìn)行合作避免飲食、藥物、運(yùn)動(dòng)、情緒等影響分析前影響因素控制要點(diǎn)36血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20241.護(hù)士培訓(xùn)與操作標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化責(zé)任心：檢驗(yàn)申請(qǐng)、采血管、病人的查對(duì)技術(shù)操作：抽血部位、抽血用具、抽血技術(shù)、抽血過程、抽血量

獲得“真實(shí)”樣本三、樣品采集、運(yùn)輸、處理、保存和檢測(cè)

過程中的注意事項(xiàng)37血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20242.血液樣品采集每日同一時(shí)間采血（理想時(shí)間7:00-8:00）空腹12h不在服藥期間：早晨服藥前仰臥位或從位同一手臂靜脈區(qū)38血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血操作尋找合適的靜脈（肘窩以上10cm為加壓處）無壓力下消毒（70%異丙醇，70%~80%酒精）靜脈加壓（30-50mmHg）用另一只手拉緊穿刺區(qū)域皮膚采血針針頭朝下30o刺入靜脈真空管順暢采血至4ml解除壓力取出針頭，壓迫止血（勿讓患者彎曲胳膊）39血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血技術(shù)引起的分析前變異體位：直立位比仰臥10min后蛋白質(zhì)、細(xì)胞、膽固醇、Ig、Ca等結(jié)果高3%~8%靜脈加壓持續(xù)時(shí)間：大分子量物質(zhì)增高，10min可使TP升高20%，應(yīng)<2min進(jìn)食：葡萄糖、磷酸鹽、膽紅素增加，CHO中到輕度增高OGTT試驗(yàn)前幾天應(yīng)連續(xù)攝入高碳水化合物食物40血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024采血不規(guī)范操作反復(fù)拍打、反復(fù)穿刺：凝血已啟動(dòng)凝血指標(biāo)受影響；血小板聚集影響血常規(guī)分析血量過多或過少：抗凝劑與血液比例不合適影響凝血指標(biāo)、血常規(guī)分析等血標(biāo)本凝固：

影響凝血指標(biāo)、血常規(guī)分析等溶血：針頭過細(xì)、負(fù)壓過大影響生化、凝血、血常規(guī)分析等多數(shù)項(xiàng)目靜脈輸注液體的污染：前臂靜脈連接緊密，采血靜脈易被旁側(cè)輸液靜脈液體污染，因此,不能在輸液同側(cè)手臂靜脈取血41血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20243.抗凝劑氟化鈉（2mg/ml血）抑制血液凝固抵制糖酵解抗凝劑污染：如血液污染EDTA-K，會(huì)使血K升高，Ca和Mg降低，并使CK、ALP活性降低。42血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20244.樣本運(yùn)輸樣品儲(chǔ)存可引起：細(xì)胞代謝蒸發(fā)作用升華作用化學(xué)反應(yīng)酶活性失活微生物降解滲透作用光學(xué)作用氣體擴(kuò)散43血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024樣本運(yùn)輸要求時(shí)間：不宜過長運(yùn)送容器：密封，具一定避震性最好使用冷藏箱：1~4℃管架：一次性或可重復(fù)消毒試管：緊密橡皮塞，垂直放置標(biāo)簽：清晰易讀、信息齊全、不易脫落44血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/2024及時(shí)運(yùn)送標(biāo)本：

APTT和PT室溫2小時(shí) 尿常規(guī)室溫2小時(shí)

血生化室溫2小時(shí)血糖濃度室溫小于1小時(shí)心肌損傷標(biāo)志物小于20分鐘運(yùn)送真實(shí)標(biāo)本：切忌丟失或?yàn)⒙?biāo)本后人為復(fù)制標(biāo)本45血糖與血脂檢測(cè)的分析前質(zhì)量控制課件5/9/20245.樣本準(zhǔn)備血清：血液凝固和血塊收縮約需30min；置冰箱或低溫環(huán)境更長促凝劑、分離膠的應(yīng)用：聚苯乙烯試管溶血離心：RCF=1.12×10-5×N2×R（全血2000g15min），離心力與離心時(shí)間成反比。不超外界溫度15℃，應(yīng)低于37℃。應(yīng)在2h內(nèi)完成血清分離46血糖與血脂檢測(cè)的分