西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)

邵柏2012.7

西門子WalkAway40全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)吳李培南通大學(xué)附屬東臺醫(yī)院2015年1月8日1西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024WalkAway40全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀

一、結(jié)構(gòu)與原理二、操作流程三、保養(yǎng)及維護2024/5/922西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024基本結(jié)構(gòu)1、基本結(jié)構(gòu)

由WalkAway40儀器、測試板、快速接種系統(tǒng)和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)四部分組成。

2024/5/933西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024基本結(jié)構(gòu)MicroScan測試板的類型1、革蘭陽性板2、革蘭陰性板3、厭氧菌板4、酵母菌板5、苛養(yǎng)菌板4西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理2、原理：

MicroScan的WalkAway系列則采用8進制計算法分別將28個生化反應(yīng)轉(zhuǎn)換成8位生物數(shù)碼。計算機系統(tǒng)自動將這些生物數(shù)碼與編碼數(shù)據(jù)庫進行對比獲得相似系統(tǒng)鑒定值?？焖贌晒飧锾m陽(陰)性板則根據(jù)熒光法的鑒定原理熒光物質(zhì)均勻地混在培養(yǎng)基中將菌種接種到鑒定板后通過檢測熒光底物的水解、底物被利用后的pH變化、特殊代謝產(chǎn)物的生成和某些代謝產(chǎn)物的生成率來進行菌種鑒定。

2024/5/955西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理

1、WalkAwav96儀器部分測試板放入孵育箱后在20min到3h內(nèi)(山測試板的型號決定)系統(tǒng)要對測試板進行一次初讀初讀的結(jié)果將作為以后讀板結(jié)果的對照。通過比色法測定的測試板經(jīng)適當(dāng)?shù)姆跤笥行y試孔需添加試劑，此時Walk-Away系統(tǒng)會自動添加并延長孵育的時間，一般為5-30min。通過熒光法測定的測試板不需添加試劑孵育完成后系統(tǒng)立即讀板并將各孔的檢測數(shù)據(jù)自動保存起來。6西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理WalkAway的熒光測定系統(tǒng)可直接對熒光測試板各孔中產(chǎn)生的熒光進行測定，并將熒光信號轉(zhuǎn)換成電信號數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)將這些電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)碼。與原已儲存的對照值相比較，推斷出菌種的類型及藥敏結(jié)果。常規(guī)測試板則直接檢測電信號，從干涉濾光片過濾的光通過光導(dǎo)纖維導(dǎo)入測試板上的96個測試孔，光感受二極管測定通過每個測試孔的光量。產(chǎn)生相應(yīng)的電信號，從而推斷出菌種的類型及藥敏結(jié)果。在特殊情況下，藥敏測試板會出現(xiàn)讀板失敗的現(xiàn)象，此時可以用肉眼來校讀。直接觀察各孔中細(xì)菌的生長情況。若長菌，則記為陽性；若不長菌，則記為陰性，將結(jié)果輸入微機中數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)會得出藥敏結(jié)果。7西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理2.測試板采用96孔塑料板作為測試板，孔內(nèi)包被有用于菌種鑒定的生化反應(yīng)的底物，或是用于測定MIC的不同稀釋濃度的各種抗生素，每孔可容納120μl的液體。每個板中均設(shè)有對照孔和生長孔。若讀板時檢測到生長孔中的細(xì)菌生長量不夠，就會給出“生長不充分”的提示。系統(tǒng)自動延長孵育時間。MicroScan測試板的類型各測試板上都附有條形碼，上機前經(jīng)條形碼掃描器掃描后可被系統(tǒng)識別，系統(tǒng)會自動給測試板編號，以防標(biāo)本混淆。8西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理

3快速接種系統(tǒng)系統(tǒng)配有真空接種器，可一次完成96孔菌液的接種。需指出的是，有許多細(xì)菌自動鑒定系統(tǒng)都配有自動接種器。大致可分為兩類：真空接種器和活塞接種器，以真空接種器應(yīng)用較多。并且接種器上一般都配有標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)蠞舛缺葷醿x，操作時只需將稀釋好的菌液放入比濁儀中確定濃度即可。9西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024原理

4數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)換及分析處理，并具有強大的統(tǒng)計功能，可進行菌種發(fā)生率、菌種分離率、抗生素耐藥率等流行病學(xué)統(tǒng)計。10西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/202411西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024打印條碼步驟：12西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024接種常用接種方法有二種：1、Prompt快速接種法：2、Directturbidity直接比濁法：13西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024方法：使用一校準(zhǔn)過的專用取菌針去沾取相同的菌落3次，然后用環(huán)狀的蓋帽將針邊緣上多余的細(xì)菌刮掉，將取菌針插入專用的30mlPrompt接種水瓶中，徹底混勻接種，用RENOK和接種槽接種到檢測板上。14西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024適用：最適用于快速生長的細(xì)菌；菌落的大小要足夠大于取菌針的針尖，并且有散在的菌落。優(yōu)點：快速不需進行比濁。注意事項：小的菌落（小于取菌針的針尖），不建議用此方法接種。15西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024方法：

用棉簽或接種環(huán)挑取足夠的菌落到3ml的滅菌蒸餾水中，比濁至濃度與0.5麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)相當(dāng)（0.5McFarlandStd.）(用標(biāo)準(zhǔn)比濁管目測或比濁計測定)；然后取100ul此菌懸液加入到25ml的Pluronic—D水中，混勻，用RENOK和接種槽接種到測定板上。16西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程適用：快速生長的細(xì)菌、葡萄球菌（有助于更準(zhǔn)確的檢測出苯唑西林耐藥株—OxacillinResistance）。優(yōu)點：快速，可得到標(biāo)準(zhǔn)濃度的懸液。注意事項：生長緩慢的細(xì)菌和呈明顯粘液狀的細(xì)菌，效果可能不好。17西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程放板步驟18西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程查看樣本和保存結(jié)果19西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程查看樣本和保存結(jié)果20西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程報告?zhèn)鬏敳襟E21西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程修改結(jié)果步驟22西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程實驗室質(zhì)量控制:1、實驗室間質(zhì)控；按常規(guī)樣本操作程序進行2、實驗室室內(nèi)質(zhì)控；每日打印當(dāng)天儀器自身診斷報告23西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程儀器自身診斷報告步驟24西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程輸入和編輯質(zhì)控訂單步驟25西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程打印已存儲的質(zhì)控結(jié)果步驟26西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程查看已存儲的質(zhì)控結(jié)果步驟27西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024操

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程搜索方式：28西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024保

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護維護保養(yǎng):1、日常維護保養(yǎng)2、定期維護29西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024保

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護日常維護保養(yǎng)1、打印Walkaway質(zhì)控診斷報告.至少每天打印一次Walkaway質(zhì)控診斷報告。2、備份數(shù)據(jù)庫。3、查看儀器溫度，溫度必須為35°C±1°C.內(nèi)部和外部溫度讀數(shù)相

差應(yīng)<0.5°C。4、檢查儲水器并在必要時加注(內(nèi)盛無菌去離子水或無菌蒸餾水)。5、檢查試劑液位，并在需要時更換或加注試劑瓶。6、檢查試劑分配壓力，并在需要時沖洗分配管路。30西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024保

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護7、檢查試劑分配管路，并清潔分配吸頭。8、清潔試劑廢料漏斗。9、檢查廢料儲存器液位，并在需要時更換廢料袋。10、檢查輸油管.并在需要時沖洗輸油管路。11、檢查油位,并在需要時更換或加注油瓶。12、清潔參照盤和熒光計保護片。13、檢查光電二極管保護片和毛玻璃片，并在必要時進行清潔。31西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024保

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護定期維護1、至少每周清潔一次光電二極管保護片。2、至少每周清潔一次毛玻璃片。3、至少每月檢查并清潔一次進氣過濾器。32西門子WalkAway全自動細(xì)菌鑒定及藥敏儀培訓(xùn)5/9/2024保

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護注意事項1、對于小于取菌針針尖的菌落，不可用Pro