江蘇省揚州市廣陵區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考試生物試題（解析版）

高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省揚州市廣陵區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考試試題試卷滿分:100分，考試時間:75分鐘注意事項:1.作答第1卷前，請考生務(wù)必將自己的姓名、考試證號等寫在答題卡上并貼上條形碼。2.將選擇題〖答案〗填寫在答題卡的指定位置上(使用機讀卡的用2B鉛筆在機讀卡上填涂)，非選擇題一律在答題卡上作答，在試卷上答題無效。3.考試結(jié)束后，請將機讀卡和答題卡交監(jiān)考人員。第Ⅰ卷（選擇題共40分）一、單項選擇題:本大題共14小題，每小題2分，共28分。在每題給出的四個選項中，只有一項是最符合題意的。(請將所有選擇題〖答案〗填到答題卡的指定位置中。)1.從傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)到發(fā)酵工程，經(jīng)歷了漫長的歷史過程。下列關(guān)于兩者的比較，正確的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)大多為混合菌種，發(fā)酵工程大多為單一菌種B.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)不需要控制發(fā)酵條件，發(fā)酵工程需嚴(yán)格控制發(fā)酵條件C.兩者都需要對發(fā)酵原料和發(fā)酵裝置進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，以防止雜菌污染D.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程都不需要對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離和提純處理〖答案〗A〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代化工程技術(shù)手段，利用微生物的某些功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)。【詳析】A、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)常用來自自然界中的混合菌種發(fā)酵，發(fā)酵工程通常接種經(jīng)人工選育的較為單一的菌種，A正確;B、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程為了保證產(chǎn)品的品質(zhì)，均需嚴(yán)格控制發(fā)酵條件，防止雜菌污染等，B錯誤；C、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)通常僅做簡單消毒處理，未嚴(yán)格滅菌，發(fā)酵工程則需嚴(yán)格滅菌，C錯誤；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)獲得的發(fā)酵產(chǎn)物通常不需要處理，而發(fā)酵工程獲得的產(chǎn)品通常需要經(jīng)過一定的方法進(jìn)行分離、提純，D錯誤。故選A。2.下列有關(guān)傳統(tǒng)果酒、果醋發(fā)酵和腐乳制作的比較，不正確的是（）A.果酒、腐乳發(fā)酵的主要微生物屬于真核生物，果醋發(fā)酵菌種屬于原核生物B.三種發(fā)酵過程中都可以通過控制發(fā)酵溫度實現(xiàn)對微生物類型的控制C.果酒發(fā)酵在無氧環(huán)境下進(jìn)行，果醋和腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行D.果酒、果醋和腐乳制作過程利用的都是微生物胞內(nèi)酶〖答案〗D【詳析】A.參與果酒制作的酵母菌和參與腐乳制作的毛霉都屬于真核生物，而參與果醋制作的醋酸菌屬于原核生物，A正確；B.制作果酒時需要缺氧的環(huán)境，其適宜溫度是18～25℃，而制作果醋時需要不斷通入氧氣，其適宜溫度是30～35℃，腐乳發(fā)酵的溫度是15～18℃，B正確；C.果酒發(fā)酵在無氧環(huán)境下進(jìn)行，果醋和腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行，C正確；D.腐乳制作過程利用的是毛霉的胞外酶，D錯誤；因此，本題〖答案〗選D?？键c：本題考查發(fā)酵的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能運用所學(xué)知識與觀點，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.同一種物質(zhì)可既作為碳源又作為氮源，所有碳源都能提供能量B.培養(yǎng)基中加入伊紅—亞甲藍(lán)試劑，長出的菌落為大腸桿菌菌落C.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌D.要從多種細(xì)菌中分離出某種細(xì)菌，培養(yǎng)基要用液體培養(yǎng)基〖答案〗C〖祥解〗制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，其基本過程為計算、稱量、溶解、調(diào)pH、滅菌、倒平板六個步驟；選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長，培養(yǎng)、分離出特定微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)；鑒別培養(yǎng)基：加入一些化學(xué)物質(zhì)，微生物的代謝產(chǎn)物等可以和這種物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的變化，以便鑒別和篩選某種微生物。【詳析】A、同一種物質(zhì)如牛肉膏可以既作碳源又作氮源，自養(yǎng)微生物利用的無機物碳源不提供能量，A錯誤；B、伊紅-亞甲藍(lán)是專一鑒定大腸桿菌指示劑，利用伊紅-亞甲藍(lán)固體培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌是否存在，但不能起篩選作用，B錯誤；C、為了防止雜菌污染，配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌，C正確；D、要從多種細(xì)菌中分離出某種細(xì)菌，培養(yǎng)基要用固體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基主要用于菌體的擴大，D錯誤。故選C。4.科研人員已經(jīng)研發(fā)出了一種誘導(dǎo)入類多能干細(xì)胞（或稱iPS細(xì)胞）的新方法，在這些細(xì)胞中不含外來且可能有害的DNA。如圖為該技術(shù)在人體細(xì)胞中應(yīng)用的實驗示意圖，圖中①?⑦為不同階段的細(xì)胞，a?f表示細(xì)胞所進(jìn)行的生理過程。下列敘述正確的是A.過程d、e、f體現(xiàn)了iPS細(xì)胞的全能性B.圖中所示過程中細(xì)胞內(nèi)染色體組最多可達(dá)到4個C.從遺傳物質(zhì)的角度分析，細(xì)胞分化是細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化D.若⑤⑥⑦均未失去分裂能力，則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動方向為DNA→RNA→蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗分析題圖可知，a是細(xì)胞生長，b是細(xì)胞分化，c是細(xì)胞脫分化，d、e、f是細(xì)胞再分化過程。細(xì)胞分化的實質(zhì)是不同細(xì)胞的基因的執(zhí)行情況不同，即遺傳信息的選擇性表達(dá)，從而形成了形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化。細(xì)胞的全能性是高度分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個體的潛能。具有分裂能力的細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，存在DNA分子的復(fù)制過程，因此遺傳信息的流動方向是：?！驹斘觥縟、e、f是細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞的過程，不能體現(xiàn)細(xì)胞全能性，A錯誤；人類是二倍體,含有兩個染色體組，有絲分裂后期著絲點分裂，染色體數(shù)暫時加倍，染色體組變成4個,B正確；細(xì)胞分化的實質(zhì)是不同細(xì)胞中基因的執(zhí)行情況不同，遺傳物質(zhì)沒有變化，C錯誤；若⑤⑥⑦細(xì)胞均未失去分裂能力,則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動方向均為：，D錯誤。5.2023年2月，用于治療HER2（人表皮生長因子受體2，該蛋白增多可促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的生長和擴散）陽性晚期乳腺癌的抗體偶聯(lián)藥物—“優(yōu)赫得”獲國家藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市。“優(yōu)赫得”通常由抗HER2單克隆抗體、接頭和化療藥物構(gòu)成。下列有關(guān)的敘述錯誤的是（）A.可通過體外培養(yǎng)單個B淋巴細(xì)胞來獲得抗HER2單克隆抗體B.抗HER2單克隆抗體能特異性識別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白C.抗HER2單克隆抗體能將連接化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中D.“優(yōu)赫得”具有靶點清楚、毒副作用小的優(yōu)點〖答案〗A〖祥解〗細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的基本方法：用外界抗原刺激動物（如小鼠、兔子等），使其發(fā)生免疫反應(yīng)，使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體；利用仙臺病毒或聚乙二醇等融合因子進(jìn)行誘導(dǎo)，使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與可以無限傳代的骨髓瘤細(xì)胞融合；經(jīng)過篩選，獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞；通過對雜交瘤細(xì)胞的克隆培養(yǎng)，獲得單克隆抗體?！驹斘觥緼、單個B淋巴細(xì)胞無法無限增殖分泌大量的抗體，因此不可以通過體外培養(yǎng)單個B淋巴細(xì)胞來獲得抗HER2單克隆抗體，A錯誤；B、抗體具有特異性，因此抗HER2單克隆抗體能特異性識別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白（抗原），B正確；C、由于抗HER2單克隆抗體能特異性識別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白，因此抗HER2單克隆抗體能將連接的化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中，C正確；D、“優(yōu)赫得”通常由抗HER2單克隆抗體、接頭和化療藥物構(gòu)成，會特異性將化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中，因此其具有靶點清楚、毒副作用小的優(yōu)點，D正確。故選A。6.轉(zhuǎn)基因成果令人嘆為觀止，下列成果屬于基因工程技術(shù)的是（）。A.番茄－馬鈴薯新物種 B.高產(chǎn)的青霉素菌株C.將玉米細(xì)胞內(nèi)的葉綠體移入菟絲子細(xì)胞內(nèi) D.能進(jìn)行生物固氮的酵母菌品種〖答案〗D〖祥解〗1、植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2、動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物。3、基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用?！驹斘觥緼BC、番茄一馬鈴薯新物種、將玉米細(xì)胞內(nèi)的葉綠體移入菟絲子細(xì)胞內(nèi)都屬于細(xì)胞工程技術(shù)的成果，高產(chǎn)的青霉素菌株是通過誘變育種培育的，ABC不符合題意；D、能進(jìn)行生物固氮的酵母菌品種是通過基因工程技術(shù)將固氮菌的固氨基因轉(zhuǎn)移到酵母菌細(xì)胞中實現(xiàn)的，D符合題意。故選D。7.某研究性學(xué)習(xí)小組擬培育一種名貴花卉的脫毒苗，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→生芽、生根→移栽”。相關(guān)敘述錯誤的是（）A.取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近B.外植體接種前需進(jìn)行流水沖洗、酒精消毒、次氯酸鈉處理等消毒措施C.為充分利用培養(yǎng)條件，每個錐形瓶可以接種6—8個外植體D.將組培苗移栽后，需進(jìn)行病毒接種實驗來篩選出脫毒苗〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株，該過程受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控?！驹斘觥緼、制備脫毒苗一般選取莖尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞，因為該部位細(xì)胞含病毒少，甚至不含病毒，因而可獲得無毒苗，A正確；B、消毒的原則是既要殺死材料表面的微生物，又要減少消毒劑對細(xì)胞的傷害，通常外植體接種前常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等消毒措施，B正確；C、為充分利用培養(yǎng)條件，每個錐形瓶可接種6～8個外植體，從而保證成功獲得培養(yǎng)對象，C正確；D、將組培苗移栽后，不需要進(jìn)行病毒接種實驗來篩選出脫毒苗，因為培養(yǎng)的不是抗毒苗，D錯誤。故選D。8.馬鈴薯四倍體栽培種沒有青枯病的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯二倍體野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了下圖的植物體細(xì)胞雜交實驗。下列分析正確的是（）A.用纖維素酶和果膠酶在低滲溶液中處理A和B，可獲得兩種原生質(zhì)體B.過程②形成的愈傷組織D的細(xì)胞中含6個染色體組C.過程②③中所用培養(yǎng)基生長素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同D.過程③可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定胚狀體細(xì)胞中抗青枯病基因的表達(dá)產(chǎn)物〖答案〗C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴大親本范圍，培育作物新品種。【詳析】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生質(zhì)體會吸水漲破，A錯誤；B、過程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織D是二倍體野生種和四倍體馬鈴薯通過體細(xì)胞雜交而得，可能有多種融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞，故融合細(xì)胞含有2+2=4、2+4=6或者4+4=8個染色體組，B錯誤；C、②是脫分化過程，③是再分化過程，過程②③中所用培養(yǎng)基生長素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同，C正確；D、過程③表示再分化，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗青枯病基因，但表達(dá)產(chǎn)物通常需要用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行鑒定，D錯誤。故選C。9.病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，在生物學(xué)中應(yīng)用廣泛。下列有關(guān)病毒在生物學(xué)中的應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.病毒經(jīng)滅活處理后，常用于介導(dǎo)植物細(xì)胞的融合B.某些病毒的DNA經(jīng)改造后，可用作基因工程的運載體C.病毒經(jīng)滅活處理后，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗D.某些病毒的核酸制成探針可用于檢測機體是否感染該種病毒〖答案〗A〖祥解〗1、病毒是非細(xì)胞生物，只能寄生在活細(xì)胞中進(jìn)行生命活動。病毒依據(jù)宿主細(xì)胞的種類可分為植物病毒、動物病毒和噬菌體；根據(jù)遺傳物質(zhì)來分，分為DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成。2、疫苗是將病原微生物（如細(xì)菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用轉(zhuǎn)基因等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動免疫制劑。應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)的疫苗，主要成分是病毒的表面抗原蛋白，接種后能刺激機體免疫細(xì)胞產(chǎn)生抵抗病毒的抗體?！驹斘觥緼、病毒經(jīng)滅活處理后，常用于介導(dǎo)動物細(xì)胞的融合，A錯誤；B、某些病毒的DNA經(jīng)改造后，可用作基因工程的運載體，如動植物病毒等，B正確；C、經(jīng)過滅活或減毒處理的病毒可，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗，可以激發(fā)機體的特異性免疫反應(yīng)，用于免疫預(yù)防，C正確；D、某些病毒的核酸制成探針，利用分子雜交技術(shù)，可用于檢測機體是否感染該種病毒，D正確。故選A。10.研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成所有的細(xì)胞類型，但很難分化形成胎盤。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會使二者的發(fā)育潛能相互補償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織。下列敘述正確的是（）A.將2細(xì)胞期胚胎用滅活病毒誘導(dǎo)法使2細(xì)胞融合，可得到一個含四個染色體組的細(xì)胞B.嵌合體中的ES具有自我更新能力并只能分化為胎盤等胚外組織C.嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時需移植入小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育D.嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型不同〖答案〗A〖祥解〗胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。嵌合體-遺傳學(xué)上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現(xiàn)的個體?！驹斘觥緼、正常小鼠是二倍體，所以兩個處于2細(xì)胞期胚胎的細(xì)胞用滅活病毒誘導(dǎo)法融合后，可得到一個含四個染色體組的細(xì)胞，A正確；B、嵌合體中的ES具有自我更新能力，但很難分化形成胎盤，B錯誤；C、嵌合體胚胎發(fā)育至桑葚胚或囊胚期再移植入小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育，C錯誤；D、四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體會使二者的發(fā)育潛能相互補償，得到的ES小鼠中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同，D錯誤。故選A。11.線粒體置換技術(shù)是將媽媽攜帶突變線粒體的卵子細(xì)胞核移植到去核的健康線粒體捐贈者卵胞漿中獲得的重構(gòu)卵母細(xì)胞，與攜帶者丈夫精子進(jìn)行受精，從而獲得重構(gòu)胚胎也就是通常說的“三親胚胎”，也被稱為“第四代試管嬰兒”。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.重構(gòu)卵母細(xì)胞需培養(yǎng)成熟才可以與獲能精子受精B.第四代試管嬰兒的DNA來自攜帶者與其丈夫C.第四代試管嬰兒可避免線粒體疾病D.第四代試管嬰兒的培育還需要經(jīng)歷早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)〖答案〗B〖祥解〗試管嬰兒是指人的卵細(xì)胞和精子在體外完成受精作用，發(fā)育到早期胚胎的一定階段，再移入到母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育到足月誕生的嬰兒，由于受精過程和早期胚胎發(fā)育通常在試管中完成，所以叫試管嬰兒?！驹斘觥緼、體外受精時，卵母細(xì)胞需培養(yǎng)成熟至MⅡ期具備受精能力，才可以和獲能精子進(jìn)行體外受精，A正確；B、細(xì)胞中的DNA包括核DNA和質(zhì)DNA，第四代試管嬰兒的核DNA來自攜帶者及其丈夫，質(zhì)DNA來自捐贈者線粒體DNA，B錯誤；C、第四代試管嬰兒是由攜帶者突變線粒體的卵子提供細(xì)胞核，捐贈者提供去核的細(xì)胞質(zhì)，可避免攜帶者的線粒體疾病通過母系遺傳傳遞給下一代，C正確；D、第四代試管嬰兒的培育還需要經(jīng)歷早期胚胎培養(yǎng)到適宜時期，再經(jīng)歷胚胎移植等技術(shù)移植到母體子宮孕育成熟，D正確。故選B。12.將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中，培育耐鹽堿海水稻新品種。下圖PCR擴增OsMYB56時需要添加引物，應(yīng)選用的引物組合為（）A.5'—CTTGGATGAT一3和5'一TCTGTTGAAT一3'B.5'一CTTGGATGAT一3和5'一TAAGTTGTCT一3'C.5'一ATTCAACAGA一3'和5'一ATCATCCAAG一3'D.5'一ATTCAACAGA一3'和5—GAACCTACTA—3'〖答案〗A〖祥解〗PCR技術(shù)可特異性的擴增DNA片段，關(guān)鍵在于引物可以和特定DNA片段的3'端特異性結(jié)合，使Taq酶沿引物的3'端延伸子鏈。【詳析】―端為DNA鏈的5'端，―OH端為DNA鏈的3'端。進(jìn)行PCR時，引物與模板鏈的3'端結(jié)合，因此在擴增OsMYB56時需要添加的引物是5'-CTTGCATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'，A項符合題意，BCD不符合題意。故選A。13.人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后經(jīng)歷了血源性疫苗和基因工程疫苗階段。下圖為乙肝病毒基因工程疫苗的生產(chǎn)和使用過程，質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無該基因，菌落則成白色。下列相關(guān)說法不正確的是（）A.過程①最好的限制酶選擇方案是BamHⅠ和EcoRⅠB.為了使重組質(zhì)粒中目的基因正常表達(dá)，還需要插入啟動子和終止子C.過程②需要在培養(yǎng)基中加青霉素和X-gal篩選白色的大腸桿菌菌落D.基因工程疫苗比血源性疫苗更安全，但仍可能出現(xiàn)病毒增殖和感染〖答案〗D〖祥解〗1、題圖過程①表示獲取目的基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒，②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞并篩選，③表示轉(zhuǎn)基因大腸桿菌表達(dá)乙肝病毒外殼，④表示將乙肝病毒外殼作為疫苗接種，⑤表示疫苗受試者體內(nèi)出現(xiàn)抗體的過程。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、過程①表示獲取目的基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要限制酶，BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位點在目的基因兩側(cè)，可以獲得完整的目的基因，且質(zhì)粒上也存在這兩種酶的識別位點，A正確；B、為了使重組質(zhì)粒中目的基因正常表達(dá)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，除了目的基因、標(biāo)記基因外，還需要插入啟動子和終止子，B正確；C、過程②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，培養(yǎng)基中加青霉素和X-gal可以用于篩選含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ由于破壞了質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因，卻保留了青霉素抗性基因，故白色的大腸桿菌菌落即為所需菌落，C正確；D、基因工程疫苗由于只利用了乙肝病毒的外殼，不含其遺傳物質(zhì)，所有不能完成病毒的增殖和感染，D錯誤。故選D。14.胰蛋白酶極易自溶，人們運用蛋白質(zhì)工程手段對某個氨基酸進(jìn)行了缺失突變，最終得到了穩(wěn)定性明顯提高的突變株。下圖為技術(shù)流程，相關(guān)敘述正確的是（）A.a、b分別是逆轉(zhuǎn)錄、翻譯過程B.圖中分子設(shè)計的實質(zhì)是改造基因的結(jié)構(gòu)C.據(jù)圖中氨基酸序列便可確定唯一對應(yīng)的脫氧核苷酸序列D.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對象的差異〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）【詳析】A、a是以DNA為模板合成mRNA的過程，表示轉(zhuǎn)錄，b過程是以mRNA為模板合成多肽鏈的過程，表示翻譯，A錯誤；B、a蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是對基因進(jìn)行操作，操作簡單，且能遺傳給后代，即圖中分子設(shè)計的實質(zhì)是基因的結(jié)構(gòu)，B正確；C、由于密碼子的簡并性，根據(jù)推測的氨基酸序列，不能確定唯一對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，C錯誤；D、蛋白質(zhì)工程和基因工程的操作對象都是基因，D錯誤。故選B。二、多項選擇題：本部分包括4小題，每小題3分，共12分。每題不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分，選對但不全的得1分，錯選或不答的得0分。15.如圖表示植株A（雜合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的過程，下列說法錯誤的是（）A.培育植株①的過程為單倍體育種，獲得的植株為純合子B.選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C.需要通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的植株只有①③④D.植株①②④⑤與植株A基因型相同的概率分別是0、0、1、0（不考慮基因突變）〖答案〗ABC〖祥解〗分析題圖可知：對植株A的花粉經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株，而后對該單倍體幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物②是純合二倍體，該過程屬于單倍體育種。植株③的獲得采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該植株的獲得利用了誘變育種方法。植株④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種；植株⑤的培育采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)?！驹斘觥緼、對植株A（雜合子Aa）的花粉（A或a）經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株（A或a），秋水仙素處理單倍體植株①，獲得的植株②（AA或aa）為純合子，A錯誤；B、選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得植株③，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，B錯誤；C、圖中需要通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的植株是①③④⑤，該過程中利用了細(xì)胞的全能性，植株②是秋水仙素處理植株①的幼苗得到，沒有用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C錯誤；D、植株①是通過花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體植株（A或a），秋水仙素處理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通過植物組織培養(yǎng)獲得的，其基因型為Aa；植株⑤是通過植物體細(xì)胞雜交的方法獲得的，其遺傳物質(zhì)是由植株A和植株B組成的，與植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤與植株A基因型相同的概率分別是0、0、1、0，D正確。故選ABC。16.若某種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是CCTAGG，它在C和C之間切斷線性DNA。下圖表示用該酶處理某基因后產(chǎn)生的片段。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.該正?；蛑杏?個CCTAGG序列B.產(chǎn)生的DNA片段可用DNA聚合酶連接起來C.用該酶處理得到圖示基因片段要水解3個磷酸二酯鍵D.若該基因某處有一個CCTACG突變?yōu)镃CTAGG，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段〖答案〗AD〖祥解〗限制酶：（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。【詳析】A、分析題意，某種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是CCTAGG，該正?；虮磺袨?個片段，有3個切點，應(yīng)有3個CCTAGG序列，A正確；B、產(chǎn)生的DNA可用DNA連接酶連接，B錯誤；C、DNA分子是兩條鏈，用該酶處理得到圖示基因片段要水解6個磷酸二酯鍵，C錯誤；D、該限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列是CCTAGG，若該基因某處有一個CCTACG突變?yōu)镃CTAGG，則有4個切點，用該酶處理后將產(chǎn)生5個片段，D正確。故選AD。17.下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，錯誤的是（）A.用核移植生產(chǎn)的克隆動物是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制B.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將Ti質(zhì)粒上的全部基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體上C.胚胎移植技術(shù)中需要同時對供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理D.利用“生物導(dǎo)彈”殺死癌細(xì)胞借助了單克隆抗體的導(dǎo)向作用〖答案〗ABC〖祥解〗單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的特點，“生物導(dǎo)彈”是單克隆抗體和特定藥物的結(jié)合，可定向消滅靶細(xì)胞。【詳析】A、用核移植生產(chǎn)的克隆動物，其細(xì)胞質(zhì)基因來自卵母細(xì)胞，不是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制，A錯誤；B、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將Ti質(zhì)粒上T-DNA區(qū)段的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體上，B錯誤；C、胚胎移植技術(shù)中不需要對受體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理，C錯誤；D、單克隆抗體可特異性的結(jié)合癌細(xì)胞，利用“生物導(dǎo)彈”殺死癌細(xì)胞借助了單克隆抗體的導(dǎo)向作用，D正確。故選ABC。18.目的基因和載體如果用同一種限制酶處理，連接時會出現(xiàn)正反接的情況，為鑒定篩選出的表達(dá)載體中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進(jìn)行PCR后，結(jié)合電泳技術(shù)鑒定，圖示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，其中目的基因為長度300bp的片斷。下列有關(guān)說法不正確的是（）A.PCR退火溫度不宜太低，避免引物錯配和模板鏈形成雙鏈B.電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)C.選取引物甲丙，擴增出450bp長度片斷時，可以說明目的基因正接D.選取引物甲乙，擴增出400bp長度片斷時，可以說明目的基因反接〖答案〗C〖祥解〗PCR是利用 DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按 堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào) 溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶 沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制?！驹斘觥緼、退火是在高溫解旋后降低溫度讓引物與模板鏈結(jié)合，退火溫度不宜太低，避免引物錯配和模板鏈形成雙鏈，A正確；B、電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)，如電泳一段時間后，較大的DNA分子遷移距離小，離加樣孔近，而較小的DNA分子遷移距離大，離加樣孔遠(yuǎn)，B正確；C、由于使用的引物是甲和丙，沒有與基因相應(yīng)位置配對，因此不管基因正接還是反接，均為450bp，C錯誤；D、選取引物甲乙，擴增出400bp長度片斷時，可以說明目的基因反接，若正接的話，擴增出來的長度應(yīng)該是100bp，D正確。故選C。第II卷（非選擇題共60分）三、非選擇題：本部分包括5題，共60分。19.蘋果樹腐爛病由真菌感染引起，為了開發(fā)生物防治該病的途徑，研究者擬從土壤中分離篩選出能抑制蘋果樹腐爛病菌生長的芽孢桿菌，實驗流程如下圖。（1）配制培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)該在倒平板_______（填“之前”或“之后”），培養(yǎng)基滅菌的常用方法是______，為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的____做標(biāo)記，培養(yǎng)過程中應(yīng)該將培養(yǎng)皿____。（2）圖中①過程取5g土壤加入_____mL無菌水中充分震蕩得到10-1的土壤懸液。用_______法進(jìn)行接種，該過程中需要使用________（接種工具），每個濃度重復(fù)3次。37℃條件下，在_________（設(shè)備）中培養(yǎng)24小時，根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。（3）目的菌篩選時，應(yīng)取直徑為5mm的____________菌落移置于A處，B處接種__________菌。培養(yǎng)3～5天，篩選出抑菌率最高的菌株。（4）探究不同稀釋倍數(shù)的芽孢桿菌發(fā)酵原液對感染了蘋果樹腐爛病菌枝條的抑菌率的影響，進(jìn)行如下實驗：①將發(fā)酵原液稀釋0、5、20、50、100倍，選取健康果樹枝條進(jìn)行消毒和打孔。②實驗組枝條上分別涂抹等量的_______，對照組枝條上涂抹等量的______。③在所有枝條的打孔處接種等量的蘋果腐爛病菌，7天后測量并計算抑菌率?！即鸢浮剑?）①.之前②.高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌）③.皿底④.倒置（2）①.45②.稀釋涂布平板法③.涂布器④.恒溫培養(yǎng)箱（3）①.蘋果樹腐爛病菌②.芽孢桿（4）①.不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液②.無菌水〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。（1）微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作，倒平板之前應(yīng)先將培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；培養(yǎng)基的滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法，是濕熱滅菌的一種；為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿底做標(biāo)記，并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，倒置的目的是防止水分落入培養(yǎng)基造成污染。（2）要獲得稀釋了10倍的土壤懸液，應(yīng)該將5g土壤加入45mL無菌水中充分振蕩；由圖可知在不同的稀釋度下取0.1ml接種到三個平板上，這種接種方法是稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法所用的接種工具是涂布器；37℃條件下，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時，根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。（3）由圖分析可知，目的菌篩選時，應(yīng)取直徑為5mm的蘋果腐爛病菌的菌落移置于A處，B處接種從土壤中分離篩選出能抑制蘋果樹腐爛病菌生長的芽孢桿菌，培養(yǎng)3~5天，測量并計算抑菌率，篩選出抑菌率最高的菌株。（4）本實驗的目的是探究不同稀釋倍數(shù)的芽孢桿菌發(fā)酵原液對感染了蘋果樹腐爛病菌枝條的抑菌率的影響，選材結(jié)束后，實驗組枝條上應(yīng)分別涂抹等量的不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液，對照組枝條上涂抹等量的無菌水。20.早期，科學(xué)工作者從被HIV感染后自愈者的體內(nèi)獲取相應(yīng)免疫細(xì)胞，使之與骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合，生產(chǎn)HIV的抗體，具體過程見下圖1：（1）上述過程①的生物技術(shù)稱為_______________；要獲得單克隆抗體，上圖1過程最關(guān)鍵的操作要點是：首先篩選出_________________；再進(jìn)一步篩選出____________________。（2）隨后，圖2所示的技術(shù)被運用到了HIV疫苗的研制工作中，科學(xué)家用該方法產(chǎn)生的疫苗進(jìn)行預(yù)防接種，該技術(shù)的核心步驟為[]______（[]中填圖2中序號，__上填步驟名稱），圖中①過程需要_________酶的參與，②過程需要的工具酶為________，該過程提取疫苗的化學(xué)本質(zhì)為____。與上述圖1方法相比，其關(guān)鍵的優(yōu)勢是_____________________。（3）為獲取圖2中的DNA片段（目的基因），科學(xué)家需要根據(jù)_______________設(shè)計引物，若有a條起始的RNA片段，經(jīng)過圖2的①過程，再進(jìn)行PCR循環(huán)30次，理論上需要引物___________個。（4）HIV能通過細(xì)胞表面的CD4（一種受體蛋白）識別T細(xì)胞，如果給AIDS患者大量注射用CD4修飾過的紅細(xì)胞，紅細(xì)胞也會被HIV識別、入侵。科學(xué)家認(rèn)為紅細(xì)胞會成為HIV的“陷阱細(xì)胞”，可以為治療AIDS提供新的思路，這種認(rèn)知的理由是哺乳動物成熟紅細(xì)胞的特點是_________________，這種特點使得入侵的HIV__________?！即鸢浮剑?）①.動物細(xì)胞融合②.雜交瘤細(xì)胞③.能產(chǎn)生特異性強、靈敏度高抗體的雜交瘤細(xì)胞（2）①.②構(gòu)建基因表達(dá)載體②.逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶③.限制酶、DNA連接酶④.蛋白質(zhì)⑤.血液中抗體含量因代謝會逐漸降低，而注射疫苗可激發(fā)B細(xì)胞產(chǎn)生記憶細(xì)胞，較長時間維持較高抗體濃度（3）①.目的基因DNA片段上游和下游的部分核苷酸序列②.a×（231-2）（4）①.不具備細(xì)胞核和核糖體等結(jié)構(gòu)②.無法完成復(fù)制和增殖〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定。（1）圖1中①為HIV自愈者免疫細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程，該過程需要采用動物細(xì)胞融合技術(shù)，要獲得單克隆抗體，最關(guān)鍵的操作是：首先在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生特異性強、靈敏度高的抗體的雜交瘤細(xì)胞。（2）圖2為利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)HIV疫苗的過程，基因工程的核心技術(shù)為構(gòu)建基因表達(dá)載體，即圖2中②過程，圖中①過程為由RNA通過逆轉(zhuǎn)錄得到DNA的過程，該過程提取疫苗的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。與單克隆抗體獲得的方法相比，其關(guān)鍵的優(yōu)勢是血液中抗體含量因代謝會逐漸降低，而注射疫苗可激發(fā)B細(xì)胞產(chǎn)生記憶細(xì)胞，較長時間維持較高抗體濃度。（3）為獲取圖2中的DNA片段(目的基因)，科學(xué)家需要根據(jù)目的基因DNA片段上游和下游的部分核苷酸序列設(shè)計引物，通過PCR技術(shù)獲得目的基因，如果一個DNA分子通過PCR經(jīng)歷30次循環(huán)，則形成子代DNA片段為230個，有DNA鏈數(shù)為231條，其中不含引物的鏈只有2條，因此共需要引物數(shù)量為231-2，若有a條起始的RNA片段，經(jīng)過圖2的①過程，再進(jìn)行PCR循環(huán)30次，理論上獲得的目的基因片段數(shù)為a×（231-2）。（4）HIV能通過細(xì)胞表面的CD4(一種受體蛋白)識別T細(xì)胞，如果給AIDS患者大量注射用CD4修飾過的紅細(xì)胞，紅細(xì)胞也會被HIV識別、入侵。科學(xué)家認(rèn)為紅細(xì)胞會成為HIV的“陷阱細(xì)胞”，可以為治療AIDS提供新的思路，這種認(rèn)知的理由是哺乳動物成熟紅細(xì)胞的特點是不具備細(xì)胞核和核糖體及多種細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)，這種特點使得入侵的HIV無法完成遺傳物質(zhì)的復(fù)制及有關(guān)蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而使HIV無法進(jìn)行增殖。21.7歲的哈桑患有交界型大皰性表皮松解癥(JEB)，該病的病因是編碼層黏連蛋白332的基因之一LAMB3發(fā)生了突變，導(dǎo)致表皮和真皮很容易脫離，進(jìn)而產(chǎn)生水皰和糜爛，并伴有多種炎癥威脅其生命?？茖W(xué)家實施了表皮干細(xì)胞基因療法拯救了哈桑，治療過程如下圖：（1）用改造過的病毒作運載體，有利于提高基因治療成功率，下列可能的原因有_____(填字母)。a.感染率高b.對宿主細(xì)胞沒有毒性c.更易于感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞（2）改造病毒在宿主細(xì)胞中能夠合成某種“整合酶”，它能切開DNA雙鏈的特定區(qū)域，便于目的基因與宿主DNA整合，由此可推測整合酶的作用類似于基因工程工具中的________。感染過的細(xì)胞的后代就有了正確的LAMB3基因，經(jīng)過___________過程可以制造正常的層黏連蛋白332。（3）圖中過程③所涉及的技術(shù)屬于生物工程中的____________。過程③需要在_____（設(shè)備）中進(jìn)行。三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞，因為細(xì)胞分裂生長具有______________的特點。（4）干細(xì)胞移植和基因治療最大的風(fēng)險就在于導(dǎo)致癌癥。原因是載體病毒會把基因______插入基因組里，如果破壞了一些____________________，那么就有可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變。（5）當(dāng)患者全身的皮膚細(xì)胞大概更新過4輪時，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，絕大部分移植的細(xì)胞存活了，卻沒有復(fù)制留下自己的后代。由此可推測，人體皮膚是________________(選填“所有細(xì)胞”或“少數(shù)皮膚干細(xì)胞”)負(fù)責(zé)復(fù)制、分化、更新所有的皮膚?！即鸢浮剑?）abc（2）①.限制酶②.轉(zhuǎn)錄、翻譯（3）①.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)②.CO2培養(yǎng)箱③.貼壁生長和接觸抑制（4）①.隨機②.抑癌基因或原癌基因（5）少數(shù)皮膚干細(xì)胞〖祥解〗動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境；（2）營養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素之外還通常需加入血清等天然成分；（3）適宜的溫度和pH：溫度為36.5℃±0.5℃，pH為7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：CO2和O2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（1）由于改造過的病毒具有免疫原性低、感染效率高、整合性強、外源基因表達(dá)效率高，并且病毒本身具有一定的靶向性，更易于感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞，對宿主細(xì)胞沒有毒性等優(yōu)點，所以用改造過的病毒作運載體，有利于提高基因治療成功率，故選abc；（2）根據(jù)整合酶能“切開DNA雙鏈的特定區(qū)域”，推測整合酶的作用類似于基因工程工具中的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；感染過的細(xì)胞的后代有了目的基因LAMB3基因后，還需要經(jīng)過基因表達(dá)過程才可以制造正常的層黏連蛋白332；（3）圖中③是將上皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，所涉及的技術(shù)屬于生物工程中的動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，除了營養(yǎng)及氣體條件外，動物細(xì)胞培養(yǎng)所需考慮的環(huán)境條件還包括無菌無毒的環(huán)境、適宜的溫度和pH。三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞，因為貼壁細(xì)胞分裂生長到接觸抑制的特點，即細(xì)胞相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖；（4）細(xì)胞癌變的原因是原癌基因和抑癌基因突變，故載體病毒若把基因隨機插入原癌基因或抑制基因中，破壞了原癌基因和抑癌基因，可能會導(dǎo)致細(xì)胞癌變；（5）根據(jù)題干信息“絕大部分移植的細(xì)胞存活了，卻沒有復(fù)制留下自己的后代”，由此推斷是少數(shù)皮膚干細(xì)胞負(fù)責(zé)復(fù)制、分化和更新所有的皮膚，而不是所有的細(xì)胞負(fù)責(zé)該功能。22.煙草易受煙草花葉病毒（TMV）感染而大幅度減產(chǎn)。絞股藍(lán)（一種植物）細(xì)胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV煙草。（1）下表是相關(guān)研究中的一些步驟，請結(jié)合所學(xué)基因工程知識完成以下表格。實驗步驟方法要點篩選合適的目的基因從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取總RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得DNA；再通過①_____________技術(shù)擴增出大量目的基因片段②________將目的基因插入Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細(xì)胞常用③__________方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)受體細(xì)胞獲得再生植株運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株分析從分子水平與④____________水平上，對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測與鑒定部分載體結(jié)構(gòu)：LEA基因序列：（2）為研究干旱脅迫基因LEA和VOC對絞股藍(lán)油脂的積累機制，科研人員構(gòu)建了兩個基因表達(dá)載體。其中基因LEA與熒光素酶基因（Luc）構(gòu)建成基因表達(dá)載體甲，基因VOC和標(biāo)記基因構(gòu)建成基因表達(dá)載體乙，相關(guān)序列及酶切位點如圖所示。箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向。①利用PCR擴增LEA基因時，需要在引物的__________（填“3’端”或“5’端”）添加限制酶識別序列，且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制酶切位點，添加序列對應(yīng)的限制酶是______。②為了構(gòu)建基因表達(dá)載體甲，依據(jù)圖中已知堿基序列，在PCR擴增儀中加入的引物的堿基序列為______________________。③乙?！狢oA羧化酶基因（AC）是油脂合成過程的關(guān)鍵酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解過程的關(guān)鍵酶基因。將基因表達(dá)載體甲、乙分別導(dǎo)入植物細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植物A、B，在干旱脅迫的環(huán)境下培養(yǎng)兩種轉(zhuǎn)基因植物和正常植物，分別檢測植物體內(nèi)AC和ATGL基因的表達(dá)水平，結(jié)果如下圖。在分子水平上，用__________方法檢測AC酶和ATGL酶的含量可得到如下結(jié)果。

正常植株轉(zhuǎn)基因A植株轉(zhuǎn)基因B植株AC酶ATGL酶④基于以上研究，干旱脅迫基因LEA和VOC在絞股藍(lán)油脂積累中的機制是：在干旱脅迫的環(huán)境下，_______、_________。〖答案〗（1）①PCR②.基因表達(dá)構(gòu)建/構(gòu)建重組質(zhì)粒③.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化④.個體（生物學(xué)）（2）①.5’端②.EcoRV和XBal③.5’-GATATCATGGGC-3’和5’-TCTAGACTAGTG-3’④.抗原—抗體雜交⑤.LEA通過促進(jìn)AC的表達(dá)使植物油脂增加⑥.VOE通過抑制ATGL的表達(dá)減弱油脂的降低〖祥解〗基因工程的操作步驟：(1)目的基因的獲??；方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；(4)目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mR