動物實(shí)驗設(shè)計

實(shí)驗設(shè)計大綱實(shí)驗名稱：腎前性急性腎功能衰竭模型復(fù)制及解救課題來源：自選設(shè)計班級：檢驗醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)2018級檢驗一班設(shè)計人員：**設(shè)計日期：2010年11月10日指導(dǎo)老師：**實(shí)驗設(shè)計的目的意義：實(shí)驗設(shè)計的目的意義，國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，存在的問題，解決問題的思路。目的與意義。學(xué)習(xí)用去甲腎上腺素復(fù)制腎前性急性腎功能衰竭模型，觀察該模型一般狀態(tài)下、尿蛋白及尿沉渣尿素氮、肌酐水平、內(nèi)生肌酐清除率等變化測出用多巴胺解救的濃度及用量國內(nèi)外研究現(xiàn)狀未知存在的問題不知道多巴胺的最佳用量是多少，大劑量多巴胺可使腎血管明顯收縮解決問題的思路劑量過大或滴注過快可出現(xiàn)心動過速、心律失常和腎血管收縮導(dǎo)致腎功能下降，一旦出現(xiàn)以上反應(yīng)，就應(yīng)減慢滴注速度或停藥?？筛鶕?jù)心率及心律來判斷是否停藥參考文獻(xiàn)主編.金惠銘王建枝書名：病理生理學(xué)（第7版）人民衛(wèi)生出版社.251至257頁主編.楊寶峰書名.藥理學(xué)（第7版）.人民衛(wèi)生出版社.87至92頁3．主編.楊芳炬書名.機(jī)能實(shí)驗學(xué).高等教育出版社.194至196頁實(shí)驗設(shè)計方案（實(shí)驗設(shè)計目標(biāo),擬解決的主要問題,實(shí)驗動物設(shè)計,實(shí)驗專業(yè)設(shè)計，實(shí)驗統(tǒng)計設(shè)計,實(shí)驗方法設(shè)計，可行性分析,預(yù)期結(jié)果，實(shí)驗設(shè)計工作時間安排）。實(shí)驗設(shè)計目標(biāo)利用去甲腎上腺素復(fù)制急性腎功能衰竭，觀察是否有腎實(shí)質(zhì)性病變用多巴胺解救腎衰，看其效果如何擬解決的關(guān)鍵問題控制去甲腎上腺素及多巴胺的量，注意心率及心律的變化實(shí)驗設(shè)計實(shí)驗專業(yè)設(shè)計去甲腎上腺素能激動a1受體，使血管收縮，滴注時間過長或劑量過大，可是腎臟血管劇烈收縮，引起腎有效循環(huán)血量減少，導(dǎo)致腎血液灌流量和GFR顯著降低，出現(xiàn)尿量減少和氮質(zhì)血癥等多巴胺在低濃度時作用于D1受體，是通過激活腺苷酸環(huán)化酶，是使細(xì)胞內(nèi)cAMP水平提高而導(dǎo)致血管舒張。使腎血管舒張，腎血流量增加，腎小球率過濾也增加實(shí)驗動物設(shè)計（遺傳背景，微生物質(zhì)量控制，育種繁殖，飼養(yǎng)管理，動物模型，實(shí)驗動物學(xué)技術(shù)）實(shí)驗動物的選擇：家兔遺傳背景：近交系微生物質(zhì)量控制：清潔動物飼養(yǎng)管理：全價飼料喂養(yǎng)動物模型：腎前性急性腎功能衰竭實(shí)驗方法設(shè)計實(shí)驗技術(shù)路線：復(fù)制急性腎衰模型檢驗該模型的尿常規(guī)及肌酐清除率等指標(biāo)，與對照組比較輸注低濃度多巴胺后測其尿常規(guī)及肌酐清除率等指標(biāo)實(shí)驗技術(shù)方法實(shí)驗分組：實(shí)驗組（去甲腎上腺素導(dǎo)致的急性腎衰的家兔）、對照組（注射生理鹽水的家兔）模型復(fù)制：一、實(shí)驗前24h，取健康家兔兩只，稱重后進(jìn)行一下處理：實(shí)驗組：靜脈滴注去甲腎上腺素50ug溶于于100ml生理鹽水中（40滴/分鐘）對照組：靜脈滴注0.9%生理鹽水（30滴/分鐘）100ml二、24h后，捉拿家兔，稱重病麻醉（耳緣靜脈注射1.5%戊巴比妥鈉2ml/kg。麻醉后將家兔固定于兔臺，導(dǎo)尿管導(dǎo)尿，收集尿液，留作尿蛋白、尿液肌酐濃度測定三、頸部剪毛，作頸部切口，分離一側(cè)總動脈，作頸動脈插管以備取血用，分離另一側(cè)頸靜脈，作頸靜脈插管后，輸入5%葡萄糖（100ml/kg速度為50滴/min）,以保證有足夠尿量，自輸液開始記錄一小時尿量。四、頸總動脈放血5ml,離心（2500r/min,10min），取血清待測定尿素氮、肌酐含量。實(shí)驗組和對照組對比五、從耳緣靜脈輸注多巴胺（每分10ug/kg）,直到出現(xiàn)心率加快，停止。測此時尿液肌酐濃度5．實(shí)驗結(jié)果：檢測實(shí)驗組于對照組的血肌酐，尿素氮等，比較，看急性腎衰是否復(fù)制成功，輸入多巴胺溶液后，實(shí)驗組家兔的血肌酐和尿素氮等于輸入多巴胺前的對比，看多巴胺對急性腎衰的治療效果實(shí)驗設(shè)計工作時間安排實(shí)驗前24h制造模型，實(shí)驗可能用150分鐘完成實(shí)驗的條件儀器設(shè)備：哺乳動物手術(shù)器械，分光光度計，離心機(jī)，水浴鍋，顯微鏡，中試管，塑料輸尿管，酚紅標(biāo)準(zhǔn)管藥品試劑：去甲腎上腺素，多巴胺，1.5%戊巴比妥鈉，血肌酐測定試劑